中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-10页 |
前言 | 第10-12页 |
材料与方法 | 第12-22页 |
一、溶液的配制 | 第12-13页 |
(一) 人工脑脊液的配制 | 第12页 |
(二) 电极内液的配制 | 第12-13页 |
(三) 细胞培养溶液的配制 | 第13页 |
二、微电极的拉制 | 第13-14页 |
三、脑片的制备 | 第14页 |
四、前额叶皮层神经元的全细胞记录 | 第14-16页 |
(一) 脑片的放置 | 第14页 |
(二) 神经元的选取 | 第14-15页 |
(三) 微电极的使用 | 第15页 |
(四) 千兆欧封接的形成 | 第15页 |
(五) 吸破细胞膜 | 第15-16页 |
(六) 高电压激活钙电流的记录 | 第16页 |
五. 皮层神经元的原代培养 | 第16-18页 |
(一) 实验前的准备工作 | 第16-17页 |
(二) 实验操作步骤 | 第17-18页 |
六. 神经元氧糖剥脱模型(OGD模型) | 第18页 |
七. 细胞活性检测 | 第18-19页 |
八. 乳酸脱氢酶(LDH)释放量的检测 | 第19页 |
九. Hoechst 33258染色 | 第19-20页 |
十. 仪器和试剂 | 第20-21页 |
(一) 仪器及器材 | 第20页 |
(二) 试剂和给药 | 第20-21页 |
十一、数据分析和统计 | 第21-22页 |
实验结果 | 第22-30页 |
一、高电压激活钙电流的分离与验证 | 第22-23页 |
二、线粒体呼吸链复合体Ⅲ功能抑制对钙电流的作用 | 第23-24页 |
(一) Antimcyin A对于钙电流的抑制作用 | 第23-24页 |
(二) Myxothiazol对于钙电流的增强作用 | 第24页 |
三、线粒体呼吸链复合体Ⅲ抑制剂的作用机制 | 第24-28页 |
(一) 氧自由基在高电压激活钙离子通道功能变化中的作用 | 第24-25页 |
1. 过氧化氢清除剂MPG和羟自由基生成抑制剂PHEN能够取消Antimycin A对于钙电流的抑制作用 | 第24-25页 |
2. 超氧阴离子清除剂SOD和MnTBAP能够取消Myxothiazol对于钙电流的增强作用 | 第25页 |
3. 外源性H_2O_2能够模拟Antimycin A对于钙电流的抑制作用 | 第25页 |
(二) PKC在高电压激活钙离子通道功能变化中的作用 | 第25-28页 |
1. 广谱PKC抑制剂Chelerythrine能够取消Antimycin A和Myxothiazol对于钙电流的作用 | 第26页 |
2. 经典型PKC抑制剂Ro31-8220能够取消Antimycin A对于钙电流的抑制作用 | 第26-27页 |
3. PKC β亚型抑制剂CGP53353能够取消Antimycin A对于钙电流的抑制作用 | 第27页 |
4. PKC δ亚型抑制剂Rottlerin能够取消Myxothiazol对于钙电流的增强作用 | 第27-28页 |
5. 经典型PKC激动剂Thymeleatoxin能够模拟Antimycin A对于钙电流的抑制作用 | 第28页 |
6. PKC δ亚型激动剂Bryostatin能够模拟Myxothiazol对于钙电流的增强作用 | 第28页 |
四.Antimycin A和Myxothiazol对于氧糖剥脱模型中神经元损伤影响的初步探讨 | 第28-30页 |
附图一 | 第30-54页 |
讨论 | 第54-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-70页 |
综述 | 第70-96页 |
参考文献 | 第80-93页 |
附图二 | 第93-96页 |
在学期间完成和发表的论文及会议摘要 | 第96-97页 |
致谢 | 第97-98页 |