| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| ·口蹄疫的研究进展 | 第10-15页 |
| ·口蹄疫病毒的结构 | 第11页 |
| ·FMDV 的抗原性 | 第11-12页 |
| ·FMDV 的VP4 基因 | 第12-13页 |
| ·流行病学 | 第13-14页 |
| ·致病性 | 第14页 |
| ·FMDV 感染的发病机制 | 第14-15页 |
| ·树突状细胞的研究进展 | 第15-19页 |
| ·DC 的起源和分类 | 第15-16页 |
| ·DC 的生物学特性 | 第16页 |
| ·DC 与口蹄疫病毒的相互关系 | 第16-17页 |
| ·DC 对抗原提呈作用及途径 | 第17-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 实验材料及仪器 | 第21-23页 |
| ·菌株、载体和细胞 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 3. 实验方法 | 第23-35页 |
| ·主要试剂配置 | 第23-25页 |
| ·PCDNA3.1-VP4 重组质粒的构建 | 第25-30页 |
| ·重组质粒pUC57-VP4 的小量制备 | 第25-27页 |
| ·真核表达载体pcDNA3.1(+)的制备 | 第27-28页 |
| ·VP4 与pcDNA3.1(+)定向连接 | 第28-29页 |
| ·连接产物转化宿主菌 | 第29页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1-VP4 真核表达载体的鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1-VP4 的DNA 序列测定与分析 | 第30页 |
| ·重组质粒PCDNA3.1-VP4 转染 HELA 细胞 | 第30-35页 |
| ·细胞培养 | 第30-31页 |
| ·G418 筛选浓度的确定 | 第31页 |
| ·转染质粒的pcDNA3.1-VP4 制备 | 第31页 |
| ·pcDNA3.1-VP4 转染HeLa 细胞和转基因细胞株的筛选 | 第31-33页 |
| ·FMDV-VP4 在HeLa 细胞中的表达 | 第33-35页 |
| 4 结果 | 第35-38页 |
| ·PCDNA3.1-VP4 重组质粒的构建 | 第35页 |
| ·重组质粒PUC57-VP4 的酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒测序鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE 检测FMDV- VP4 在HELA 细胞的表达 | 第37-38页 |
| 5 讨论 | 第38-41页 |
| ·FMDV 真核表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·细胞转染及筛选 | 第39-41页 |
| 6 结论 | 第41-43页 |
| ·成功构建了口蹄疫病毒VP4 基因的重组质粒PCDNA 3.1-VP4 | 第41页 |
| ·成功筛选出并稳定转染了VP4 基因的HELA 细胞表达系统 | 第41页 |
| ·成功检测到HELA 细胞中表达的VP4 蛋白，分子质量约为8 KD，提示VP4 基因在HELA细胞中形成了稳定表达 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附图及说明 | 第49-50页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第50-51页 |
| 作者简历 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
