| 提要 | 第1-9页 |
| 英文缩略词表 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第1篇 文献综述 | 第12-35页 |
| 第1章 肿瘤基因治疗 | 第12-16页 |
| 第2章 细胞凋亡 | 第16-21页 |
| 1 凋亡的定义 | 第16页 |
| 2 细胞凋亡的形态学特征 | 第16页 |
| 3 细胞凋亡的生化改变 | 第16-17页 |
| 4 细胞凋亡的机理 | 第17-18页 |
| 5 细胞凋亡的检测手段 | 第18-21页 |
| 第3章 Twist 与肿瘤 | 第21-26页 |
| 第4章 RNAi 在胃癌治疗中的应用 | 第26-35页 |
| 1 RNAi 概述 | 第26页 |
| 2 RNAi 的发现 | 第26-27页 |
| 3 RNAi 的发展历程 | 第27-28页 |
| 4 RNAi 的组成 | 第28-29页 |
| 5 RNA 干扰的机制 | 第29-30页 |
| 6 RNAi 的特征 | 第30-31页 |
| 7 RNAi 在肿瘤基因治疗中的应用 | 第31-33页 |
| 8 存在问题及前景 | 第33页 |
| 9 RNAi 治疗胃癌的研究进展 | 第33-35页 |
| 第2篇 实验研究 | 第35-102页 |
| 第1章 Twist 在胃癌组织中的表达及其同临床指标之间的关系 | 第35-49页 |
| 第1节 前言 | 第35页 |
| 第2节 实验材料与方法 | 第35-43页 |
| 1 实验材料 | 第35-37页 |
| 2 实验方法 | 第37-43页 |
| 3 统计学处理 | 第43页 |
| 第3节 实验结果 | 第43-46页 |
| 1 Twist 在正常胃组织及胃癌组织中的表达情况 | 第43-44页 |
| 2 RT-PCR 检测Twist 在人胃癌细胞中基因表达情况 | 第44-45页 |
| 3 Western blot 检测人胃癌SGC7901 细胞中Twist 蛋白表达情况 | 第45-46页 |
| 第4节 讨论 | 第46-49页 |
| 第2章 Twist-siRNA 载体的构建、鉴定及在人胃癌细胞中沉默效果的检测 | 第49-61页 |
| 第1节 前言 | 第49页 |
| 第2节 实验材料和方法 | 第49-54页 |
| 1 实验材料 | 第49-51页 |
| 2 实验方法 | 第51-54页 |
| 第3节 实验结果 | 第54-58页 |
| 1 pGensil-2/Twist 重组载体的鉴定 | 第54-57页 |
| 2 细胞培养、稳定转染细胞株的筛选 | 第57页 |
| 3 RT-PCR 检测胃癌细胞中Twist 基因沉默效果 | 第57-58页 |
| 4 Western blot 检测胃癌细胞中Twist 基因沉默效果 | 第58页 |
| 第4节 讨论 | 第58-61页 |
| 第3章 Twist 基因沉默对SGC7901 细胞生长、凋亡的影响及其机制探讨 | 第61-85页 |
| 第1节 前言 | 第61页 |
| 第2节 实验材料与方法 | 第61-67页 |
| 1 实验材料及试剂 | 第61-62页 |
| 2 实验方法 | 第62-67页 |
| 第3节 实验结果 | 第67-78页 |
| 1 光镜下细胞形态观察 | 第67页 |
| 2 透射电镜下各组细胞的超微结构观察 | 第67-68页 |
| 3 各组细胞生长曲线测定 | 第68-69页 |
| 4 细胞周期检测 | 第69-70页 |
| 5 细胞凋亡DAPI 染色 | 第70-71页 |
| 6 TUNEL 法检测细胞凋亡 | 第71页 |
| 7 AnnexinV FITC/PI 染色激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况 | 第71-72页 |
| 8 流式检测细胞凋亡的结果 | 第72-73页 |
| 9 流式细胞术对各组细胞线粒体跨膜电位的测定 | 第73-74页 |
| 10 Twist 基因沉默对SGC7901 细胞caspase3 和caspase 9 活性的影响 | 第74页 |
| 11 Twist 基因沉默对SGC7901 细胞p53 蛋白表达的影响 | 第74-75页 |
| 12 Twsit 基因沉默对SGC7901 细胞Bcl-2 和Bax 蛋白表达影响 | 第75-77页 |
| 13 Twist 基因沉默对SGC7901 细胞Ca2+含量的影响 | 第77-78页 |
| 第4节 讨论 | 第78-85页 |
| 第4章 转染siRNA-Twist 基因后对SGC7901 细胞迁移、侵袭的影响及机制的初步探讨 | 第85-102页 |
| 第1节 前言 | 第85页 |
| 第2节 实验材料与方法 | 第85-90页 |
| 1 实验材料 | 第85-86页 |
| 2 实验方法 | 第86-90页 |
| 第3节 实验结果 | 第90-98页 |
| 1 软琼脂集落形成实验 | 第90-91页 |
| 2 肿瘤细胞与基质胶之间粘附性的测定 | 第91-92页 |
| 3 Twist 基因沉默对细胞铺展能力的影响 | 第92页 |
| 4 细胞划痕实验检测Twist 基因沉默对人胃癌细胞SGC7901在细胞外基质成份上迁移能力的影响 | 第92-93页 |
| 5 Boyden 小室侵袭、迁移能力检测 | 第93-95页 |
| 6 Balb/c 小鼠肾被膜下移植侵袭模型 | 第95-96页 |
| 7 明胶酶谱检测Twist 基因沉默对基质金属蛋白酶活性的影响 | 第96-98页 |
| 第4节 讨论 | 第98-102页 |
| 第3篇 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-112页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 中文摘要 | 第114-118页 |
| Abstract | 第118-121页 |
