| 缩略词 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 1 绪言 | 第12-28页 |
| ·松材线虫形态学研究及生活史 | 第12-13页 |
| ·松材线虫的分布与传播 | 第13-14页 |
| ·松材线虫的分布 | 第13页 |
| ·松材线虫的传播 | 第13-14页 |
| ·松材线虫分子生物学研究进展 | 第14-17页 |
| ·以检疫检验为目的的研究 | 第14-15页 |
| ·与致病机理相关的研究 | 第15-16页 |
| ·与生长发育相关的研究 | 第16-17页 |
| ·AChE及其编码基因的研究 | 第17-25页 |
| ·线虫AChE的作用机制 | 第18-19页 |
| ·AChE的编码基因 | 第19-20页 |
| ·AChE的结构 | 第20-23页 |
| ·AChE的基因表达系统 | 第23-24页 |
| ·AChE的转基因技术和现状存在的问题 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的意义及技术路线 | 第25-28页 |
| ·目的意义 | 第25-27页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| 2 松材线虫ace-2基因中间片段cDNA的获取 | 第28-40页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·动物材料 | 第28页 |
| ·菌株和质粒 | 第28-29页 |
| ·实验试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-35页 |
| ·松材线虫与灰葡萄孢的分离 | 第29页 |
| ·松材线虫总RNA提取及注意事项 | 第29-30页 |
| ·松材线虫总RNA的TAE电泳检测及浓度计算 | 第30-31页 |
| ·PCR引物的设计 | 第31页 |
| ·松材线虫cDNA的获取 | 第31-32页 |
| ·松材线虫ace-2基因中间片段的获取 | 第32-33页 |
| ·PCR产物电泳检测 | 第33页 |
| ·PCR产物的回收 | 第33页 |
| ·PCR产物片段的T载体连接 | 第33-34页 |
| ·质粒转化感受态细胞及菌液培养 | 第34页 |
| ·菌液PCR检测 | 第34页 |
| ·测序及测序片段的校正分析 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·松材线虫总RNA的TAE电泳检测 | 第35页 |
| ·松材线虫RNA浓度的计算 | 第35页 |
| ·ace-2基因中间片段PCR的电泳检测及凝胶回收 | 第35-36页 |
| ·菌液的PCR检测 | 第36-37页 |
| ·序列分析 | 第37-38页 |
| ·小结与讨论 | 第38-40页 |
| 3 ace-2 cDNA的3’RACE扩增 | 第40-49页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·动物材料 | 第40页 |
| ·菌株和质粒 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·引物名称及其序列 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-45页 |
| ·松材线虫总RNA提取及准备事项 | 第41页 |
| ·松材线虫总RNA的TAE电泳检测及浓度计算 | 第41页 |
| ·松材线虫ace-2基因cDNA 3’端的PCR扩增 | 第41-44页 |
| ·3’端序列PCR产物的回收 | 第44页 |
| ·3’端序列PCR产物的T载体连接 | 第44页 |
| ·质粒转化感受态细胞及菌液培养 | 第44页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第44-45页 |
| ·3’端序列的测序及分析 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-47页 |
| ·松材线虫总RNA的TAE电泳检测及浓度的计算 | 第45-46页 |
| ·松材线虫3’端序列PCR产物的电泳检测 | 第46页 |
| ·质粒的提取 | 第46页 |
| ·3’端序列的测序结果分析 | 第46-47页 |
| ·小结与讨论 | 第47-49页 |
| 4 ace-2 cDNA的5’RACE扩增 | 第49-57页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·动物材料 | 第49页 |
| ·菌株和质粒 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·引物名称及其序列 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-54页 |
| ·松材线虫总RNA提取 | 第50页 |
| ·松材线虫总RNA的TAE电泳检测及浓度计算 | 第50页 |
| ·松材线虫ace-2基因cDNA 5’端的PCR扩增 | 第50-53页 |
| ·5’端序列的巢式PCR扩增 | 第53-54页 |
| ·产物片段的测序 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-56页 |
| ·松材线虫总RNA的TAE电泳检测及浓度的计算 | 第54-55页 |
| ·松材线虫5’端序列PCR产物的电泳检测 | 第55页 |
| ·5’端序列的测序结果分析 | 第55-56页 |
| ·小结与讨论 | 第56-57页 |
| 5 松材线虫ace-2基因的cDNA序列分析 | 第57-65页 |
| ·材料与生物信息学软件 | 第57页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·生物信息学软件 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-63页 |
| ·小结与讨论 | 第63-65页 |
| 6 结论与创新 | 第65-67页 |
| ·结论 | 第65页 |
| ·创新 | 第65-66页 |
| ·进一步研究内容 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 附录A 主要试剂及培养基的配制 | 第75-76页 |
| 附录B 测序图 | 第76-79页 |
| 附录C 序列登录信息 | 第79-81页 |
| 附录D 攻读学位期间发表的论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
