| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-31页 |
| 第一章 卵母细胞孤雌激活的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.卵母细胞的激活机制 | 第15-17页 |
| ·细胞内Ca~(2+)多次持续波动引起成熟促进因子(MPF)的失活 | 第15-16页 |
| ·蛋白质合成抑制剂,通过抑制蛋白质的合成从而使MPF处于低水平 | 第16页 |
| ·蛋白磷酸化抑制剂,通过抑制cyclinB的磷酸化使MPF活性下降 | 第16-17页 |
| 2.卵母细胞激活的方法 | 第17-18页 |
| ·乙醇对卵母细胞的激活 | 第17页 |
| ·氯化锶对卵母细胞的激活 | 第17页 |
| ·钙离子载体A23187对卵母细胞的激活 | 第17页 |
| ·6-DMAP和CHX对卵母细胞的激活 | 第17-18页 |
| 3.卵母细胞孤雌激活存在的问题 | 第18页 |
| 4.卵母细胞孤雌激活的意义 | 第18页 |
| 第二章 胚胎干细胞的研究进展 | 第18-28页 |
| 1.胚胎干细胞的研究概况 | 第19-20页 |
| ·胚胎干细胞研究的里程碑 | 第19页 |
| ·小鼠ES细胞的研究进展 | 第19-20页 |
| 2.ES细胞的生物学特性 | 第20-21页 |
| ·ES细胞的形态学特征 | 第20页 |
| ·ES细胞的共同生物学特性 | 第20-21页 |
| 3.ES细胞的分离培养及ES细胞系的建立 | 第21-23页 |
| ·ES细胞分离培养及建系的材料 | 第21页 |
| ·ES细胞的培养体系 | 第21-22页 |
| ·ES细胞分离和克隆的方法 | 第22页 |
| ·ES细胞的鉴定和保存 | 第22-23页 |
| 4.ES细胞的应用前景 | 第23-26页 |
| 5.ES细胞研究所面临的挑战 | 第26-27页 |
| 6.小结 | 第27-28页 |
| 第三章 孤雌生殖胚胎干细胞的研究进展 | 第28-31页 |
| 1.孤雌胚的来源 | 第28页 |
| 2.孤雌胚胎干细胞的特点及处理方法 | 第28-29页 |
| 3.哺乳类动物孤雌胚胎干细胞系的建立 | 第29-30页 |
| 4.非人灵长类孤雌胚胎干细胞系的建立 | 第30页 |
| 5.孤雌胚胎干细胞系分化的多潜能性 | 第30页 |
| 6.应用前景 | 第30-31页 |
| 第二部分 试验部分 | 第31-54页 |
| 试验一 | 第31-44页 |
| 提高昆白小鼠杂合二倍体孤雌囊胚生成比率的孤雌激活方 法研究 | 第31页 |
| 引言 | 第31-32页 |
| 材料与方法 | 第32-44页 |
| 1.实验材料 | 第32-34页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·实验仪器与设备 | 第32页 |
| ·实验试剂 | 第32-34页 |
| 2.实验方法 | 第34-35页 |
| ·卵母细胞的收集 | 第34页 |
| ·卵母细胞的激活 | 第34页 |
| ·卵母细胞的激活判断和核型分析 | 第34-35页 |
| ·不同激活方法得到的激活卵体外培养 | 第35页 |
| ·统计学方法 | 第35页 |
| 3.试验设计及试验结果 | 第35-40页 |
| ·几种激活方法得到的孤雌激活类型 | 第35页 |
| ·乙醇浓度和处理时间对小鼠卵母细胞孤雌激活的影响 | 第35-36页 |
| ·10%乙醇处理后再用6-DMAP处理不同时间跟踪观察激活卵类型的形成 | 第36-37页 |
| ·10%乙醇结合6-DMAP处理不同时间对卵母细胞孤雌激活及孤雌胚发育的影响 | 第37页 |
| ·乙醇结合6一DMAP及CB作用h6对杂合二倍体激活卵形成的影响 | 第37-38页 |
| ·乙醇结合6-DMAP及CB作用6h对孤雌激活及孤雌胚发育的影响 | 第38-39页 |
| ·SrCl_2结合CB处理对小鼠二倍体激活卵形成的影响 | 第39页 |
| ·SrCl_2处理1小时后再用CB处理不同时间跟踪观察激活卵类型的形成 | 第39-40页 |
| ·SrCl_2单独及联合CB处理不同时间对小鼠孤雌激活及孤雌胚发育的影响 | 第40页 |
| 4.结论 | 第40页 |
| 5.讨论 | 第40-44页 |
| ·乙醇及SrCl_2对卵母细胞孤雌激活的机制 | 第40-41页 |
| ·1PN和2PN激活卵形成的可能机制 | 第41-42页 |
| ·6-DMAP和CB对二倍体激活卵的形成及孤雌胚胎发育的影响 | 第42-44页 |
| 试验二 | 第44-51页 |
| 全胚法和免疫血清法分离昆白小鼠囊胚干细胞效果观察 | 第44页 |
| 引言 | 第44-45页 |
| 材料与方法 | 第45-51页 |
| 1.实验材料 | 第45-46页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| ·主要实验仪器 | 第45页 |
| ·主要试剂、溶液及配制 | 第45-46页 |
| 2.实验方法 | 第46-48页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养及饲养层的制备 | 第46-47页 |
| ·小鼠胚胎干细胞的分离培养 | 第47-48页 |
| ·小鼠胚胎干细胞的鉴定 | 第48页 |
| 3.结果 | 第48-49页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞的形态特点 | 第48页 |
| ·囊胚贴壁及ICM增殖过程 | 第48-49页 |
| ·ESC鉴定结果 | 第49页 |
| 4.结论 | 第49页 |
| 5.讨论 | 第49-51页 |
| ·ICM的离散时间对ES细胞集落形成的影响 | 第49-50页 |
| ·饲养层培养体系和白血病抑制因子(LIF)对ES细胞分离的影响 | 第50-51页 |
| 试验三 | 第51-54页 |
| 单倍体与二倍体孤雌囊胚干细胞分离的初步研究 | 第51页 |
| 引言 | 第51-52页 |
| 材料与方法 | 第52-54页 |
| 1.实验材料 | 第52页 |
| ·实验动物 | 第52页 |
| ·主要实验仪器 | 第52页 |
| ·主要试剂、溶液及配制 | 第52页 |
| 2.实验方法 | 第52页 |
| 3.结果 | 第52页 |
| ·ICM增殖过程 | 第52页 |
| ·鉴定结果 | 第52页 |
| 4.结论 | 第52-53页 |
| 5.讨论 | 第53-54页 |
| ·孤雌囊胚无透明带与否对干细胞分离的影响 | 第53页 |
| ·IGF及LIF对胚胎贴壁及ICM增殖的影响 | 第53-54页 |
| ·孤雌囊胚倍性对干细胞分离的影响 | 第54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录1:缩略词表(Abbreviations) | 第60-61页 |
| 附录2 试验图片 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录3 发表论文 | 第70页 |
