| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-12页 |
| 第一部分 质粒pLXPXSN-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的构建 | 第12-22页 |
| 引言 | 第12页 |
| 1 材料 | 第12-14页 |
| 2 方法 | 第14-20页 |
| ·质粒pLXPXSN-TCRα12-2 的构建 | 第14-17页 |
| ·质粒pLXPXSN-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的构建 | 第17-19页 |
| ·pLXPXSN-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 以及pLXPXSN 的扩增 | 第19页 |
| ·DNA 浓度测定 | 第19-20页 |
| 3 结果 | 第20-22页 |
| ·质粒pLXPXSN-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的酶切及PCR 鉴定 | 第20-21页 |
| ·重组质粒序列测定 | 第21页 |
| ·质粒OD 值的测定 | 第21-22页 |
| 第二部分 重组逆转录病毒的包装、鉴定及滴度测定 | 第22-30页 |
| 引言 | 第22页 |
| 1 材料 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-27页 |
| ·重组逆转录病毒pLXPXSN-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的包装 | 第22-24页 |
| ·重组逆转录病毒pLXPXSN-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的鉴定和目的蛋白表达的检测 | 第24-27页 |
| 3 结果 | 第27-30页 |
| ·最佳筛选G418 浓度 | 第27-28页 |
| ·病毒滴度的确定 | 第28页 |
| ·重组逆转录病毒pLXPXSN-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组逆转录pLXPXSN-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的流式鉴定 | 第29-30页 |
| 第三部分 重组逆转录病毒对肝癌细胞的杀伤作用 | 第30-38页 |
| 引言 | 第30页 |
| 1. 材料 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-32页 |
| ·MTT 比色法检测重组逆转录病毒感染的PBMC 对肝癌细胞的存活率的影响 | 第30-31页 |
| ·流式检测重组逆转录病毒感染的PBMC 对肝癌细胞周期的影响 | 第31页 |
| ·流式细胞仪对细胞早期凋亡的检测 | 第31-32页 |
| ·统计学处理 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-38页 |
| ·MTT 比色法检测重组逆转录病毒感染的PBMC 对肝癌细胞的杀伤作用 | 第32-33页 |
| ·流式检测重组逆转录病毒感染的PBMC 对肝癌细胞周期的影响 | 第33-35页 |
| ·流式检测重组逆转录病毒感染的 PBMC 对肝癌细胞早期凋亡的影响 | 第35-38页 |
| 讨论 | 第38-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 附录一 英文缩略词表 | 第46-47页 |
| 附录二 质粒图谱 | 第47-50页 |
| 附录三 引物列表 | 第50-51页 |
| 附录四 文献综述 | 第51-58页 |
| 附录五 攻读学位期间发表的论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
