| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 引言 | 第13页 |
| 1.2 肥胖概述 | 第13-15页 |
| 1.2.1 肥胖的产生原因及危害 | 第13-14页 |
| 1.2.2 肥胖的治疗措施 | 第14-15页 |
| 1.3 肠道微生物与肥胖 | 第15-17页 |
| 1.3.1 肥胖个体肠道微生物的变化 | 第15页 |
| 1.3.2 肠道微生物在肥胖中的作用 | 第15-16页 |
| 1.3.3 益生菌对肥胖的治疗作用 | 第16-17页 |
| 1.4 Christensenella minuta研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4.1 C.minuta的基本特性 | 第17-18页 |
| 1.4.2 C.minuta与肥胖 | 第18页 |
| 1.4.3 C.minuta的培养现状 | 第18-19页 |
| 1.5 全基因组测序技术及其在益生菌中的应用 | 第19-22页 |
| 1.5.1 全基因组测序技术 | 第20-21页 |
| 1.5.2 全基因组测序技术在益生菌安全性研究中的应用 | 第21-22页 |
| 1.6 本论文的研究意义及主要内容 | 第22-25页 |
| 1.6.1 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第23-25页 |
| 第二章 C.minuta全基因组测序及基因功能分析 | 第25-40页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-29页 |
| 2.2.1 菌株 | 第25页 |
| 2.2.2 试剂与仪器 | 第25-27页 |
| 2.2.3 培养基和溶液配方 | 第27页 |
| 2.2.4 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第29-38页 |
| 2.3.1 基因组提取及质量检测 | 第29页 |
| 2.3.2 C.minuta基因组基本特征 | 第29-31页 |
| 2.3.3 基因功能注释 | 第31-34页 |
| 2.3.4 耐药基因注释 | 第34-35页 |
| 2.3.5 毒力因子注释 | 第35-37页 |
| 2.3.6 有害代谢产物相关基因注释 | 第37-38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-40页 |
| 第三章 假定溶血素基因重组表达及活性鉴定 | 第40-53页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第40-48页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第40页 |
| 3.2.2 试剂与仪器 | 第40-41页 |
| 3.2.3 培养基和溶液配方 | 第41-42页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第42-48页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第48-51页 |
| 3.3.1 目的基因hlyA扩增 | 第48页 |
| 3.3.2 pET30a-hlyA重组质粒的构建 | 第48-49页 |
| 3.3.3 重组蛋白诱导表达及条件优化 | 第49-50页 |
| 3.3.4 重组蛋白大量表达纯化 | 第50-51页 |
| 3.3.5 溶血活性检测 | 第51页 |
| 3.4 本章小结 | 第51-53页 |
| 第四章 C.minuta LPS结构分析及其对RAW 264.7巨噬细胞激活的影响 | 第53-66页 |
| 4.1 引言 | 第53页 |
| 4.2 村料与仪器 | 第53-60页 |
| 4.2.1 细胞株和菌株 | 第53-54页 |
| 4.2.2 试剂与仪器 | 第54页 |
| 4.2.3 培养基和溶液配方 | 第54-55页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第55-60页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第60-65页 |
| 4.3.1 LPS提取与纯化结果 | 第60页 |
| 4.3.2 C.minuta LPS结构分析 | 第60-61页 |
| 4.3.3 C.minuta LPS对细胞增殖和吞噬的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.4 C.minuta LPS对NF-κB激活的影响 | 第62-63页 |
| 4.3.5 C.minuta LPS对炎症细胞因子表达的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.6 C.minuta LPS对RAW 264.7细胞产生NO的影响 | 第64页 |
| 4.3.7 C.minuta LPS对RAW 264.7产生ROS的影响 | 第64-65页 |
| 4.4 本章小结 | 第65-66页 |
| 第五章 C.minuta生长培养基优化 | 第66-80页 |
| 5.1 引言 | 第66页 |
| 5.2 材料与方法 | 第66-69页 |
| 5.2.1 菌株 | 第66页 |
| 5.2.2 试剂与仪器 | 第66-67页 |
| 5.2.3 培养基和溶液配方 | 第67页 |
| 5.2.4 实验方法 | 第67-69页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第69-79页 |
| 5.3.1 基础培养基选择 | 第69-70页 |
| 5.3.2 单因素试验 | 第70-73页 |
| 5.3.3 Plackett-Burman试验 | 第73-75页 |
| 5.3.4 最陡爬坡试验 | 第75页 |
| 5.3.5 Box-Behnken试验 | 第75-79页 |
| 5.4 本章小结 | 第79-80页 |
| 结论与展望 | 第80-83页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 创新性成果 | 第81页 |
| 展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 附件 | 第93页 |
