| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-44页 |
| 1 植物的体细胞胚发生研究 | 第16-30页 |
| ·植物体细胞胚发生的理论依据 | 第16页 |
| ·植物体细胞胚发生的特点及途径 | 第16-18页 |
| ·影响体细胞胚发生和植株再生的因素 | 第18-24页 |
| ·基因型 | 第18页 |
| ·外植体 | 第18-20页 |
| ·培养基种类及成分 | 第20-23页 |
| ·培养条件 | 第23-24页 |
| ·木本植物体细胞胚发生 | 第24-29页 |
| ·植物次生胚发生研究概况 | 第29-30页 |
| 2 植物的体细胞无性系变异研究 | 第30-34页 |
| ·植物体细胞无性系变异的遗传学基础 | 第31页 |
| ·体细胞无性系变异的影响因素 | 第31-33页 |
| ·基因型 | 第31页 |
| ·外植体 | 第31-32页 |
| ·植株再生方式 | 第32页 |
| ·继代时间和次数 | 第32页 |
| ·培养条件 | 第32-33页 |
| ·检测方法 | 第33-34页 |
| ·形态学检测 | 第33页 |
| ·细胞学检测 | 第33页 |
| ·DNA分子标记 | 第33-34页 |
| 3 植物的转基因研究 | 第34-40页 |
| ·植物转基因研究的发展及现状 | 第34页 |
| ·植物转基因的主要方法 | 第34-36页 |
| ·植物转基因的主要方法 | 第34-35页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第35-36页 |
| ·以体细胞胚为受体的植物转基因体系的建立 | 第36-37页 |
| ·植物转基因技术在木本植物遗传改良中的应用 | 第37-40页 |
| ·雄性不育基因工程 | 第37-39页 |
| ·缩短育种周期和促进开花基因工程 | 第39-40页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第40-44页 |
| 第二章 樟树体细胞胚再生体系的优化 | 第44-68页 |
| 1 材料与方法 | 第44-47页 |
| ·试验材料 | 第44-45页 |
| ·培养条件 | 第45页 |
| ·不同培养条件对樟树体细胞胚发生的影响 | 第45-46页 |
| ·AC和培养基更新对体细胞胚发生的影响 | 第45页 |
| ·蔗糖溶液预处理对体细胞胚发生的影响 | 第45页 |
| ·基本培养基对体细胞胚发生的影响 | 第45页 |
| ·光照条件对体细胞胚发生的影响 | 第45-46页 |
| ·培养基中蔗糖浓度对体细胞胚发生的影响 | 第46页 |
| ·外源激素对樟树体细胞胚发生的影响 | 第46页 |
| ·BA、2,4-D组合对樟树体细胞胚发生的影响 | 第46页 |
| ·BA、IBA和TDZ组合对樟树体细胞胚发生的影响 | 第46页 |
| ·2,4-D对樟树体细胞胚发生的影响 | 第46页 |
| ·Picloram对樟树体细胞胚发生的影响 | 第46页 |
| ·体细胞胚的增殖 | 第46-47页 |
| ·胚性愈伤的获得和保持 | 第47页 |
| ·体细胞胚的成熟和植株再生 | 第47页 |
| ·数据统计与分析 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-61页 |
| ·樟树的体细胞胚发生 | 第47-50页 |
| ·不同培养条件对樟树体细胞胚发生的影响 | 第50-55页 |
| ·AC和培养基更新对体细胞胚发生的影响 | 第50-51页 |
| ·蔗糖溶液预处理对体细胞胚发生的影响 | 第51-53页 |
| ·基本培养基对体细胞胚发生的影响 | 第53页 |
| ·光照条件对体细胞胚发生的影响 | 第53-54页 |
| ·培养基中蔗糖浓度对体细胞胚发生的影响 | 第54-55页 |
| ·外源激素对樟树体细胞胚发生的影响 | 第55-58页 |
