前言 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-23页 |
第一章 犬布鲁氏菌病研究进展 | 第11-23页 |
1 病原学 | 第11-13页 |
2 临床表现及病理变化 | 第13-14页 |
3 国内外犬布病疫情 | 第14-15页 |
4 犬布病流行特征 | 第15-16页 |
5 诊断 | 第16-19页 |
6 治疗 | 第19页 |
7 预防 | 第19-20页 |
参考文献 | 第20-23页 |
第二篇 试验研究 | 第23-71页 |
第一章 部分地区犬布鲁氏菌病流行情况调查 | 第23-37页 |
1 材料 | 第24页 |
2 方法 | 第24-28页 |
·血清学检测方法 | 第24-25页 |
·分离培养 | 第25页 |
·种型鉴定 | 第25-28页 |
3 结果 | 第28-32页 |
·血清学检测结果 | 第28-30页 |
·细菌分离培养及鉴定 | 第30-32页 |
4 讨论 | 第32-35页 |
参考文献 | 第35-36页 |
英文摘要 | 第36-37页 |
第二章 犬种布鲁氏菌外膜蛋白OMP31基因原核表达和鉴定 | 第37-55页 |
1 材料 | 第37-38页 |
·菌种和载体 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37-38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·主要溶液配方 | 第38页 |
2 方法 | 第38-46页 |
·PCR扩增目的基因 | 第38-39页 |
·目的基因的克隆和筛选阳性重组子 | 第39-42页 |
·原核表达载体的构建 | 第42-44页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第44-45页 |
·最佳诱导条件的确定 | 第45页 |
·表达产物的检测 | 第45-46页 |
3 结果 | 第46-50页 |
·PCR扩增 | 第46-47页 |
·TA质粒构建及序列鉴定 | 第47页 |
·重组表达载体pET-Omp31的筛选与鉴定 | 第47-48页 |
·表达产物的SDS-PAGE电泳检测以及Western-blot分析 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53页 |
英文摘要 | 第53-55页 |
第三章 重组蛋白的纯化和犬布病间接ELISA抗体检测方法的研究 | 第55-71页 |
1 材料 | 第55-56页 |
·主要试剂及血清样品 | 第55-56页 |
·主要仪器设备 | 第56页 |
·用于蛋白纯化溶液的配制 | 第56页 |
·ELISA所用溶液 | 第56页 |
2 方法 | 第56-60页 |
·重组蛋白的大量诱导表达 | 第56页 |
·目的蛋白存在情况检测 | 第56页 |
·镍柱的处理 | 第56页 |
·从包涵体中纯化目的蛋白 | 第56-57页 |
·纯化蛋白的浓缩 | 第57页 |
·重组蛋白浓度的测定及抗原性的测定 | 第57-58页 |
·重组蛋白间接ELISA检测方法的初步研究 | 第58-60页 |
3 结果 | 第60-65页 |
·重组蛋白的制备及纯化 | 第60-61页 |
·重组蛋白浓度的计算及抗原性测定 | 第61页 |
·间接ELISA方法的建立 | 第61-65页 |
4 讨论 | 第65-68页 |
参考文献 | 第68-69页 |
英文摘要 | 第69-71页 |
全文总结 | 第71-73页 |
附录 | 第73-77页 |
致谢 | 第77页 |