致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-17页 |
图目录 | 第17-18页 |
表目录 | 第18-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-30页 |
1. 植物免疫系统(Plant immunity) | 第19页 |
2. 在PTI和ETI系统中的信号传递 | 第19-21页 |
3. 细胞壁在植物抗病反应中的作用 | 第21-22页 |
4. 水稻稻瘟病抗性 | 第22-23页 |
5. 泛素蛋白酶体途径及其功能 | 第23-29页 |
·泛素蛋白酶体途径的组成及其结构特征 | 第23-24页 |
·泛素连接酶(ubiquitin ligase enzyme,E3) | 第24-26页 |
·锌指蛋白(zinc finger protein)和RING finger结构域 | 第24-25页 |
·RING finger结构域的功能 | 第25-26页 |
·泛素连接酶E3在植物抗病反应中的作用 | 第26-29页 |
6. 本研究的主要内容 | 第29-30页 |
第二章 材料与方法 | 第30-46页 |
·供试稻瘟菌菌株 | 第30页 |
·供试水稻的生长与培养 | 第30-31页 |
·水稻基因组DNA的提取 | 第31页 |
·植物总RNA提取 | 第31-32页 |
·突变体纯合体的筛选与鉴定 | 第32-34页 |
·OsBBI1-OE转基因植株的筛选与鉴定 | 第34页 |
·供试水稻接种稻瘟菌 | 第34-35页 |
·诱导处理 | 第35-36页 |
·OsBBI1基因的组织表达分析 | 第36页 |
·PR基因的半定量RT-PCR分析 | 第36-37页 |
·PR基因的相对定量Real Time PCR分析 | 第37-38页 |
·M.oryzae处理后转基因植株中活性氧的检测 | 第38页 |
·M.oryzae处理后转基因植株中胼胝质沉积的分析 | 第38-39页 |
·M.oryzae处理后转基因植株中蛋白交联的分析 | 第39页 |
·制备超薄切片和透射电镜观察 | 第39页 |
·用半定量RT-PCR检测转基因植株中细胞壁合成相关基因的表达 | 第39-40页 |
·DNA的序列测定和分析 | 第40-41页 |
·OsBBI1融合蛋白的原核表达 | 第41-43页 |
·原核表达载体pET-32(a)-OsBBI1的构建 | 第41-42页 |
·OsBBI1蛋白的诱导表达及制备 | 第42-43页 |
·SDS-PAGE蛋白电泳 | 第43页 |
·OsBBI1蛋白纯化 | 第43-44页 |
·检测E3泛素连接酶活性反应 | 第44-45页 |
·Western blot分析 | 第45-46页 |
第三章 结果与分析 | 第46-85页 |
·OsBBI1基因的克隆及鉴定 | 第46页 |
·OsBBI1基因的表达模式 | 第46-50页 |
·OsBBI1具有E3泛素连接酶活性 | 第50-59页 |
·osbbi1突变体的筛选与鉴定 | 第59页 |
·osbbi1突变体植株的抗病性降低 | 第59-60页 |
·OsBBI1-OE转基因植株的筛选与鉴定 | 第60-61页 |
·OsBBI1-OE植株的抗病性增强 | 第61-68页 |
·M.oryzae处理后转基因植株中活性氧的累积 | 第68-69页 |
·M.oryzae处理后转基因植株中胼胝质沉积的增加 | 第69页 |
·M.oryzae处理后转基因植株中蛋白交联(protein cross-linking)的增加 | 第69-76页 |
·过表达植株中叶鞘内壁上表皮细胞壁增厚,osbbi1突变体植株中叶鞘内壁上表皮细胞壁变薄 | 第76页 |
·防卫相关基因的表达分析 | 第76-82页 |
讨论 | 第82-85页 |
第四章 全文小结 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-98页 |