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hTERT启动子调控hNIS和hTPO基因联合转染胶质瘤细胞介导放射性碘治疗的研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-13页
缩略语/符号说明第13-16页
前言第16-20页
 研究现状、成果第16-18页
 研究目的、方法第18-20页
一、人端粒酶逆转录酶启动子的克隆及其启动效率的研究第20-64页
   ·对象和方法第20-39页
     ·材料第20-22页
     ·方法第22-39页
   ·结果第39-49页
     ·端粒酶活性检测结果第39-40页
     ·hTERT基因启动子序列的扩增和克隆第40-41页
     ·18T-hTERT重组质粒的鉴定第41-44页
     ·pGL3-hTERT重组荧光报告质粒的鉴定第44-46页
     ·pGL3-204-hNIS重组质粒测序结果第46-47页
     ·检测重组pGL3-hTERT质粒的启动效率第47-49页
   ·讨论第49-63页
     ·hTERT启动子和肿瘤第49-52页
     ·hTERT启动子和基因治疗第52-54页
     ·pMD~(TM) 18-T载体与TA克隆第54-56页
     ·阳离子脂质体转染细胞第56-59页
     ·荧光素酶与双荧光素酶报告基因技术第59-63页
   ·小结第63-64页
二、重组腺病毒载体的构建及其鉴定第64-98页
   ·对象和方法第64-78页
     ·材料第64-67页
     ·方法第67-78页
   ·结果第78-83页
     ·穿梭质粒pAdTrack-CMV-hTPO的构建第78-79页
     ·穿梭质粒与腺病毒骨架质粒的同源重组第79-80页
     ·重组腺病毒Ad-CMV-hTPO的包装、扩增及纯化第80-81页
     ·重组腺病毒的纯化和滴度测定第81-82页
     ·重组腺病毒目的基因表达的检测第82-83页
   ·讨论第83-97页
     ·重组腺病毒基因载体第83-86页
     ·Adeasy腺病毒载体系统第86-89页
     ·腺病毒质粒的同源重组第89-92页
     ·重组腺病毒的分离、纯化第92-93页
     ·腺病毒滴度的不同表述方法及测定第93-95页
     ·Western blot检测中融合标签技术的应用第95-97页
   ·小结第97-98页
三、hTERT启动子调控hNIS和hTPO基因联合转染胶质瘤细胞介导放射性碘治疗的研究第98-146页
   ·对象和方法第98-110页
     ·材料第98-100页
     ·方法第100-110页
   ·结果第110-131页
     ·实时荧光定量PCR测定胶质瘤细胞中hTERT基因含量第110-112页
     ·重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS单独转染的最适MOI第112-114页
     ·重组腺病毒Ad-CMV-hTPO与Ad-hTERT-hNIS联合转染的最适MOI第114-116页
     ·Ad-hTERT-hNIS/Ad-CMV-hTPO联合转染胶质瘤细胞的摄~(125)I能力第116-119页
     ·Ad-hTERT-hNIS/Ad-CMV-hTPO联合转染胶质瘤细胞的~(125)I内流实验第119-121页
     ·Ad-hTERT-hNIS/Ad-CMV-hTPO联合转染胶质瘤细胞的~(125)I外流实验第121-123页
     ·Ad-hTERT-hNIS/Ad-CMV-hTPO联合转染胶质瘤细胞的NaClO_4抑制情况第123-126页
     ·Ad-hTERT-hNIS/Ad-CMV-hTPO联合转染胶质瘤细胞的 ~(125)I有机化测定实验第126-128页
     ·Ad-hTERT-hNIS/Ad-CMV-hTPO联合转染胶质瘤细胞的克隆形成实验第128-131页
   ·讨论第131-145页
     ·胶质瘤的治疗现状和放射性~(131)I治疗途径第131-133页
     ·hNIS和hTPO基因及其在肿瘤治疗中的应用第133-135页
     ·恶性胶质瘤细胞系与细胞培养第135-137页
     ·实时荧光定量PCR检测目的基因含量第137-140页
     ·腺病毒感染细胞与最适感染复数第140-142页
     ·hNIS及hTPO基因转染对胶质瘤细胞摄碘能力的影响第142-145页
   ·小结第145-146页
全文结论第146-147页
论文创新点第147-148页
参考文献第148-162页
发表论文和参加科研情况说明第162-163页
附录第163-173页
综述 钠碘转运体的分子特征及其在肿瘤学中的应用第173-197页
 综述参考文献第185-197页
致谢第197-198页

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