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异沙叶蝉参与小麦矮缩病毒传播的蛋白质和肠道微生物组分析

摘要第6-7页
abstract第7-8页
第一章 引言第13-31页
    1.1 国内外异沙叶蝉研究概况第13-14页
        1.1.1 异沙叶蝉的分布与危害第13页
        1.1.2 异沙叶蝉的形态特点第13-14页
        1.1.3 异沙叶蝉的生物学特征第14页
    1.2 小麦矮缩病毒的研究进展第14-16页
        1.2.1 小麦矮缩病的分布与危害第15页
        1.2.2 小麦矮缩病毒基因组结构及粒体形态第15-16页
        1.2.3 小麦矮缩病毒传播介体及其传播特性第16页
    1.3 介体昆虫传播植物病毒的特异性及其机制第16-25页
        1.3.1 植物病毒在介体内的循回途径第17页
        1.3.2 病毒调节介体昆虫的特异性传播第17-19页
        1.3.3 介体昆虫基因型、蛋白质以及内生菌在病毒循回过程的的作用第19-25页
    1.4 昆虫肠道微生物的研究进展第25-28页
        1.4.1 昆虫肠道微生物对寄主的功能第25-27页
        1.4.2 昆虫肠道微生物的研究意义第27-28页
    1.5 昆虫病毒的研究进展第28-29页
    1.6 本研究目的和意义第29-31页
第二章 ARF1促进WDV克服介体肠道释放屏障第31-53页
    2.1 材料方法第31-42页
        2.1.1 毒源保存及昆虫饲养第31页
        2.1.2 异沙叶蝉ARF1基因编码区全长克隆及分析第31-34页
        2.1.3 利用分离泛素酵母双杂交系统验证WDV-CP与ARF1之间的互作第34-36页
        2.1.4 利用Pull-down验证WDV-CP与ARF1之间的互作第36-37页
        2.1.5 利用Sf9昆虫表达系统验证蛋白互作第37-40页
        2.1.6 ARF1在叶蝉组织中的表达和定位第40-41页
        2.1.7 利用RNAi技术研究ARF1在异沙叶蝉传播WDV过程中的功能第41-42页
    2.2 实验结果与分析第42-51页
        2.2.1 异沙叶蝉ARF1基因克隆及分析第42-43页
        2.2.2 利用分离泛素酵母双杂交系统验证WDV-CP与ARF1之间的互作第43页
        2.2.3 利用Pull-down检测WDV-CP与ARF1之间的互作第43-44页
        2.2.4 利用Sf9昆虫表达系统验证蛋白互作第44-45页
        2.2.5 WDV-CP和ARF1在异沙叶蝉不同组织的共定位第45-47页
        2.2.6 利用RNAi抑制ARF1表达后对WDV的影响第47-51页
    2.3 讨论第51-53页
第三章 ADF在异沙叶蝉传播WDV过程的功能研究第53-61页
    3.1 材料方法第53-54页
        3.1.1 异沙叶蝉ADF编码区全长克隆及分析第53页
        3.1.2 利用分离泛素酵母双杂交系统验证WDV-CP与ADF之间的互作第53页
        3.1.3 利用pull-down验证WDV-CP与ADF之间的互作第53页
        3.1.4 利用Sf9昆虫表达系统验证蛋白互作第53-54页
        3.1.5 利用RNAi技术研究ADF在异沙叶蝉传播WDV过程中的功能第54页
        3.1.6 利用Sf9昆虫表达系统检测CP与ADF互作对actin的影响第54页
    3.2 实验结果与分析第54-59页
        3.2.1 异沙叶蝉ADF基因克隆及分析第54-55页
        3.2.2 利用分离泛素酵母双杂交系统验证WDV-CP与ADF之间的互作第55-56页
        3.2.3 利用Pull-down检测WDV-CP与ADF之间的互作第56页
        3.2.4 利用Sf9昆虫表达系统验证蛋白互作第56-57页
        3.2.5 利用RNAi抑制ADF表达后对WDV的影响第57-58页
        3.2.6 WDV-CP与ADF互作对ADF功能的影响第58-59页
    3.3 讨论第59-61页
第四章 异沙叶蝉肠道微生物组的解析以及微生物多样性与WDV传播的关系第61-75页
    4.1 材料方法第61-63页
        4.1.1 不同地区异沙叶蝉样品的收集及DNA的提取第61页
        4.1.2 肠道微生物16S rDNA基因片段的扩增及文库的构建第61页
        4.1.3 OTU分析第61-62页
        4.1.4 物种注释及分类学分析第62页
        4.1.5 多样性分析第62页
        4.1.6 组间差异显著性分析第62页
        4.1.7 KEGG通路分析第62页
        4.1.8 不同地区异沙叶蝉的传毒效率测定第62-63页
    4.2 结果分析第63-73页
        4.2.1 不同地区异沙叶蝉肠道微生物的组成以及对WDV传播的影响第63-65页
        4.2.2 不同地区叶蝉肠道微生物的多样性分析第65-68页
        4.2.3 不同地区叶蝉肠道微生物的差异性分析第68-70页
        4.2.4 功能预测第70页
        4.2.5 病毒对异沙叶蝉肠道微生物的影响第70-73页
    4.3 讨论第73-75页
第五章 异沙叶蝉新病毒的鉴定第75-87页
    5.1 材料方法第75-77页
        5.1.1 异沙叶蝉总RNA的提取第75页
        5.1.2 cDNA文库的构建和Illumina测序第75页
        5.1.3 原始数据的分析第75页
        5.1.4 RT-PCR检测及验证第75-76页
        5.1.5 利用RACE扩增病毒全基因组第76页
        5.1.6 生物信息学分析第76-77页
    5.2 结果与分析第77-85页
        5.2.1 高通量测序结果分析第77页
        5.2.2 候选病毒的确定及RT-PCR验证第77页
        5.2.3 异沙叶蝉软腐病毒1号的基因组结构及进化分析第77-82页
        5.2.4 太原叶蝉病毒的基因组结构及进化分析第82-85页
    5.3 讨论第85-87页
第六章 全文总结第87-89页
参考文献第89-102页
附录Ⅰ 介体禾谷缢管蚜传播BYDV-GPV的蛋白质组学分析第102-115页
附录Ⅱ 本实验所用引物第115-119页
致谢第119-121页
作者简历第121页

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