致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-13页 |
英文摘要 | 第13-20页 |
缩略词表 | 第21-25页 |
绪论 | 第25-42页 |
参考文献 | 第33-42页 |
第一部分 VEGF、FGF-2在肿瘤组织中的定量研究 | 第42-64页 |
1 前言 | 第42-45页 |
2 实验材料和方法 | 第45-53页 |
2.1 直肠癌样本的获取 | 第45-46页 |
2.2 组织RT-PCR检测 | 第46-48页 |
2.3 Western Blot检测 | 第48-51页 |
2.4 免疫组化检测 | 第51-52页 |
2.5 统计学分析 | 第52-53页 |
3 实验结果 | 第53-57页 |
3.1 直肠癌组织和对照癌旁组织VEGF、FGF-2 mRNA表达差异 | 第53-54页 |
3.2 直肠癌组织和对照癌旁组织VEGF、FGF-2蛋白表达Western Blot检测 | 第54-55页 |
3.3 直肠癌组织和对照癌旁组织VEGF、FGF-2蛋白表达免疫组化检测 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
6 参考文献 | 第60-64页 |
第二部分 VEGF、FGF-2双重拮抗蛋白的构建及其对直肠癌细胞抑制作用的研究 | 第64-118页 |
1 前言 | 第64-69页 |
2 实验材料和方法 | 第69-97页 |
2.1 实验材料 | 第69-72页 |
2.2 实验器材 | 第72-73页 |
2.3 实验方法 | 第73-96页 |
2.4 统计学分析 | 第96-97页 |
3 结果 | 第97-106页 |
3.1 质粒构建与测序验证 | 第97页 |
3.2 培养上清中的VEGF、FGF-2双重拮抗蛋白定量 | 第97-98页 |
3.3 融合蛋白对VEGF和FGF-2亲和能力检测 | 第98-100页 |
3.4 细胞上清液游离VEGF、FGF-2表达水平 | 第100-101页 |
3.5 细胞增殖、迁移、侵袭能力比较 | 第101-104页 |
3.6 AKT和ERK1/2通路相关蛋白表达 | 第104-106页 |
4 讨论 | 第106-110页 |
5 结论 | 第110-111页 |
6 参考文献 | 第111-118页 |
第三部分 VEGF、FGF-2双重拮抗蛋白抑制直肠癌细胞血管生成的研究 | 第118-131页 |
1 前言 | 第118-120页 |
2 实验材料和方法 | 第120-123页 |
2.1 实验材料 | 第120页 |
2.2 实验仪器 | 第120页 |
2.3 实验分组 | 第120-121页 |
2.4 细胞增殖能力检测 | 第121页 |
2.5 细胞迁移能力检测 | 第121-122页 |
2.6 体外血管形成实验 | 第122页 |
2.7 统计学分析 | 第122-123页 |
3 结果 | 第123-125页 |
3.1 细胞增殖、迁移、血管生成能力比较 | 第123-125页 |
4 讨论 | 第125-127页 |
5 结论 | 第127-128页 |
6 参考文献 | 第128-131页 |
附录 | 第131-141页 |
1 感受态细胞的制备和转化 | 第131-132页 |
2 薄型琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 | 第132-133页 |
3 质粒小量制备试剂盒(升级版离心柱型) | 第133-134页 |
4 金牌超量无内毒素质粒大提试剂盒 | 第134-136页 |
5 测序结果 | 第136-141页 |
综述一 | 第141-157页 |
参考文献 | 第150-157页 |
综述二 | 第157-164页 |
参考文献 | 第161-164页 |
附图 | 第164-166页 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第166页 |