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蛋白激发子PeaT1激发拟南芥早期信号反应及差异蛋白的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-22页
   ·引言第14页
   ·激发子的种类和性质第14页
   ·激发子与信号传导第14-17页
     ·钙信号的研究现状第16页
     ·活性氧的产生及功能第16页
     ·活性氧与钙信号之间的关系第16页
     ·NO 在植物体内的信号分子作用第16-17页
     ·酚类化合物的合成第17页
     ·防卫基因的表达调控及其产物参与的抗病反应第17页
   ·差异蛋白常用研究方法第17-20页
     ·双向凝胶电泳技术第18页
     ·稳定同位素标记结合质谱技术第18-20页
   ·研究目的和意义第20-21页
   ·技术路线第21-22页
第二章 PeaT1 的表达纯化及生物活性第22-32页
   ·材料与方法第22-26页
     ·菌株及植物材料第22页
     ·主要仪器与耗材第22页
     ·PeaT1 的诱导表达第22页
     ·目的蛋白的SDS-PAGE 检测第22-23页
     ·Western-Blotting 检测目标蛋白第23-24页
     ·使用His 柱进行初步纯化第24页
     ·阴离子交换层析第24页
     ·分子筛层析第24页
     ·电泳检测纯化效果第24页
     ·目的蛋白浓度的测定第24-25页
     ·PeaT1 提高拟南芥对干旱的抗性第25页
     ·PeaT1 提高拟南芥的耐盐性第25-26页
     ·PeaT1 诱导拟南芥对灰霉病抗性的检测第26页
   ·结果与分析第26-31页
     ·PeaT1 的诱导表达及Western-Blotting 检测第26页
     ·PeaT1 的纯化第26-28页
     ·PeaT1 的浓度测定第28页
     ·PeaT1 提高拟南芥抗旱性第28-29页
     ·PeaT1 提高拟南芥耐盐性第29-30页
     ·PeaT1 对拟南芥抗灰霉菌的影响第30-31页
   ·小结与讨论第31-32页
第三章 PeaT1 诱发拟南芥早期信号反应第32-40页
   ·材料和方法第32-34页
     ·植物材料第32页
     ·主要仪器与耗材第32页
     ·PeaT1 诱导拟南芥悬浮细胞产生活性氧的定性检测第32页
     ·PeaT1 诱导拟南芥叶片产生活性氧的定性检测第32页
     ·PeaT1 诱导拟南芥悬浮细胞产生活性氧的定量检测第32-33页
     ·PeaT1 诱导拟南芥悬浮细胞pH 变化的检测第33页
     ·PeaT1 诱导拟南芥悬浮细胞产生钙离子的检测第33页
     ·PeaT1 诱导拟南芥悬浮细胞产生一氧化氮的检测第33页
     ·PeaT1 诱导拟南芥叶片产生酚类化合物的检测第33-34页
   ·结果与分析第34-39页
     ·PeaT1 诱导拟南芥悬浮细胞产生活性氧第34页
     ·PeaT1 诱导拟南芥悬浮细胞产生活性氧的定量检测第34-35页
     ·PeaT1 诱导拟南芥叶片产生活性氧的检测第35-36页
     ·PeaT1 诱导拟南芥悬浮细胞pH 变化第36页
     ·PeaT1 诱导拟南芥悬浮细胞产生钙离子第36-37页
     ·PeaT1 诱导拟南芥悬浮细胞产生一氧化氮的检测第37-38页
     ·PeaT1 诱导拟南芥叶片产生酚类化合物第38-39页
   ·小结与讨论第39-40页
第四章 PeaT1 诱导拟南芥差异表达蛋白的研究第40-47页
   ·材料与方法第40-42页
     ·培养基及植物材料第40页
     ·仪器及耗材第40页
     ·拟南芥的同位素标记第40页
     ·拟南芥总蛋白的提取第40-41页
     ·拟南芥同位素标记效率的计算方法第41页
     ·PeaT1 诱导差异蛋白的质谱鉴定及蛋白定量第41-42页
   ·结果与分析第42-45页
     ·拟南芥总蛋白的提取第42页
     ·拟南芥的同位素标记效率第42-43页
     ·PeaT1 诱导差异表达蛋白的鉴定及定量第43-45页
   ·小结与讨论第45-47页
第五章 PeaT1 诱导拟南芥差异表达蛋白的RT-PCR 与缺失突变体证第47-53页
   ·材料与方法第47-50页
     ·植物材料第47页
     ·仪器及耗材第47页
     ·内参的选取及引物的设计第47-48页
     ·总RNA 的提取第48页
     ·RT-PCR第48-49页
     ·拟南芥突变体灰霉病抗性的变化第49-50页
   ·结果与分析第50-52页
     ·总RNA 的提取第50页
     ·RT-PCR第50-51页
     ·拟南芥突变体抗病性检测第51-52页
   ·小结与讨论第52-53页
全文结论第53-55页
参考文献第55-61页
附录第61-62页
致谢第62-63页
作者简历第63页

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