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河虾主要过敏原单克隆抗体的制备及河虾过敏原不同组分共同表位分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 前言第10-23页
   ·食物过敏第10-15页
     ·食物过敏机制第10-13页
     ·食物过敏原及其特点第13-14页
     ·食物过敏防治措施第14-15页
   ·食物过敏原的评价和检测第15-18页
     ·食物过敏原标识法规的制定和实施第15-16页
     ·食物过敏原常用的检测和评价方法第16-18页
   ·虾过敏原的研究进展第18-20页
   ·本研究的意义和内容第20-22页
   ·技术路线第22-23页
2 材料及方法第23-34页
   ·实验材料第23-26页
     ·实验动物第23页
     ·虾过敏原第23页
     ·虾过敏症患者血清第23页
     ·主要试剂第23-24页
     ·主要仪器设备第24-25页
     ·主要试剂配置方法第25-26页
   ·实验方法第26-34页
     ·河虾过敏原组分的鉴定第26-27页
       ·河虾过敏原粗体液的制备第26-27页
       ·河虾过敏原组分的western Blot鉴定第27页
     ·河虾主要过敏原的纯化第27-28页
       ·硫酸铵分段盐析第27页
       ·Sephadex G-50凝胶层析第27-28页
       ·DEAE-sepharose离子交换层析第28页
       ·BCA试剂盒测过敏原蛋白浓度第28页
       ·纯化的过敏原纯度及免疫活性鉴定第28页
     ·虾过敏原组分单抗制备第28-31页
       ·免疫BALB/c小鼠第28页
       ·采集小鼠抗血清第28页
       ·间接ELISA测定血清的抗体效价第28-29页
       ·饲养细胞的制备第29页
       ·细胞融合第29页
       ·间接ELISA和Western Blot筛选杂交瘤细胞第29-30页
       ·杂交瘤细胞克隆化第30页
       ·杂交瘤细胞的冻存与复苏第30页
       ·腹水型单克隆抗体的制备第30-31页
       ·小鼠单克隆抗体亚型鉴定第31页
       ·杂交瘤细胞染色体分析第31页
     ·虾过敏原组分的酶联免疫检测第31-32页
       ·棋盘滴定确定抗原最佳包被浓度第31页
       ·间接ELISa测腹水型单抗效价第31页
       ·单克隆抗体亲和力测定第31-32页
       ·单克隆抗体竞争标准曲线的建立第32页
     ·河虾不同过敏原共同表位的研究第32页
       ·间接竞争ELISA分析单抗过敏原结合表位第32页
       ·河虾不同过敏原之间交叉反应的研究第32页
     ·河虾、海虾和蟹过敏原的交叉反应第32-34页
       ·制备海虾、蟹的蛋白粗体液第32页
       ·河虾、海虾和蟹与虾过敏患者血清的特异性反应第32页
       ·河虾、海虾和蟹的过敏原交叉反应第32-33页
       ·河虾、海虾和蟹蛋白组分的交叉反应第33-34页
3 结果与分析第34-53页
   ·河虾过敏原组分的鉴定第34页
   ·河虾主要过敏原的分离纯化和鉴定第34-39页
     ·硫酸铵分段盐析结果第34-35页
     ·Sephadex G-50凝胶层析结果第35-36页
     ·DEAE-Sepharose离子交换层析结果第36页
     ·BCA试剂盒过敏原组分的浓度第36-37页
     ·纯化的过敏原组分免疫学活性鉴定第37-38页
     ·河虾3种主要过敏原组分的致敏性强弱分析第38-39页
   ·河虾主要过敏原单抗的的制备第39-44页
     ·免疫BALB/c小鼠抗体效价的测定第39-40页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选第40-44页
       ·阳性细胞株的筛选第40-41页
       ·阳性杂交瘤细胞单克隆化第41-43页
       ·杂交瘤细胞染色体分析第43-44页
       ·单克隆抗体亚型鉴定第44页
   ·河虾过敏原组分的ELISA检测第44-47页
     ·棋盘滴定确定抗原最佳包被浓度第44-45页
     ·间接ELISA测腹水型单抗效价第45页
     ·单克隆抗体亲和力测定第45-46页
     ·1D11,3C4和4E3单抗间接竞争ELISA标准曲线的建立第46-47页
   ·虾过敏原表位分析第47-53页
     ·单克隆抗体过敏原表位分析第47-48页
     ·河虾不同过敏原组分共同表位分析第48-50页
       ·Western Blot分析单抗与河虾不同过敏原之间的特异性反应第48-49页
       ·单抗与河虾21kD,80kD过敏原组分的交叉反应第49页
       ·间接ELISA分析河虾不同过敏原组分与单抗的特异性反应第49-50页
     ·河虾、海虾及蟹之间的交叉反应第50-53页
       ·河虾、海虾、蟹与虾过敏患者血清的特异性反应第50-51页
       ·间接竞争ELISA分析河虾、海虾、蟹的交叉反应第51页
       ·Western Blot分析海虾、蟹的过敏原组分第51-53页
4 小结第53-54页
5 讨论第54-58页
   ·同一食物不同过敏原之间的共同表位第54-55页
   ·不同种类食物过敏原间的交叉反应第55-56页
   ·虾过敏原的检测第56-58页
参考文献第58-63页
研究生阶段发表学术论文及参加学术活动第63-64页
致谢第64页

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