中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-11页 |
引言 | 第11-25页 |
一、人参皂甙研究进展 | 第11-17页 |
·人参皂甙的结构和分类 | 第11-14页 |
·人参皂甙的药理学作用 | 第14-16页 |
·人参皂甙应用前景 | 第16-17页 |
二、糖苷酶转化人参皂甙的研究进展 | 第17-22页 |
·糖苷酶的来源和分类 | 第17-18页 |
·糖苷酶催化机理 | 第18-19页 |
·糖苷酶活性位点的结构特征 | 第19-20页 |
·糖苷酶的生物催化和转化 | 第20-21页 |
·糖苷酶转化人参皂甙的应用前景 | 第21-22页 |
三、立题依据及研究目标 | 第22-25页 |
·立题依据和背景 | 第22-23页 |
·研究目标和意义 | 第23-25页 |
第一章 能够转化人参皂甙Rb_1的糖苷酶的筛选 | 第25-44页 |
1 引言 | 第25-27页 |
2 材料与方法 | 第27-31页 |
·试验材料 | 第27页 |
·试剂和仪器 | 第27-28页 |
·供试菌种 | 第28页 |
·试验方法 | 第28-31页 |
3 结果与讨论 | 第31-43页 |
·植物病原真菌对人参皂甙Rb_1、Rb_2和Rc混合物的转化 | 第31-36页 |
·优化番茄褐孢霉转化人参皂甙Rb_1的转化条件 | 第36-39页 |
·优化番茄褐孢霉的产酶条件 | 第39-43页 |
4 结论 | 第43-44页 |
第二章 番茄褐孢霉产生的转化人参皂甙RB_1的糖苷酶的纯化 | 第44-67页 |
1 引言 | 第44-45页 |
2 材料与方法 | 第45-53页 |
·仪器与试剂 | 第45-47页 |
·菌种与培养基 | 第47页 |
·试验材料 | 第47页 |
·褐孢霉产生的转化人参皂甙Rb_1的β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第47-49页 |
·酶活的检测方法 | 第49-50页 |
·蛋白含量的测定 | 第50页 |
·SDS-PAGE电泳分析 | 第50-52页 |
·糖醛酸含量测定 | 第52-53页 |
·G-I的纯度鉴定 | 第53页 |
3 结果与讨论 | 第53-66页 |
·粗酶液的制备 | 第53页 |
·DEAE-纤维素吸附及NaCl洗脱 | 第53-55页 |
·硫酸铵盐析 | 第55-56页 |
·Sepharose CL-68凝胶过滤柱层析 | 第56-57页 |
·Phenyl Sepharose CL-48疏水柱层析 | 第57-59页 |
·Mono Q HR 5/5 阴离子交换柱层析(HPLC) | 第59-61页 |
·Bio-Scale CHT20-1 羟基磷灰石柱层析(HPLC) | 第61-63页 |
·G-I的纯度鉴定 | 第63-65页 |
·总结 | 第65-66页 |
4 结论 | 第66-67页 |
第三章 番茄褐孢霉产生的转化人参皂甙RB_1的糖苷酶的分子特征 | 第67-79页 |
1 引言 | 第67-69页 |
·β-葡萄糖苷酶的分类 | 第67-68页 |
·β-葡萄糖苷酶的活性中心及催化反应的模型 | 第68页 |
·β-葡萄糖苷酶的分子特征 | 第68-69页 |
2 材料与方法 | 第69-73页 |
·主要材料:番茄褐孢霉β-葡萄糖苷酶G-I,本实验室纯化产品 | 第69页 |
·试剂与仪器 | 第69-70页 |
·实验方法 | 第70-73页 |
3 结果与讨论 | 第73-78页 |
·G-I的分子量(Mr) | 第73-75页 |
·G-I的等电点(pI) | 第75-76页 |
·G-I ConA亲和层析分析 | 第76页 |
·G-I胰蛋白酶水解分析 | 第76页 |
·G-I的氨基酸序列分析 | 第76-78页 |
4 结论 | 第78-79页 |
第四章 番茄褐孢霉产生的转化人参皂甙RB_1的糖苷酶的酶学性质 | 第79-90页 |
1 引言 | 第79-80页 |
·β-葡萄糖苷酶的最适pH及pH稳定性 | 第79页 |
·β-葡萄糖苷酶的最适温度及热稳定性 | 第79页 |
·β-葡萄糖苷酶的底物专一性 | 第79-80页 |
2 材料与方法 | 第80-83页 |
·实验材料 | 第80页 |
·实验试剂和仪器 | 第80-81页 |
·实验方法 | 第81-83页 |
3 结果与讨论 | 第83-88页 |
·酶的最适反应pH值和pH稳定性 | 第83-84页 |
·酶的最适反应温度和温度稳定性 | 第84-85页 |
·金属离子和抑制剂对G-I酶活性的影响 | 第85页 |
·G-I动力学参数的测定 | 第85-86页 |
·G-I底物专一性的测定 | 第86-87页 |
·G-I水解人参皂甙的时间历程 | 第87-88页 |
·人参皂甙RB_1水解产物的13C-NMR鉴定 | 第88页 |
4 结论 | 第88-90页 |
结论 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
在学期间取得的学术成果 | 第100页 |