摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
缩略词汇表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-14页 |
实验技术路线图 | 第14-15页 |
第一章 材料与方法 | 第15-27页 |
1 材料 | 第15-19页 |
·细胞株、正常人外周血、菌种和重组质粒 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-18页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
2 方法 | 第19-27页 |
·携带pcDNA3.1(+)/GPI-PLD质粒的TG1大肠杆菌扩增培养及提取 | 第19-20页 |
·重组质粒pcDNA3.1(+)/GPI-PLD转染HepG2细胞、筛选并鉴定 | 第20-23页 |
·胰岛素对HepG2细胞以及转GPI-PLD基因HepG2细胞诱导 | 第23-25页 |
·诱导前后各组细胞被LAK细胞杀伤敏感性的改变 | 第25-26页 |
·统计学分析 | 第26-27页 |
第二章 结果 | 第27-42页 |
1.质粒提取酶切结果 | 第27页 |
2.经G418筛选稳定转染组及对照组细胞GPI-PLD酶活性测定结果 | 第27-29页 |
3.细胞总RNA提取及鉴定结果 | 第29页 |
4.RT-PCR法检测GPI-PLD基因mRNA的表达量变化 | 第29-31页 |
5.胰岛素诱导48h后细胞GPI-PLD酶活性测定结果 | 第31-32页 |
6.胰岛素诱导后RT-PCR法检测GPI-PLD基因mRNA的表达量变化 | 第32-34页 |
7.ELISA法检测诱导前后各组细胞培养液中CEA的浓度 | 第34-35页 |
8.诱导前后各组细胞表面锚定CEA的流式细胞术分析 | 第35-38页 |
9.MTT法优化LAK细胞杀伤靶细胞作用的条件 | 第38-40页 |
10.LAK细胞分别与诱导前后四组细胞共育的形态学观察结果 | 第40-41页 |
11.MTT法检测LAK细胞对诱导前后各组细胞杀伤活性的改变 | 第41-42页 |
第三章 讨论 | 第42-47页 |
1.肝脏、肝细胞癌与GPI-PLD | 第42-43页 |
2.胰岛素诱导HepG2细胞GPI-PLD基因的表达 | 第43-44页 |
3.肿瘤细胞表面GPI锚定的CEA与LAK细胞对其杀伤活性相关 | 第44-47页 |
第四章 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
综述 | 第51-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第62页 |