| ·BA、2,4-D组合对樟树体细胞胚发生的影响 | 第55-56页 |
| ·BA、IBA和TDZ组合对樟树体细胞胚发生的影响 | 第56-57页 |
| ·2,4-D对樟树体细胞胚发生的影响 | 第57页 |
| ·Picloram对樟树体细胞胚发生的影响 | 第57-58页 |
| ·体细胞胚的增殖 | 第58-60页 |
| ·樟树胚性愈伤组织的获得 | 第60页 |
| ·体细胞胚的成熟和植株再生 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-68页 |
| ·胁迫处理和樟树的体细胞胚发生 | 第61-63页 |
| ·樟树体细胞胚的起源探讨 | 第63-65页 |
| ·樟树胚性愈伤组织的获得 | 第65-68页 |
| 第三章 樟树次生胚的长期保存和次生胚再生体系的建立 | 第68-90页 |
| 1 材料与方法 | 第68-71页 |
| ·试验材料 | 第68-69页 |
| ·培养条件 | 第69页 |
| ·樟树次生胚的重复发生 | 第69页 |
| ·次生胚重复发生的组织学切片观察 | 第69页 |
| ·次生胚的进一步发育和成熟 | 第69-70页 |
| ·不同碳源对次生胚成熟的影响 | 第70页 |
| ·蔗糖浓度对次生胚成熟的影响 | 第70页 |
| ·TDZ对次生胚成熟的影响 | 第70页 |
| ·ABA对次生胚成熟的影响 | 第70页 |
| ·GA_3对次生胚成熟的影响 | 第70页 |
| ·PEG6000对次生胚成熟的影响 | 第70页 |
| ·甘油对次生胚成熟的影响 | 第70页 |
| ·次生胚的萌发 | 第70-71页 |
| ·次生胚的成苗和移栽 | 第71页 |
| ·数据统计与分析 | 第71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-83页 |
| ·樟树次生胚发生的形态学和细胞学观察 | 第71-74页 |
| ·次生胚的成熟和萌发 | 第74-82页 |
| ·TDZ对次生胚成熟的影响 | 第76页 |
| ·ABA对次生胚成熟的影响 | 第76-77页 |
| ·不同碳源对次生胚成熟的影响 | 第77-78页 |
| ·蔗糖浓度对次生胚成熟的影响 | 第78页 |
| ·GA_3对樟树次生胚成熟的影响 | 第78-79页 |
| ·PEG6000对樟树次生胚成熟的影响 | 第79-80页 |
| ·甘油对樟树次生胚成熟的影响 | 第80页 |
| ·不同培养基对樟树次生胚萌发的影响 | 第80页 |
| ·樟树不同胚性系次生胚萌发的比较 | 第80-82页 |
| ·次生胚成苗和练苗移栽 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-90页 |
| ·樟树次生胚的重复发生 | 第83-85页 |
| ·长期离体保存的次生胚的成熟和萌发 | 第85-88页 |
| ·长期离体培养对体细胞胚成熟和萌发的影响 | 第88-90页 |
| 第四章 长期离体培养的樟树体细胞胚和植株的遗传稳定性检测 | 第90-102页 |
| 1 材料与方法 | 第90-92页 |
| ·试验材料 | 第90-91页 |
| ·体细胞胚和植株的增殖 | 第91页 |
| ·总DNA提取与检测 | 第91页 |
| ·引物筛选 | 第91页 |
| ·ISSR反应体系及程序 | 第91-92页 |
| ·数据统计分析 | 第92页 |
| 2 结果与分析 | 第92-100页 |
| ·樟树体细胞胚的长期离体培养 | 第92页 |
| ·樟树再生植株的长期离体培养 | 第92-93页 |
| ·长期离体培养的樟树体细胞胚和植株的遗传稳定性检测 | 第93-100页 |
| 3 讨论 | 第100-102页 |
| 第五章 樟树遗传转化体系的完善 | 第102-118页 |
| 1 材料与方法 | 第102-107页 |
| ·试验材料 | 第102-103页 |
