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Bad稳定过表达细胞系的建立及Bad功能的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第1章 前言第11-25页
   ·背景知识第11-22页
     ·细胞凋亡第11页
     ·细胞凋亡与癌症第11-13页
     ·细胞凋亡经典途径:线粒体途径和死亡受体途径第13-15页
     ·天冬氨酸酶家族(Caspase 家族)第15-16页
     ·Bcl-2 家族第16-18页
     ·Bad 蛋白研究进展第18-20页
     ·G-Rh2 (ginsenoside Rh2)简介及研究进展第20-21页
     ·稳定转染原理第21-22页
   ·论文研究目的及设计思路第22-25页
     ·论文研究目的第22-23页
     ·论文设计思路第23-25页
第2章 材料与方法第25-37页
   ·材料与试剂第25-31页
     ·菌株和细胞株第25页
     ·试剂第25-26页
     ·抗体第26页
     ·主要溶液第26-31页
   ·实验方法第31-37页
     ·细胞培养第31页
     ·铺细胞第31页
     ·全细胞裂解液的制备第31-32页
     ·BCA 法测定蛋白质浓度第32页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE Assay)第32-33页
     ·蛋白免疫印迹分析(Western-Blot)第33页
     ·pEGFP-N3-Bad 质粒的构建第33-35页
     ·MTT 法检测细胞存活率第35-36页
     ·DAPI 核染色分析第36页
     ·体外 caspase-3 活力检测第36-37页
第3章 结果第37-52页
   ·Bad 过表达细胞系的建立第37-40页
     ·Bad 在 HeLa 细胞中表达量低第37页
     ·pEGFP-N3-Bad(WT)、pEGFP-N3-Bad(S91A)质粒的构建第37-38页
     ·稳定过表达 Bad(WT), Bad(S91A)的 HeLa 细胞系的建立第38-40页
   ·91 位丝氨酸对 Bad 的促凋亡作用具有重要意义第40-47页
     ·MTT 法测定 HeLa,HeLa-Bad(WT),HeLa-Bad(S91A)细胞对抗癌药物的敏感性第40-42页
     ·G-Rh2 作用下细胞凋亡的 DAPI 染色检测第42-45页
     ·光镜下检测细胞在加药 0h,4h,8h,12h 时的凋亡情况第45页
     ·caspase-3 活力测定第45-46页
     ·PARP 的断裂情况第46-47页
   ·Bad 的表达量与其促凋亡作用强度成正比第47-51页
     ·不同 HeLa-Bad(WT)细胞 Bad 表达量测定第47页
     ·MTT 法测定几种抗癌药物作用于不同表达量的 HeLa-Bad(WT)细胞效果第47-49页
     ·Caspase-3 测活力确定 G-Rh2 作用于不同表达量的 HeLa-Bad(WT)细胞效果第49-51页
   ·小结第51-52页
第4章 结论第52-53页
参考文献第53-58页
致谢第58页

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