| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-22页 |
| ·概述 | 第10页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白及其表达调控 | 第10-14页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因 | 第11页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因转录水平的表达调控 | 第11-12页 |
| ·转录后水平调控 | 第12页 |
| ·翻译水平调控 | 第12-13页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体形成的生理生化机制 | 第13-14页 |
| ·芽胞杆菌芽胞形成及其调控 | 第14-19页 |
| ·芽胞形成的起始 | 第15-16页 |
| ·细胞不对称分裂和前芽胞的形成 | 第16页 |
| ·母细胞中的调控因子 | 第16-18页 |
| ·前芽胞中的调控因子 | 第18页 |
| ·芽胞的成熟及萌发 | 第18-19页 |
| ·杀虫蛋白基因的应用现状及问题 | 第19-21页 |
| ·重组苏云金芽胞杆菌 | 第19-20页 |
| ·转基因植物 | 第20页 |
| ·生物安全性 | 第20-21页 |
| ·本研究的立题依据和目的意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·菌株与质粒 | 第22-23页 |
| ·培养基与抗生素 | 第23页 |
| ·酶与生化试剂 | 第23页 |
| ·常用溶液及试剂 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·限制性内切酶反应体系 | 第26-27页 |
| ·DNA片段的连接 | 第27页 |
| ·E.coli质粒DNA提取 | 第27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第27-28页 |
| ·SDS-PAGE电泳(J.萨姆布鲁克,1992) | 第28页 |
| ·E.coli热击感受态制备及转化 | 第28页 |
| ·Bt电击感受态的制备和转化 | 第28-29页 |
| ·同源重组突变体的获得 | 第29页 |
| ·Bt菌株生长曲线的测定及T0的确定 | 第29页 |
| ·活芽胞记数(Aronson等,1975) | 第29页 |
| ·β-半乳糖苷酶活分析 | 第29-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-55页 |
| ·spoIIID基因的克隆与序列分析 | 第31-32页 |
| ·SpoIIID蛋白的生物信息学分析 | 第32-34页 |
| ·SpoIIID蛋白序列NCBI Blast结果及分析 | 第32-33页 |
| ·SpoIIID蛋白二级结构预测 | 第33页 |
| ·SpoIIID蛋白亲水性分析 | 第33-34页 |
| ·spoIIID基因缺失突变株的构建与鉴定 | 第34-38页 |
| ·spoIIID基因缺失片段的构建 | 第34-36页 |
| ·spoIIID基因缺失质粒的构建与鉴定 | 第36-37页 |
| ·spoIIID基因突变体的获得与验证 | 第37-38页 |
| ·spoIIID基因互补菌株的构建与筛选 | 第38-40页 |
| ·spoIIID基因突变体的特点 | 第40-43页 |
| ·生长速度 | 第40-41页 |
| ·产生芽胞和杀虫蛋白晶体的能力 | 第41页 |
| ·芽胞产量分析 | 第41-42页 |
| ·晶体蛋白的SDS-PAGE分析 | 第42-43页 |
| ·携带外源多拷贝cry1Ac基因野生和突变菌株中晶体蛋白的表达 | 第43页 |
| ·spoIIID基因突变株中启动子转录活性分析 | 第43-49页 |
| ·HD-73野生菌株中spoIIID启动子转录活性分析 | 第43-45页 |
| ·cry1Ac启动子转录活性分析 | 第45-46页 |
| ·pro-σE启动子转录活性分析 | 第46-47页 |
| ·pro-σ~K启动子转录活性分析 | 第47-49页 |
| ·gerE基因的克隆与序列分析 | 第49-50页 |
| ·GerE蛋白序列比较及结构分析 | 第50-52页 |
| ·GerE蛋白序列NCBI Blast结果 | 第50-51页 |
| ·GerE蛋白二级结构预测 | 第51页 |
| ·GerE蛋白亲水性分析 | 第51-52页 |
| ·gerE基因缺失突变株的构建与鉴定 | 第52-55页 |
| ·gerE基因缺失片段的构建 | 第52-53页 |
| ·gerE基因缺失质粒的构建与鉴定 | 第53-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-61页 |
| ·同源重组基因敲除技术 | 第55页 |
| ·spoIIID基因在苏云金芽胞杆菌HD-73菌株中可能的调控模式 | 第55-58页 |
| ·将spoIIID基因缺失菌株作为工程菌株应用的分析及前景 | 第58-59页 |
| ·gerE基因研究展望 | 第59-61页 |
| 第五章 全文主要结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
