‘洛阳红牡丹切花ACS1基因的原核表达及转化烟草的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| ·牡丹切花采后保鲜研究 | 第11-13页 |
| ·牡丹切花瓶插起源及其保鲜技术 | 第11页 |
| ·中国牡丹切花保鲜研究现状 | 第11-13页 |
| ·乙烯与切花衰老 | 第13-16页 |
| ·乙烯的生物合成 | 第13-14页 |
| ·切花衰老与乙烯 | 第14-16页 |
| ·ACS基因的研究 | 第16-19页 |
| ·ACS的限速作用 | 第16-17页 |
| ·ACS的研究 | 第17-18页 |
| ·导入ACS基因的研究 | 第18-19页 |
| ·基因沉默的机理 | 第19-22页 |
| ·基因沉默的概念及其发现 | 第19-20页 |
| ·基因沉默的机理 | 第20-21页 |
| ·基因沉默原理的应用 | 第21-22页 |
| ·研究目的及内容 | 第22-23页 |
| 2 ‘洛阳红'牡丹ACSl基因cDNA片段的克隆 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料及处理 | 第23页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·‘洛阳红'牡丹切花总RNA的提取 | 第24页 |
| ·反转录及PT-PCR | 第24-26页 |
| ·PCR产物的克隆及检测 | 第26-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-33页 |
| ·牡丹花瓣总RNA质量检测 | 第28页 |
| ·牡丹总RNA的RT-PCR及特异条带的获得 | 第28-29页 |
| ·牡丹ACSl克隆载体的酶切鉴定及序列分析 | 第29-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| ·应用CTAB法提取牡丹RNA的分析 | 第33页 |
| ·关于牡丹ACSl基因的分析 | 第33-35页 |
| 3 ‘洛阳红'牡丹ACSl基因的原核表达研究 | 第35-47页 |
| ·实验材料 | 第35-37页 |
| ·菌株和质粒 | 第35页 |
| ·主要实验仪器及试剂 | 第35页 |
| ·主要试剂及配制 | 第35-37页 |
| ·实验方法 | 第37-42页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第37-40页 |
| ·目的蛋白的诱导 | 第40页 |
| ·总蛋白提取 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第40-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-45页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第42-44页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 4 牡丹ACSl基因转化烟草初步研究 | 第47-57页 |
| ·材料与方法 | 第47-50页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·结果 | 第50-54页 |
| ·正、反义植物表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第51-52页 |
| ·外植体对卡那浓度敏感性实验的结果分析 | 第52页 |
| ·选择分化培养基的筛选结果 | 第52-53页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| ·关于牡丹ACSl基因正反义植物表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·烟草转化中出现的一些问题 | 第55页 |
| ·牡丹离体再生体系研究 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录:载体 | 第65-67页 |
| 个人简介 | 第67-68页 |
| 导师简介 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
