中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
符号说明 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 β-玉米赤霉烯醇概述 | 第13-18页 |
1.1 β-玉米赤霉烯醇的来源 | 第13页 |
1.2 β-玉米赤霉烯醇在动物体内的代谢 | 第13-14页 |
1.3 β-玉米赤霉烯醇的毒性作用 | 第14-17页 |
1.3.1 β-玉米赤霉烯醇的生殖毒性 | 第14-15页 |
1.3.2 β-玉米赤霉烯醇的免疫细胞毒性 | 第15-16页 |
1.3.3 β-玉米赤霉烯醇的DNA损伤 | 第16页 |
1.3.4 β-玉米赤霉烯醇的氧化损伤作用 | 第16-17页 |
1.4 ZEA及其衍生物与食品和饲料安全 | 第17-18页 |
2 ZEA及其衍生物的检测方法研究进展 | 第18-20页 |
2.1 薄层色谱法 | 第18-19页 |
2.2 高效液相色谱法 | 第19页 |
2.3 气相色谱和气相色谱-质谱联用法 | 第19页 |
2.4 液相色谱-质谱联用法 | 第19-20页 |
2.5 酶联免疫吸附法 | 第20页 |
3 本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
第二章 β-玉米赤霉烯醇人工完全抗原的制备 | 第22-29页 |
1. 材料与方法 | 第22-24页 |
1.1 主要试剂 | 第22页 |
1.2 仪器与器材 | 第22页 |
1.3 主要溶液系统 | 第22-23页 |
1.4 人工完全抗原的制备 | 第23页 |
1.4.1 半抗原的改造 | 第23页 |
1.4.2 完全抗原的合成 | 第23页 |
1.4.3 人工合成完全抗原的透析 | 第23页 |
1.5 合成抗原蛋白浓度的测定 | 第23-24页 |
1.6 偶联物完全抗原的鉴定 | 第24页 |
1.6.1 凝胶电泳考马斯亮蓝染色鉴定 | 第24页 |
1.6.2 紫外扫描鉴定 | 第24页 |
1.6.3 免疫学方法鉴定 | 第24页 |
2 结果 | 第24-27页 |
2.1 合成抗原蛋白浓度的测定 | 第24-25页 |
2.2 合成抗原的鉴定 | 第25-27页 |
2.2.1 凝胶电泳考马斯亮蓝染色鉴定 | 第25页 |
2.2.2 紫外扫描鉴定 | 第25-26页 |
2.2.3 免疫学方法鉴定 | 第26-27页 |
3. 讨论 | 第27-29页 |
第三章 β-ZOL单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的初步建立 | 第29-43页 |
1 材料与方法 | 第29-36页 |
1.1 实验动物和细胞 | 第29页 |
1.2 主要试剂 | 第29页 |
1.3 主要仪器 | 第29-30页 |
1.4 主要溶液配制 | 第30-31页 |
1.4.1 细胞培养溶液 | 第30页 |
1.4.2 ELISA检测溶液 | 第30-31页 |
1.5 单克隆抗体的制备 | 第31-35页 |
1.5.1 免疫BALB/c小鼠 | 第31页 |
1.5.2 ELISA筛选系统建立 | 第31-33页 |
1.5.3 细胞融合 | 第33页 |
1.5.4 杂交瘤细胞的培养及筛选 | 第33-34页 |
1.5.5 阳性细胞的亚克隆培养 | 第34页 |
1.5.6 杂交瘤细胞株稳定性试验 | 第34页 |
1.5.7 腹水的制备 | 第34-35页 |
1.6 单克隆抗体的鉴定 | 第35-36页 |
1.6.1 腹水蛋白浓度的测定 | 第35页 |
1.6.2 腹水中单克隆抗体亚型测定 | 第35页 |
1.6.3 最佳封闭液的确定 | 第35页 |
1.6.4 抗原抗体工作浓度的确定 | 第35页 |
1.6.5 CiELISA标准曲线及相关参数的计算 | 第35-36页 |
1.6.6 抗体特异性鉴定 | 第36页 |
2 结果 | 第36-41页 |
2.1 血清效价 | 第36-37页 |
2.2 杂交瘤细胞的筛选及建株 | 第37页 |
2.3 腹水的制备 | 第37页 |
2.4 单克隆抗体的鉴定 | 第37-41页 |
2.4.1 腹水蛋白浓度 | 第37-38页 |
2.4.2 腹水中单克隆抗体亚型的测定 | 第38-39页 |
2.4.3 腹水1F5封闭液的测定 | 第39页 |
2.4.4 抗原抗体工作浓度的测定 | 第39页 |
2.4.5 CiELISA标准抑制曲线及其相关参数 | 第39-40页 |
2.4.6 抗体的特异性鉴定 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
第四章 牛奶样品中的β-ZOL添加回收试验 | 第43-48页 |
1 材料与方法 | 第43-44页 |
1.1 主要试剂 | 第43页 |
1.2 仪器与耗材 | 第43页 |
1.3 样品添加回收试验 | 第43-44页 |
1.3.1 牛奶样品的处理 | 第43页 |
1.3.2 样品基质的干扰检测 | 第43-44页 |
1.3.3 标准曲线的绘制 | 第44页 |
1.3.4 回收率的测定 | 第44页 |
2 结果 | 第44-46页 |
2.1 样品基质干扰 | 第44-45页 |
2.2 标准曲线的建立 | 第45-46页 |
2.3 添加回收率及重复性 | 第46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-58页 |
致谢 | 第58-59页 |