摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略词 | 第9-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-27页 |
第一章 果实成熟过程品质性状的研究 | 第13-18页 |
1 糖类 | 第13-15页 |
2 有机酸 | 第15-16页 |
3 萜类化合物 | 第16-18页 |
第二章 蛋白组学及其在研究果实成熟方面的应用 | 第18-23页 |
1 蛋白质组学产生的背景和相关概念 | 第18-19页 |
2 蛋白组学研究技术 | 第19-21页 |
·蛋白分离和鉴定技术 | 第19-20页 |
·数据库和生物信息学 | 第20-21页 |
3 蛋白质组学发展趋势 | 第21页 |
4 蛋白组学在果实成熟研究方面的应用 | 第21-23页 |
第三章 植物IPI基因的研究 | 第23-26页 |
1 IPI参与的代谢途径 | 第23页 |
2 IPI研究进展 | 第23-25页 |
3 IPI的研究意义 | 第25-26页 |
第四章 本课题研究目的及意义 | 第26-27页 |
技术路线 | 第27-28页 |
第二部分 研究内容 | 第28-68页 |
第一章 牛奶子果实总蛋白的提取和双向电泳分析方法的改良 | 第28-39页 |
1 前言 | 第28页 |
2 材料与方法 | 第28-35页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·牛奶子果实总蛋白的提取 | 第29-31页 |
·蛋白定量 | 第31页 |
·第一向等电聚焦(以17 cm pH 4-7 IPG胶条为例) | 第31-33页 |
·第二向SDS-PAGE电泳 | 第33-34页 |
·染色 | 第34-35页 |
·图象扫描和分析 | 第35页 |
3 实验结果 | 第35-37页 |
·两种提取方法的蛋白得率及其图谱效果的比较 | 第35-37页 |
·不同平衡时间对2-DE图谱的影响 | 第37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
第二章 牛奶子果实成熟过程果实品质相关上调表达蛋白研究 | 第39-56页 |
1 前言 | 第39页 |
2 材料与方法 | 第39-44页 |
·实验材料 | 第39页 |
·糖和有机酸的测定 | 第39-40页 |
·2-DE和图象分析 | 第40-41页 |
·蛋白鉴定和数据库搜索 | 第41-42页 |
·Western杂交分析 | 第42-44页 |
3 实验结果 | 第44-50页 |
·牛奶子果实成熟时期的界定 | 第44-45页 |
·牛奶子果实成熟过程蛋白组学研究 | 第45页 |
·上调蛋白鉴定 | 第45-49页 |
·Western blot分析表达 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-56页 |
·糖代谢相关蛋白 | 第50页 |
·有机酸代谢相关蛋白 | 第50-51页 |
·异戊二烯代谢相关蛋白 | 第51-52页 |
·氧化胁迫相关蛋白 | 第52-53页 |
·防御相关蛋白 | 第53-54页 |
·其他蛋白 | 第54-56页 |
第三章 牛奶子果实IPI基因的克隆 | 第56-68页 |
1 前言 | 第56页 |
2 材料与方法 | 第56-61页 |
·实验材料 | 第56页 |
·酶和生化试剂 | 第56-57页 |
·菌株与载体 | 第57页 |
·果实中总RNA提取 | 第57-58页 |
·单链cDNA合成 | 第58页 |
·双链cDNA合成 | 第58-59页 |
·引物设计 | 第59页 |
·PCR扩增和电泳检测 | 第59页 |
·PCR产物纯化和T-载体连接 | 第59-60页 |
·蓝白斑筛选 | 第60-61页 |
·测序 | 第61页 |
3 实验结果 | 第61-66页 |
·RNA的提取与cDNA的合成 | 第61-62页 |
·牛奶子IPI基因的克隆 | 第62-66页 |
4 讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-77页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |