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一个水稻E3泛素连接酶OsBBI1在水稻对稻瘟菌广谱抗性中的作用研究

致谢第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-17页
图目录第17-18页
表目录第18-19页
第一章 文献综述第19-30页
 1. 植物免疫系统(Plant immunity)第19页
 2. 在PTI和ETI系统中的信号传递第19-21页
 3. 细胞壁在植物抗病反应中的作用第21-22页
 4. 水稻稻瘟病抗性第22-23页
 5. 泛素蛋白酶体途径及其功能第23-29页
   ·泛素蛋白酶体途径的组成及其结构特征第23-24页
   ·泛素连接酶(ubiquitin ligase enzyme,E3)第24-26页
     ·锌指蛋白(zinc finger protein)和RING finger结构域第24-25页
     ·RING finger结构域的功能第25-26页
   ·泛素连接酶E3在植物抗病反应中的作用第26-29页
 6. 本研究的主要内容第29-30页
第二章 材料与方法第30-46页
   ·供试稻瘟菌菌株第30页
   ·供试水稻的生长与培养第30-31页
   ·水稻基因组DNA的提取第31页
   ·植物总RNA提取第31-32页
   ·突变体纯合体的筛选与鉴定第32-34页
   ·OsBBI1-OE转基因植株的筛选与鉴定第34页
   ·供试水稻接种稻瘟菌第34-35页
   ·诱导处理第35-36页
   ·OsBBI1基因的组织表达分析第36页
   ·PR基因的半定量RT-PCR分析第36-37页
   ·PR基因的相对定量Real Time PCR分析第37-38页
   ·M.oryzae处理后转基因植株中活性氧的检测第38页
   ·M.oryzae处理后转基因植株中胼胝质沉积的分析第38-39页
   ·M.oryzae处理后转基因植株中蛋白交联的分析第39页
   ·制备超薄切片和透射电镜观察第39页
   ·用半定量RT-PCR检测转基因植株中细胞壁合成相关基因的表达第39-40页
   ·DNA的序列测定和分析第40-41页
   ·OsBBI1融合蛋白的原核表达第41-43页
     ·原核表达载体pET-32(a)-OsBBI1的构建第41-42页
     ·OsBBI1蛋白的诱导表达及制备第42-43页
   ·SDS-PAGE蛋白电泳第43页
   ·OsBBI1蛋白纯化第43-44页
   ·检测E3泛素连接酶活性反应第44-45页
   ·Western blot分析第45-46页
第三章 结果与分析第46-85页
   ·OsBBI1基因的克隆及鉴定第46页
   ·OsBBI1基因的表达模式第46-50页
   ·OsBBI1具有E3泛素连接酶活性第50-59页
   ·osbbi1突变体的筛选与鉴定第59页
   ·osbbi1突变体植株的抗病性降低第59-60页
   ·OsBBI1-OE转基因植株的筛选与鉴定第60-61页
   ·OsBBI1-OE植株的抗病性增强第61-68页
   ·M.oryzae处理后转基因植株中活性氧的累积第68-69页
   ·M.oryzae处理后转基因植株中胼胝质沉积的增加第69页
   ·M.oryzae处理后转基因植株中蛋白交联(protein cross-linking)的增加第69-76页
   ·过表达植株中叶鞘内壁上表皮细胞壁增厚,osbbi1突变体植株中叶鞘内壁上表皮细胞壁变薄第76页
   ·防卫相关基因的表达分析第76-82页
 讨论第82-85页
第四章 全文小结第85-86页
参考文献第86-98页

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