| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 文献回顾 | 第17-24页 |
| 第一部分 TRPC6在动脉粥样硬化斑块中的表达 | 第24-34页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| 1.1 实验仪器 | 第24页 |
| 1.2 实验试剂 | 第24-25页 |
| 1.3 实验动物与尸检标本 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-28页 |
| 2.1 免疫组织化学法检测人颈动脉AS斑块中TRPC6的表达 | 第26页 |
| 2.2 建立高脂饲料诱导的ApoE~(-/-)小鼠AS模型,病理染色法评价主动脉AS损伤程度·· | 第26-28页 |
| 2.3 免疫组织化学法检测小鼠主动脉窦AS斑块中TRPC6的表达 | 第28页 |
| 2.4 免疫荧光染色法检测TRPC6在AS斑块中的细胞定位 | 第28页 |
| 2.5 数据统计与分析 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-32页 |
| 3.1 TRPC6在人颈动脉AS斑块中表达升高 | 第28-29页 |
| 3.2 高脂饲料喂养的ApoE~(-/-)小鼠主动脉形成明显动脉粥样硬化斑块 | 第29-30页 |
| 3.3 TRPC6在小鼠主动脉AS斑块中表达升高 | 第30-31页 |
| 3.4 TRPC6在AS斑块中的巨噬细胞上表达升高最为显著 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 第二部分 TRPC6在小鼠动脉粥样硬化发生中的作用 | 第34-50页 |
| 1 材料 | 第34-36页 |
| 1.1 实验仪器 | 第34-35页 |
| 1.2 实验试剂 | 第35-36页 |
| 1.3 实验动物 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-41页 |
| 2.1 Trpc6和ApoE双基因敲除小鼠的繁育,基因型鉴定及造模 | 第36-37页 |
| 2.2 超高分辨率小动物超声影像系统评价小鼠颈总动脉血流动力学特性变化 | 第37-38页 |
| 2.3 病理染色法评价主动脉AS损伤程度 | 第38页 |
| 2.4 动物体重、血糖及血脂测定 | 第38-39页 |
| 2.5 酶联免疫吸附测定法检测血清炎症因子水平 | 第39-40页 |
| 2.6 免疫组化法和天狼猩红染色法检测分析AS斑块组成,评价斑块稳定性 | 第40页 |
| 2.7 数据统计与分析 | 第40-41页 |
| 3 结果 | 第41-48页 |
| 3.1 Trpc6和ApoE双基因敲除小鼠的繁育,基因型鉴定及造模 | 第41-42页 |
| 3.2 Trpc6基因敲除后,AS所致的血管壁增厚及血流阻力升高得到明显改善 | 第42-44页 |
| 3.3 Trpc6基因敲除后,AS小鼠主动脉斑块形成程度显著降低 | 第44-45页 |
| 3.4 Trpc6基因敲除后,AS小鼠体重、血糖及血脂无显著变化 | 第45-46页 |
| 3.5 Trpc6基因敲除后,AS小鼠血清中炎症因子水平显著降低 | 第46页 |
| 3.6 Trpc6基因敲除后,AS小鼠斑块组成发生显著改变,斑块稳定性提高 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第三部分 TRPC6调控巨噬细胞功能参与AS发生的机制研究 | 第50-75页 |
| 1 材料 | 第50-53页 |
| 1.1 实验仪器 | 第50页 |
| 1.2 实验试剂 | 第50-52页 |
| 1.3 实验动物 | 第52页 |
| 1.4 实验细胞 | 第52-53页 |
| 2 方法 | 第53-59页 |
| 2.1 转录组测序检测主动脉组织差异基因表达及富集情况 | 第53-54页 |
| 2.2 建立ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化模型,Western Blot法检测泡沫细胞中TRPC6的表达 | 第54-55页 |
| 2.3 qPCR法检测巨噬细胞脂质摄取、排出、水解和酯化相关基因表达 | 第55-56页 |
| 2.4 ELISA法检测巨噬细胞炎症因子分泌水平,Western Blot法检测NFκB相关蛋白活性 | 第56-57页 |
| 2.5 qPCR法评价体外巨噬细胞极化水平 | 第57-58页 |
| 2.6 TUNEL法检测AS斑块中巨噬细胞的凋亡,Western Blot法检测泡沫细胞中凋亡相关蛋白的表达 | 第58页 |
| 2.7 BrdU法检测AS斑块中巨噬细胞的增殖 | 第58-59页 |
| 2.8 数据统计与分析 | 第59页 |
| 3 结果 | 第59-73页 |
| 3.1 Trpc6基因敲除后,AS小鼠主动脉转录组基因表达发生显著变化 | 第59-63页 |
| 3.2 Trpc6基因敲除后,巨噬细胞泡沫化水平显著降低 | 第63-65页 |
| 3.3 Trpc6基因敲除后,巨噬细胞中介导脂质摄取的Marco基因表达显著下调 | 第65-66页 |
| 3.4 Trpc6基因敲除后,巨噬细胞分泌的炎症因子显著减少,NFκB活化显著下降 | 第66-68页 |
| 3.5 Trpc6基因敲除后,巨噬细胞M1型极化显著减弱,M2型极化显著增强 | 第68-69页 |
| 3.6 Trpc6基因敲除后,AS斑块中巨噬细胞凋亡水平显著下降 | 第69-72页 |
| 3.7 Trpc6基因对巨噬细胞增殖无显著影响 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 小结 | 第75-76页 |
| 结论 | 第75页 |
| 创新点 | 第75页 |
| 待深入研究问题 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 个人简历和研究成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
