| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-16页 |
| ·eIF2α激酶家族 | 第7-9页 |
| ·eIF2α激酶结构特征 | 第7-8页 |
| ·eIF2α激酶作用机制 | 第8-9页 |
| ·鱼类eIF2α激酶与PKZ | 第9-12页 |
| ·Zα研究进展 | 第12-15页 |
| ·Zα的功能 | 第12-13页 |
| ·Zα结构特征 | 第13-15页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第16页 |
| ·主要试剂、试剂盒 | 第16页 |
| ·质粒和菌株 | 第16-17页 |
| ·相关软件 | 第17页 |
| ·替换型P_(Zα1Zα1)cDNA的构建 | 第17-19页 |
| ·目的基因片段的克隆 | 第17-18页 |
| ·目的基因片段的连接与鉴定 | 第18-19页 |
| ·P_(Zα)定点突变 | 第19-22页 |
| ·引物设计 | 第20页 |
| ·质粒模板处理 | 第20-21页 |
| ·PCR扩增突变产物 | 第21-22页 |
| ·测序鉴定 | 第22页 |
| ·原核表达 | 第22-23页 |
| ·表达产物的纯化(Pz0 | 第23-24页 |
| ·P_(Zα)蛋白质浓度的测定 | 第24-25页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第24页 |
| ·样品的测定 | 第24-25页 |
| ·d(GC)_6、d(GC)_(13)和d(TA)_(13)重组质粒的构建 | 第25页 |
| ·发夹结构核酸与寡聚核酸的构建 | 第25-26页 |
| ·甲基化抑制试验 | 第26-27页 |
| ·含d(GC)_6、d(GC)_(13)片段DNA的制备 | 第26页 |
| ·甲基化抑制试验 | 第26-27页 |
| ·凝胶阻滞实验 | 第27-28页 |
| ·P_(Zα)与重组质粒d(GC)_6、d(GC)_(13)和d(TA)_(13)的结合 | 第27页 |
| ·不同浓度P_(Zα)与重组质粒d(GC)_6、d(GC)_(13)和d(TA)_(13)的结合 | 第27页 |
| ·P_(Zα)与发夹结构和寡聚核酸的结合 | 第27-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-37页 |
| ·P_(Zα1Zα1) cDNA的构建 | 第28-29页 |
| ·PCR法定点突变 | 第29-30页 |
| ·原核表达及纯化 | 第30-31页 |
| ·P_(Zα) cDNA的原核表达 | 第30-31页 |
| ·P_(Zα) 的纯化 | 第31页 |
| ·P_(Zα) 浓度的测定 | 第31-33页 |
| ·d(GC)_6、d(GC)_(13)、d(TA)_(13)重组质粒的构建 | 第33页 |
| ·甲基化抑制试验 | 第33-34页 |
| ·含d(GC)_6、d(GC)_(13)片段DNA的克隆 | 第33-34页 |
| ·甲基化抑制实验 | 第34页 |
| ·P_(Zα)与核酸分子的结合 | 第34-37页 |
| ·P_(Zα)与重组质粒d(GC))6、d(GC)_(13)和d(TA)_(13)的结合 | 第34-35页 |
| ·不同浓度P_(Zα)与d(GC)_6、d(GC)_(13)和d(TA)_(13)重组质粒结合 | 第35-36页 |
| ·P_(Zα)与发夹结构核酸和寡聚核酸的结合 | 第36-37页 |
| 第四章 讨论 | 第37-41页 |
| ·d(GC)n等核酸分子可以形成Z-DNA | 第37-38页 |
| ·Zα_(PKR-like)与d(GC)n等核酸分子的结合 | 第38页 |
| ·Zα与核酸的结合的分子机理 | 第38-41页 |
| ·Zα与核酸结合模型 | 第38-39页 |
| ·Zα与核酸相互作用的保守位点 | 第39-41页 |
| 第五章 小结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 附录1:缩略语 | 第48页 |
