| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11页 |
| 1、前言 | 第12-33页 |
| 1.1 环境中的镉污染 | 第12-23页 |
| 1.1.1 镉污染的来源 | 第12-13页 |
| 1.1.2 镉污染的危害 | 第13-16页 |
| 1.1.2.1 镉污染对土壤微生物和酶活性的损伤 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 镉对植物的毒害作用 | 第14-15页 |
| 1.1.2.3 镉对人体健康的损害 | 第15-16页 |
| 1.1.3 镉污染的现状 | 第16-17页 |
| 1.1.4 镉污染治理 | 第17-23页 |
| 1.1.4.1 物理修复法 | 第17-18页 |
| 1.1.4.2 化学修复法 | 第18页 |
| 1.1.4.3 生物修复法 | 第18-23页 |
| 1.2 双孢蘑菇概述 | 第23-26页 |
| 1.2.1 双孢蘑菇的栽培和育种 | 第24-25页 |
| 1.2.2 双孢蘑菇对重金属镉的富集作用 | 第25-26页 |
| 1.3 二代测序技术 | 第26-31页 |
| 1.3.1 Illumina测序数据 | 第26-27页 |
| 1.3.2 建库测序的流程 | 第27-29页 |
| 1.3.3 数据处理的流程 | 第29页 |
| 1.3.4 对测序数据进行质量评估 | 第29-31页 |
| 1.3.5 对基因表达水平的分析 | 第31页 |
| 1.4 钙对生物富集重金属的影响 | 第31-32页 |
| 1.5 本论文的研究目的和意义 | 第32-33页 |
| 2、材料试剂与仪器 | 第33-36页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第33-35页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第33页 |
| 2.1.2 培养基 | 第33页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.4 引物合成 | 第34-35页 |
| 2.2 主要仪器 | 第35-36页 |
| 3、实验方法 | 第36-42页 |
| 3.1 重金属含量的测定 | 第36-37页 |
| 3.1.1 菌丝体培养 | 第36页 |
| 3.1.2 重金属含量检测方法 | 第36-37页 |
| 3.2 镉对双孢蘑菇菌丝生理生化水平的影响 | 第37-39页 |
| 3.2.1 菌丝生长速度测定 | 第37页 |
| 3.2.2 抗氧化相关酶活性的测定 | 第37-38页 |
| 3.2.2.1 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第37-38页 |
| 3.2.2.2 过氧化物酶(POD)活性测定 | 第38页 |
| 3.2.2.3 过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第38页 |
| 3.2.2.4 抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性测定 | 第38页 |
| 3.2.3 菌丝相对渗透率的测定 | 第38-39页 |
| 3.2.4 核酸和蛋白外渗率的测定 | 第39页 |
| 3.3 镉对双孢蘑菇菌丝内部结构的影响 | 第39页 |
| 3.3.1 扫描电镜 | 第39页 |
| 3.3.2 透射电镜 | 第39页 |
| 3.4 差异基因的筛选 | 第39-41页 |
| 3.4.1 总RNA提取及质量检测 | 第39-40页 |
| 3.4.2 表达量注释以及差异表达基因的筛选 | 第40页 |
| 3.4.3 GO功能的聚类分析 | 第40页 |
| 3.4.4 Pathway显著性富集分析 | 第40页 |
| 3.4.5 荧光定量PCR分析 | 第40-41页 |
| 3.5 钙添加对双孢蘑菇富集镉的影响 | 第41-42页 |
| 4、实验结果与分析 | 第42-70页 |
| 4.1 镉对双孢蘑菇菌丝日均生长速度及重金属含量的影响 | 第42-43页 |
| 4.2 镉对双孢蘑菇抗氧化酶类的影响 | 第43-51页 |
| 4.2.1 镉对双孢蘑菇SOD和POD活力的影响 | 第44-46页 |
| 4.2.2 镉对双孢蘑菇GSH和GR活力的影响 | 第46-47页 |
| 4.2.3 镉对双孢蘑菇APX和VC活力的影响 | 第47-48页 |
| 4.2.4 镉对双孢蘑菇Pro活力的影响 | 第48页 |
| 4.2.5 镉对双孢蘑菇H202和MDA活力的影响 | 第48-49页 |
| 4.2.6 镉对双孢蘑菇蛋白质和核酸外渗的影响 | 第49-51页 |
| 4.2.7 镉对双孢蘑菇相对渗透率的影响 | 第51页 |
| 4.3 双孢蘑菇富集镉的电镜观察结果 | 第51-54页 |
| 4.3.1 双孢蘑菇富集镉的透射电镜观察结果 | 第51-52页 |
| 4.3.2 双孢蘑菇富集镉的扫描电镜观察结果 | 第52-54页 |
| 4.4 差异表达基因的筛选与分析 | 第54-66页 |
| 4.4.1 测序结果的质量检测分析 | 第54-55页 |
| 4.4.2 差异表达基因的聚类分析 | 第55-56页 |
| 4.4.3 差异表达基因的GO功能显著性富集分析 | 第56-57页 |
| 4.4.4 差异表达基因的KEGG功能显著性富集分析 | 第57-58页 |
| 4.4.5 显著性差异表达基因的验证 | 第58-66页 |
| 4.4.5.1 显著性差异表达基因的测序结果分析 | 第58-63页 |
| 4.4.5.2 代谢过程中主要的上调差异基因验证 | 第63-64页 |
| 4.4.5.3 代谢过程中主要的下调差异基因验证 | 第64-66页 |
| 4.5 钙的添加对双孢蘑菇富集镉能力的影响 | 第66-70页 |
| 4.5.1 钙的添加对镉处理下菌丝表观形态的影响 | 第66页 |
| 4.5.2 钙的添加对镉处理下菌丝生长和富集镉的能力的影响 | 第66-68页 |
| 4.5.3 钙的添加对镉处理下菌丝内抗氧化系统的影响 | 第68-70页 |
| 5、讨论 | 第70-73页 |
| 5.1 镉对双孢蘑菇菌丝生长和抗氧化系统的影响 | 第70页 |
| 5.2 镉对双孢蘑菇菌丝结构的影响 | 第70-71页 |
| 5.3 双孢蘑菇富集镉的过程中差异基因的筛选与分析 | 第71-72页 |
| 5.4 钙对双孢蘑菇富集镉能力的影响 | 第72-73页 |
| 6、结论与展望 | 第73-74页 |
| 6.1 结论 | 第73页 |
| 6.2 展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
