| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-28页 |
| ·柑桔遗传转化研究进展 | 第14-17页 |
| ·柑桔遗传转化国内研究进展 | 第14-15页 |
| ·柑桔遗传转化国外研究现状 | 第15-16页 |
| ·柑桔遗传转化存在的问题 | 第16-17页 |
| ·转基因作物的安全性问题 | 第17-18页 |
| ·转基因作物环境安全性问题 | 第17-18页 |
| ·转基因作物食品安全性问题 | 第18页 |
| ·转基因作物的安全对策 | 第18-23页 |
| ·基因删除技术 | 第18-20页 |
| ·安全标记基因 | 第20-23页 |
| ·成花基因研究进展 | 第23-27页 |
| ·控制植物花发育的基因种类 | 第23-24页 |
| ·LFY 基因的研究现状 | 第24-25页 |
| ·LFY 同源基因的研究现状 | 第25-27页 |
| ·本研究的背景与意义 | 第27-28页 |
| 第二章 以PMI 为选择标记基因雪柑遗传转化体系的优化 | 第28-48页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·培养基和培养条件 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-35页 |
| ·双元表达载体pC1301-PMI-LFY 转化根癌农杆菌 | 第29-32页 |
| ·农杆菌对抗菌素的敏感性实验 | 第32-33页 |
| ·以PMI 基因为选择标记雪柑转化体系的优化 | 第33-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-41页 |
| ·重组载体pC1301-PMI-LFY 导入农杆菌EHA105 的鉴定 | 第35页 |
| ·农杆菌EHA105 对头孢霉素和羧苄青霉素的敏感性实验 | 第35-36页 |
| ·遗传转化条件的优化 | 第36-41页 |
| ·结论 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-48页 |
| ·抑菌剂的选择 | 第42页 |
| ·农杆菌侵染用工程菌液的制备与OD600 的选择 | 第42-43页 |
| ·甘露糖作为筛选剂在PMI 选择系统中的应用 | 第43页 |
| ·共培养在转化中的作用 | 第43-44页 |
| ·生长调节剂在转化中的作用 | 第44-48页 |
| 第三章 以PMI 基因为选择标记LFY 和LLFY 基因转化雪柑的研究 | 第48-67页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·培养基和培养条件 | 第48页 |
| ·主要试验试剂、实验设备 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-56页 |
| ·重组质粒pC1301-PMI-LLFY 转化农杆菌 | 第49页 |
| ·重组质粒pC1301-PMI-LLFY 转化EHA105 的鉴定 | 第49-50页 |
| ·转化程序 | 第50-51页 |
| ·壮苗时甘露糖浓度的确定及抗性植株壮苗 | 第51页 |
| ·抗性苗的生根 | 第51页 |
| ·转化目的基因抗性植株的检测 | 第51-55页 |
| ·转化率的计算 | 第55页 |
| ·移栽 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-59页 |
| ·重组载体pC1301-PMI-LLFY 导入农杆菌的检测 | 第56页 |
| ·雪柑以LFY 和LLFY 为目的基因的转化 | 第56页 |
| ·壮苗培养基中甘露糖筛选压的确定 | 第56-57页 |
| ·抗性植株壮苗 | 第57页 |
| ·抗性植株的CPR 检测 | 第57-58页 |
| ·植物基因组DNA 的提取 | 第58页 |
| ·抗性植株PCR 扩增PMI 检测 | 第58页 |
| ·转LFY 基因抗性植株LFY 基因检测 | 第58-59页 |
| ·转LLFY 基因抗性植株LLFY 基因的检测 | 第59页 |
| ·抗性植株的滤纸桥生根 | 第59页 |
| ·移苗 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-67页 |
| ·转化体的生长情况 | 第59-60页 |
| ·转基因抗性植株的生根 | 第60页 |
| ·转基因抗性植株的氯酚红（CPR）检测 | 第60-61页 |
| ·本研究的不足 | 第61-67页 |
| 第四章 根癌农杆菌介导的一种简单、快捷转化雪柑新方法的探索研究 | 第67-78页 |
| ·材料 | 第67-68页 |
| ·植物材料及载体 | 第67页 |
| ·主要仪器设备 | 第67-68页 |
| ·主要试剂 | 第68页 |
| ·方法 | 第68-72页 |
| ·工程菌液的制备 | 第68页 |
| ·农杆菌的针刺接种 | 第68页 |
| ·移栽 | 第68-69页 |
| ·针刺植株的检测 | 第69-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-73页 |
| ·针刺植株的PMI 基因检测 | 第72-73页 |
| ·针刺植株的LFY 基因检测 | 第73页 |
| ·探针效率估计 | 第73页 |
| ·针刺植株的PCR-Southern 检测 | 第73页 |
| ·转基因植株的GUS 组织化学法检测 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73-78页 |
| ·关于“针刺法”在木本植物转基因上应用的可行性讨论 | 第73-74页 |
| ·LFY 基因丢失现象说明 | 第74页 |
| ·针刺后两种接种方法的比较 | 第74-78页 |
| 第五章 植物表达载体的构建 | 第78-86页 |
| ·材料 | 第78页 |
| ·载体和菌株 | 第78页 |
| ·试剂与仪器 | 第78页 |
| ·实验方法 | 第78-82页 |
| ·引物的设计和合成 | 第78-79页 |
| ·带酶切位点的LLFY 基因cDNA 全长序列的克隆 | 第79页 |
| ·目的片段的回收 | 第79-80页 |
| ·质粒提取 | 第80页 |
| ·质粒酶切 | 第80-81页 |
| ·质粒连接反应 | 第81页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第81-82页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第82页 |
| ·LLFY 基因植物表达载体构建路线 | 第82页 |
| ·结果与分析 | 第82-83页 |
| ·植物表达载体pC2300-355-LLFY-OCS 的构建 | 第82页 |
| ·植物表达载体pC2300-355-SLLFY-OCS 的构建 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-86页 |
| 参考文献 | 第86-93页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
