| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 中文文摘 | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-14页 |
| 绪论 | 第14-32页 |
| ·鱼类的免疫系统 | 第14-19页 |
| ·鱼类免疫球蛋白的研究进展 | 第19-27页 |
| ·单克隆抗体技术在水产养殖中的应用 | 第27-30页 |
| ·本研究的目的意义 | 第30-32页 |
| 第一章 鱼类血清的采集及其蛋白浓度测定 | 第32-38页 |
| ·前言 | 第32页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| ·血清制备 | 第33-34页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-36页 |
| ·所采集鱼类血清蛋白浓度 | 第34-35页 |
| ·不同鱼种之间血清总蛋白浓度之间比较 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 第二章 鱼类血清Ig的纯化 | 第38-48页 |
| 第一节 优球蛋白法纯化欧鳗Ig方法的建立 | 第38-43页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-39页 |
| ·欧洲鳗血清的制备 | 第38页 |
| ·优球蛋白法纯化欧洲鳗鲡免疫球蛋白 | 第38页 |
| ·饱和硫酸铵分步盐析法纯化欧鳗血清 | 第38-39页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第39页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析 | 第39页 |
| ·免疫印迹实验(Western-blot Analysis) | 第39页 |
| ·酶联免疫吸附反应(ELISA) | 第39页 |
| ·结果 | 第39-41页 |
| ·优球蛋白纯化法与饱和硫酸铵分步盐析法纯度比较分析 | 第39-40页 |
| ·Western-blot分析结果 | 第40-41页 |
| ·ELISA检测抗体活性结果 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第二节 两种方法对鱼类血清免疫球蛋白的纯化 | 第43-48页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·方法 | 第43页 |
| ·饱和硫酸铵分步盐析法纯化26种经济鱼类血清 | 第43页 |
| ·优球蛋白法纯化26种经济鱼类血清 | 第43页 |
| ·血清蛋白浓度的测定 | 第43页 |
| ·变性还原条件下的聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第43页 |
| ·结果 | 第43-45页 |
| ·两种方法纯化的鱼类血清Ig蛋白总浓度比较 | 第43-44页 |
| ·两种纯化方法的SDS-PAGE图谱比较分析 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| 第三章 26种鱼类Ig共同抗原位点分析 | 第48-56页 |
| ·前言 | 第48页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·鳜、大黄鱼、石斑鱼、鳗鲡血清Ig的单克隆抗体 | 第48-49页 |
| ·二十六种经济鱼类血清 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-50页 |
| ·血清Ig纯化 | 第49页 |
| ·单抗腹水的制备 | 第49-50页 |
| ·单抗交叉谱构建 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-54页 |
| ·鳜单克隆抗体与26种经济鱼类Ig交叉反应谱 | 第50-52页 |
| ·大黄鱼、石斑鱼单克隆抗体与26种鱼类Ig交叉反应谱 | 第52-53页 |
| ·鳗鲡单克隆抗体与26种鱼类Ig的反应交叉谱 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 广谱单抗及其组合应用研究 | 第56-64页 |
| ·前言 | 第56页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·单克隆抗体 | 第56页 |
| ·两种方法纯化的鱼类血清Ig | 第56页 |
| ·方法 | 第56-57页 |
| ·单抗2H5F4分析两种方法纯化鱼类血清Ig效果 | 第56页 |
| ·单抗8D6分析两种方法纯化鱼类血清Ig效果 | 第56页 |
| ·单抗混合实验 | 第56-57页 |
| ·单抗2H5F4、7F12F6效价测定 | 第57页 |
| ·单抗2H5F4、7F12F6灵敏度测定 | 第57页 |
| ·结果 | 第57-61页 |
| ·单抗2H5F4分析两种方法纯化鱼类血清Ig效果 | 第57-58页 |
| ·单抗8D6分析两种方法纯化鱼类血清Ig效果 | 第58-59页 |
| ·单抗混合实验结果 | 第59-60页 |
| ·鳜鱼单抗7F12F6对多种鱼类Ig的效价、灵敏性结果 | 第60页 |
| ·单克隆抗体2H5F4效价与灵敏度 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 第五章 单抗7F12F6对多种鱼类Ig表位的研究 | 第64-72页 |
| ·前言 | 第64页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·鳜鱼血清免疫球蛋白的单克隆抗体7F12F6 | 第64页 |
| ·实验鱼血清 | 第64页 |
| · | 第64-65页 |
| ·鱼类血清免疫球蛋白的纯化 | 第64页 |
| ·纯化血清蛋白浓度的测定 | 第64页 |
| ·ELISA与斑点ELISA实验 | 第64-65页 |
| ·变性条件下的凝胶电泳及其蛋白印迹实验 | 第65页 |
| ·非变性非还原条件下的凝胶电泳及其蛋白印迹实验 | 第65页 |
| ·结果 | 第65-69页 |
| ·ELISA与斑点ELISA实验结果比较 | 第65-67页 |
| ·纯化血清效果比较 | 第67页 |
| ·变性条件下的蛋白印迹实验 | 第67-68页 |
| ·非变性非还原条件下的蛋白印迹实验 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-72页 |
| 第六章 单抗2H5F4对鱼类Ig表位的研究及特异性验证 | 第72-82页 |
| ·前言 | 第72页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-74页 |
| ·间接ELISA检测单抗2H5F4与26种经济鱼类反应情况 | 第72页 |
| ·SDS-PAGE及其蛋白印迹实验(Western-blot) | 第72页 |
| ·非变性非还原条件下的凝胶电泳及其蛋白印迹实验 | 第72-73页 |
| ·嗜水气单胞菌ZN1外膜蛋白制备 | 第73页 |
| ·嗜水气单胞菌外膜蛋白免疫刺激复合物(ISCOMs)制备 | 第73页 |
| ·尼罗罗非鱼免疫试验 | 第73页 |
| ·鲤鱼免疫实验 | 第73-74页 |
| ·结果 | 第74-79页 |
| ·ELISA检测单抗2H5F4与多种经济鱼类的反应 | 第74-75页 |
| ·变性还原条件下的凝胶电泳及其蛋白印迹实验 | 第75-76页 |
| ·非变性非还原条件下的凝胶电泳及其蛋白印迹实验 | 第76-78页 |
| ·尼罗罗非鱼免疫试验 | 第78页 |
| ·鲤鱼免疫实验 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-82页 |
| 结论 | 第82-84页 |
| 附录 | 第84-88页 |
| 参考文献 | 第88-96页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 个人简历 | 第100-101页 |
