摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第11-18页 |
1.1 禾谷镰刀菌引起的小麦赤霉病是粮食产量和食品安全的重大威胁 | 第11-12页 |
1.2 有性生殖是禾谷镰刀菌生活史的重要组成部分,为侵染提供初侵染源 | 第12-13页 |
1.3 AtoIRNA编辑特定发生于禾谷镰刀菌的有性生殖阶段 | 第13-14页 |
1.4 RIP是丝状真菌有性生殖阶段中另一个重要的表观遗传机制 | 第14-15页 |
1.5 不同的丝状真菌中RIP具有不同的特点 | 第15-17页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
第二章 FgRID1基因的敲除、Southern验证及表型观察 | 第18-36页 |
2.1 FgRID1基因的敲除 | 第18-23页 |
2.1.1 材料 | 第18-20页 |
2.1.2 试验方法 | 第20-23页 |
2.2 转化子Southern验证 | 第23-27页 |
2.2.1 材料 | 第23-24页 |
2.2.2 试验方法 | 第24-27页 |
2.3 突变体表型观察 | 第27-28页 |
2.3.1 材料 | 第27页 |
2.3.2 试验方法 | 第27-28页 |
2.4 试验结果 | 第28-34页 |
2.4.1 Fgrid1突变体的获得及验证 | 第28-29页 |
2.4.2 Fgrid1突变体的菌落生长速度及形态表现正常 | 第29-30页 |
2.4.3 Fgrid1突变体在产孢量、孢子形态及萌发上未发现明显缺陷 | 第30-31页 |
2.4.4 FgRID1不是侵染产毒所必需的 | 第31-32页 |
2.4.5 Fgrid1突变体的子囊壳形成较少、子囊孢子喷射能力下降 | 第32-33页 |
2.4.6 Fgrid1突变体的子囊孢子发育畸形 | 第33-34页 |
2.5 讨论 | 第34-36页 |
第三章 禾谷镰刀菌中的RIP以及FgRID1对RIP的影响 | 第36-43页 |
3.1 材料 | 第36-37页 |
3.1.1 菌株及载体 | 第36页 |
3.1.2 试剂 | 第36-37页 |
3.1.3 仪器 | 第37页 |
3.2 试验方法 | 第37-39页 |
3.2.1 引物的设计 | 第37页 |
3.2.2 片段扩增与质粒酶切 | 第37页 |
3.2.3 酵母检测与质粒提取 | 第37-38页 |
3.2.4 大肠杆菌电击转化及检测 | 第38页 |
3.2.5 载体转化及FgRID1的G418抗性基因敲除 | 第38页 |
3.2.6 有性RIP试验 | 第38-39页 |
3.3 试验结果 | 第39-41页 |
3.3.1 FgRID1介导了禾谷镰刀菌中的RIP | 第39页 |
3.3.2 禾谷镰刀菌RIP产生的点突变类型为C:G到T:A | 第39-41页 |
3.4 讨论 | 第41-43页 |
第四章 RNA编辑对表型和RIP的影响 | 第43-50页 |
4.1 材料 | 第43页 |
4.1.1 菌株及载体 | 第43页 |
4.1.2 试剂 | 第43页 |
4.1.3 仪器 | 第43页 |
4.2 试验方法 | 第43-45页 |
4.2.1 片段扩增及回收 | 第43-44页 |
4.2.2 互补载体构建及转化 | 第44页 |
4.2.3 敲除FgRID1编辑位点后半段 | 第44-45页 |
4.2.4 有性观察及子囊孢子喷发试验 | 第45页 |
4.3 试验结果 | 第45-48页 |
4.3.1 RNA编辑影响有性阶段的发育 | 第45-46页 |
4.3.2 非有性发育阶段表达FgRid1编辑态不会造成营养生长和产孢的缺陷 | 第46-47页 |
4.3.3 RNA编辑参与调控RIP机制 | 第47-48页 |
4.4 讨论 | 第48-50页 |
第五章 全文结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56页 |