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β-玉米赤霉烯醇单克隆抗体的研制及ELISA检测方法的初步建立

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
符号说明第11-13页
第一章 文献综述第13-22页
    1 β-玉米赤霉烯醇概述第13-18页
        1.1 β-玉米赤霉烯醇的来源第13页
        1.2 β-玉米赤霉烯醇在动物体内的代谢第13-14页
        1.3 β-玉米赤霉烯醇的毒性作用第14-17页
            1.3.1 β-玉米赤霉烯醇的生殖毒性第14-15页
            1.3.2 β-玉米赤霉烯醇的免疫细胞毒性第15-16页
            1.3.3 β-玉米赤霉烯醇的DNA损伤第16页
            1.3.4 β-玉米赤霉烯醇的氧化损伤作用第16-17页
        1.4 ZEA及其衍生物与食品和饲料安全第17-18页
    2 ZEA及其衍生物的检测方法研究进展第18-20页
        2.1 薄层色谱法第18-19页
        2.2 高效液相色谱法第19页
        2.3 气相色谱和气相色谱-质谱联用法第19页
        2.4 液相色谱-质谱联用法第19-20页
        2.5 酶联免疫吸附法第20页
    3 本研究的目的与意义第20-22页
第二章 β-玉米赤霉烯醇人工完全抗原的制备第22-29页
    1. 材料与方法第22-24页
        1.1 主要试剂第22页
        1.2 仪器与器材第22页
        1.3 主要溶液系统第22-23页
        1.4 人工完全抗原的制备第23页
            1.4.1 半抗原的改造第23页
            1.4.2 完全抗原的合成第23页
            1.4.3 人工合成完全抗原的透析第23页
        1.5 合成抗原蛋白浓度的测定第23-24页
        1.6 偶联物完全抗原的鉴定第24页
            1.6.1 凝胶电泳考马斯亮蓝染色鉴定第24页
            1.6.2 紫外扫描鉴定第24页
            1.6.3 免疫学方法鉴定第24页
    2 结果第24-27页
        2.1 合成抗原蛋白浓度的测定第24-25页
        2.2 合成抗原的鉴定第25-27页
            2.2.1 凝胶电泳考马斯亮蓝染色鉴定第25页
            2.2.2 紫外扫描鉴定第25-26页
            2.2.3 免疫学方法鉴定第26-27页
    3. 讨论第27-29页
第三章 β-ZOL单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的初步建立第29-43页
    1 材料与方法第29-36页
        1.1 实验动物和细胞第29页
        1.2 主要试剂第29页
        1.3 主要仪器第29-30页
        1.4 主要溶液配制第30-31页
            1.4.1 细胞培养溶液第30页
            1.4.2 ELISA检测溶液第30-31页
        1.5 单克隆抗体的制备第31-35页
            1.5.1 免疫BALB/c小鼠第31页
            1.5.2 ELISA筛选系统建立第31-33页
            1.5.3 细胞融合第33页
            1.5.4 杂交瘤细胞的培养及筛选第33-34页
            1.5.5 阳性细胞的亚克隆培养第34页
            1.5.6 杂交瘤细胞株稳定性试验第34页
            1.5.7 腹水的制备第34-35页
        1.6 单克隆抗体的鉴定第35-36页
            1.6.1 腹水蛋白浓度的测定第35页
            1.6.2 腹水中单克隆抗体亚型测定第35页
            1.6.3 最佳封闭液的确定第35页
            1.6.4 抗原抗体工作浓度的确定第35页
            1.6.5 CiELISA标准曲线及相关参数的计算第35-36页
            1.6.6 抗体特异性鉴定第36页
    2 结果第36-41页
        2.1 血清效价第36-37页
        2.2 杂交瘤细胞的筛选及建株第37页
        2.3 腹水的制备第37页
        2.4 单克隆抗体的鉴定第37-41页
            2.4.1 腹水蛋白浓度第37-38页
            2.4.2 腹水中单克隆抗体亚型的测定第38-39页
            2.4.3 腹水1F5封闭液的测定第39页
            2.4.4 抗原抗体工作浓度的测定第39页
            2.4.5 CiELISA标准抑制曲线及其相关参数第39-40页
            2.4.6 抗体的特异性鉴定第40-41页
    3 讨论第41-43页
第四章 牛奶样品中的β-ZOL添加回收试验第43-48页
    1 材料与方法第43-44页
        1.1 主要试剂第43页
        1.2 仪器与耗材第43页
        1.3 样品添加回收试验第43-44页
            1.3.1 牛奶样品的处理第43页
            1.3.2 样品基质的干扰检测第43-44页
            1.3.3 标准曲线的绘制第44页
            1.3.4 回收率的测定第44页
    2 结果第44-46页
        2.1 样品基质干扰第44-45页
        2.2 标准曲线的建立第45-46页
        2.3 添加回收率及重复性第46页
    3 讨论第46-48页
结论第48-49页
参考文献第49-58页
致谢第58-59页

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