| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 综述：多聚免疫球蛋白受体（PIGR）研究进展 | 第11-24页 |
| 1 PIGR 的结构 | 第11-12页 |
| 2 PIGR 的转运过程 | 第12-14页 |
| 3 PIGR/SC 的免疫功能 | 第14-16页 |
| 4 PIGR 基因表达的调控 | 第16-20页 |
| 5 鲤鱼PIGR 研究进展 | 第20-24页 |
| 正文 | 第24-60页 |
| 第一部分 鲤鱼PIGR 的原核表达及多克隆抗体的制备 | 第24-36页 |
| 1 实验材料 | 第24-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-31页 |
| ·鲤鱼pIgR 胞外段序列的克隆 | 第27-28页 |
| ·pET-28a/pIgR 重组质粒的构建、筛选及鉴定 | 第28-29页 |
| ·pIgR 原核蛋白表达及收集 | 第29-30页 |
| ·兔抗鲤鱼pIgR 抗血清的制备 | 第30-31页 |
| 3 实验结果 | 第31-35页 |
| ·pIgR 片段的克隆 | 第31页 |
| ·pET-28a/pIgR 质粒的构建及鉴定 | 第31-33页 |
| ·pIgR 原核蛋白的诱导表达 | 第33-34页 |
| ·兔抗鲤鱼pIgR 抗血清的制备 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35页 |
| 5 小结 | 第35-36页 |
| 第二部分 鲤鱼PIGR 在不同组织的表达及免疫功能的研究 | 第36-43页 |
| 1 实验材料 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-39页 |
| ·鲤鱼各组织RNA 的提取及pIgR mRNA 水平差异检测 | 第36-37页 |
| ·免疫刺激后pIgR 基因表达量变化的研究 | 第37-38页 |
| ·免疫组织化学染色法检测pIgR 的原位表达[96] | 第38-39页 |
| 3 实验结果 | 第39-41页 |
| ·鲤鱼不同组织pIgR 的表达 | 第39-40页 |
| ·免疫刺激实验结果 | 第40页 |
| ·免疫组织化学染色结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 5 小结 | 第42-43页 |
| 第三部分 鲤鱼PIGR DNA 免疫载体的构建及抗血清的制备 | 第43-50页 |
| 1 实验材料 | 第43页 |
| 2 实验方法 | 第43-47页 |
| ·pcDNA3.1/pIgR 重组载体的构建 | 第43-45页 |
| ·pcDNA3.1/pIgR 重组质粒的大量制备 | 第45-46页 |
| ·鼠抗鲤鱼pIgR 抗血清的制备——DNA 免疫 | 第46-47页 |
| 3 实验结果 | 第47-48页 |
| ·pcDNA3.1/pIgR 重组质粒的鉴定 | 第47-48页 |
| ·pcDNA3.1/pIgR 重组质粒的浓度及纯度检测 | 第48页 |
| ·鼠抗鲤鱼pIgR 抗血清的收集 | 第48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 5 小结 | 第49-50页 |
| 第四部分 PEGFP/PIGR 重组质粒的构建及融合蛋白的表达 | 第50-60页 |
| 1 实验材料 | 第50-51页 |
| 2 实验方法 | 第51-54页 |
| ·重组真核表达载体(pEGFP/pIgR)的构建 | 第51-52页 |
| ·重组真核表达质粒(pEGFP-N1/pIgR)的大量提取及检测 | 第52页 |
| ·转染293T 细胞 | 第52-53页 |
| ·m RNA 水平检测 | 第53页 |
| ·蛋白水平的检测 | 第53-54页 |
| 3 实验结果 | 第54-58页 |
| ·pcDNA3.1/pIgR 和pEGFP-N1 质粒图谱分析 | 第54-55页 |
| ·pcDNA3.1/pIgR 和pEGFP-N1 质粒的酶切及重组 | 第55页 |
| ·pEGFP/pIgR 重组质粒的检测 | 第55-56页 |
| ·转染重组质粒48 h 后293T 细胞荧光检测 | 第56-57页 |
| ·RNA 水平的检测结果 | 第57页 |
| ·蛋白水平的检测结果 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 5 小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第71页 |