| ·转化受体材料 | 第102页 |
| ·供试农杆菌菌株和质粒 | 第102-103页 |
| ·主要生化试剂 | 第103页 |
| ·转化试验所用培养基配方 | 第103页 |
| ·遗传转化方法 | 第103-105页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第103-105页 |
| ·胚性愈伤组织的侵染 | 第105页 |
| ·转基因植株的培育 | 第105-106页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第105页 |
| ·抗性体细胞胚的诱导 | 第105页 |
| ·抗性体细胞胚的荧光检测 | 第105-106页 |
| ·抗性体细胞胚的成熟和萌发 | 第106页 |
| ·GFP转基因植株的获得 | 第106页 |
| ·GFP转基因植株的荧光检测 | 第106页 |
| ·GFP转基因植株的PCR检测 | 第106-107页 |
| ·GFP转基因植株的Southern blotting检测 | 第107页 |
| 2 结果与分析 | 第107-114页 |
| ·农杆菌菌体重悬对抗性愈伤组织诱导率的影响 | 第107-108页 |
| ·侵染后愈伤组织的干燥时间对抗性愈伤组织诱导率的影响 | 第108-109页 |
| ·培养基成分对抗性体细胞胚诱导的影响 | 第109页 |
| ·温度对抗性体细胞胚诱导的影响 | 第109-110页 |
| ·光照条件对抗性体细胞胚诱导的影响 | 第110页 |
| ·抗性体细胞胚的成熟 | 第110-112页 |
| ·GFP转基因植株的获得及荧光检测 | 第112页 |
| ·GFP转基因植株的PCR检测 | 第112页 |
| ·GFP转基因植株的Southern blotting检测 | 第112-114页 |
| 3 讨论 | 第114-118页 |
| ·胚性愈伤组织在樟树遗传转化中的重要性 | 第115页 |
| ·抗性愈伤和抗性体细胞胚的获得 | 第115-116页 |
| ·影响转基因植株再生的因素 | 第116-118页 |
| 第六章 樟树转化Barnase、PaFT基因的研究 | 第118-126页 |
| 1 材料与方法 | 第118-120页 |
| ·试验材料 | 第118-119页 |
| ·转化受体材料 | 第118页 |
| ·菌株和质粒 | 第118-119页 |
| ·转化试验所用培养基配方 | 第119页 |
| ·Barnase、PaFT和Barnase-PaFT的转化 | 第119页 |
| ·转基因植株的培育 | 第119页 |
| ·Barnase转基因植株的PCR检测 | 第119页 |
| ·二次转化的尝试 | 第119-120页 |
| ·转化PaFT基因抗性体细胞胚的PCR检测 | 第120页 |
| 2 结果与分析 | 第120-124页 |
| ·Barnase抗性愈伤组织和抗性体细胞胚的诱导 | 第120页 |
| ·Barnase转基因植株的获得 | 第120-121页 |
| ·Barnase转基因植株的PCR检测 | 第121-122页 |
| ·转化PaFT、Barnase-PaFT抗性愈伤组织和抗性体细胞胚的获得 | 第122-123页 |
| ·PaFT、Barnase-PaFT转基因植株的培育 | 第123页 |
| ·抗性愈伤组织的二次转化 | 第123页 |
| ·转化PaFT基因抗性体细胞胚的PCR检测 | 第123-124页 |
| 3 讨论 | 第124-126页 |
| ·PaFT基因对体细胞胚发育的影响 | 第124-125页 |
| ·二次转化在樟树遗传转化中的应用 | 第125-126页 |
| 第七章 下一步工作和展望 | 第126-128页 |
| 参考文献 | 第128-154页 |
| 附录1 部分试验操作流程 | 第154-160页 |
| 附录2 攻读博士学位期间发表的论文 | 第160-162页 |
| 致谢 | 第162页 |
