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一种番茄褐孢霉产生的高选择性转化人参皂甙Rb1为Rd的β-葡萄糖苷酶

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-11页
引言第11-25页
 一、人参皂甙研究进展第11-17页
   ·人参皂甙的结构和分类第11-14页
   ·人参皂甙的药理学作用第14-16页
   ·人参皂甙应用前景第16-17页
 二、糖苷酶转化人参皂甙的研究进展第17-22页
   ·糖苷酶的来源和分类第17-18页
   ·糖苷酶催化机理第18-19页
   ·糖苷酶活性位点的结构特征第19-20页
   ·糖苷酶的生物催化和转化第20-21页
   ·糖苷酶转化人参皂甙的应用前景第21-22页
 三、立题依据及研究目标第22-25页
   ·立题依据和背景第22-23页
   ·研究目标和意义第23-25页
第一章 能够转化人参皂甙Rb_1的糖苷酶的筛选第25-44页
 1 引言第25-27页
 2 材料与方法第27-31页
   ·试验材料第27页
   ·试剂和仪器第27-28页
   ·供试菌种第28页
   ·试验方法第28-31页
 3 结果与讨论第31-43页
   ·植物病原真菌对人参皂甙Rb_1、Rb_2和Rc混合物的转化第31-36页
   ·优化番茄褐孢霉转化人参皂甙Rb_1的转化条件第36-39页
   ·优化番茄褐孢霉的产酶条件第39-43页
 4 结论第43-44页
第二章 番茄褐孢霉产生的转化人参皂甙RB_1的糖苷酶的纯化第44-67页
 1 引言第44-45页
 2 材料与方法第45-53页
   ·仪器与试剂第45-47页
   ·菌种与培养基第47页
   ·试验材料第47页
   ·褐孢霉产生的转化人参皂甙Rb_1的β-葡萄糖苷酶的分离纯化第47-49页
   ·酶活的检测方法第49-50页
   ·蛋白含量的测定第50页
   ·SDS-PAGE电泳分析第50-52页
   ·糖醛酸含量测定第52-53页
   ·G-I的纯度鉴定第53页
 3 结果与讨论第53-66页
   ·粗酶液的制备第53页
   ·DEAE-纤维素吸附及NaCl洗脱第53-55页
   ·硫酸铵盐析第55-56页
   ·Sepharose CL-68凝胶过滤柱层析第56-57页
   ·Phenyl Sepharose CL-48疏水柱层析第57-59页
   ·Mono Q HR 5/5 阴离子交换柱层析(HPLC)第59-61页
   ·Bio-Scale CHT20-1 羟基磷灰石柱层析(HPLC)第61-63页
   ·G-I的纯度鉴定第63-65页
   ·总结第65-66页
 4 结论第66-67页
第三章 番茄褐孢霉产生的转化人参皂甙RB_1的糖苷酶的分子特征第67-79页
 1 引言第67-69页
   ·β-葡萄糖苷酶的分类第67-68页
   ·β-葡萄糖苷酶的活性中心及催化反应的模型第68页
   ·β-葡萄糖苷酶的分子特征第68-69页
 2 材料与方法第69-73页
   ·主要材料:番茄褐孢霉β-葡萄糖苷酶G-I,本实验室纯化产品第69页
   ·试剂与仪器第69-70页
   ·实验方法第70-73页
 3 结果与讨论第73-78页
   ·G-I的分子量(Mr)第73-75页
   ·G-I的等电点(pI)第75-76页
   ·G-I ConA亲和层析分析第76页
   ·G-I胰蛋白酶水解分析第76页
   ·G-I的氨基酸序列分析第76-78页
 4 结论第78-79页
第四章 番茄褐孢霉产生的转化人参皂甙RB_1的糖苷酶的酶学性质第79-90页
 1 引言第79-80页
   ·β-葡萄糖苷酶的最适pH及pH稳定性第79页
   ·β-葡萄糖苷酶的最适温度及热稳定性第79页
   ·β-葡萄糖苷酶的底物专一性第79-80页
 2 材料与方法第80-83页
   ·实验材料第80页
   ·实验试剂和仪器第80-81页
   ·实验方法第81-83页
 3 结果与讨论第83-88页
   ·酶的最适反应pH值和pH稳定性第83-84页
   ·酶的最适反应温度和温度稳定性第84-85页
   ·金属离子和抑制剂对G-I酶活性的影响第85页
   ·G-I动力学参数的测定第85-86页
   ·G-I底物专一性的测定第86-87页
   ·G-I水解人参皂甙的时间历程第87-88页
   ·人参皂甙RB_1水解产物的13C-NMR鉴定第88页
 4 结论第88-90页
结论第90-92页
参考文献第92-99页
致谢第99-100页
在学期间取得的学术成果第100页

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