| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-25页 |
| ·间质干细胞 | 第14-17页 |
| ·间质干细胞生物学特性及应用 | 第14页 |
| ·间质干细胞突变致瘤 | 第14-17页 |
| ·肿瘤干细胞 | 第17-25页 |
| ·肿瘤发生与肿瘤干细胞理论 | 第17页 |
| ·肿瘤干细胞研究历史 | 第17-18页 |
| ·肿瘤干细胞的生物学特性 | 第18-19页 |
| ·肿瘤干细胞与耐药 | 第19-20页 |
| ·肿瘤干细胞的分离 | 第20-21页 |
| ·肿瘤干细胞与SP细胞 | 第21-23页 |
| ·肿瘤干细胞的鉴定 | 第23页 |
| ·肿瘤干细胞的研究意义 | 第23-25页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第25-29页 |
| ·研究目的 | 第25页 |
| ·研究方法 | 第25-26页 |
| ·实验设计方案 | 第26-28页 |
| ·K3细胞的生物学特性研究 | 第26-27页 |
| ·K3肿瘤干细胞分离、鉴定及生物学特性对比研究 | 第27-28页 |
| ·无血清培养基培养后K3细胞的生物学特性 | 第28页 |
| ·研究意义 | 第28-29页 |
| 第三章 K3细胞来源及生物学特性 | 第29-38页 |
| ·试剂与仪器 | 第29-30页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要仪器、耗材 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-33页 |
| ·细胞培养 | 第30-31页 |
| ·流式细胞仪检测瘤及K3细胞表面标记 | 第31页 |
| ·裸鼠致瘤实验 | 第31页 |
| ·细胞爬片制作及免疫组织化学染色 | 第31页 |
| ·总RNA提取以及逆转录 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增 | 第32页 |
| ·流式细胞分析 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-37页 |
| ·大鼠尾部细胞致瘤及K3细胞表面标记与基因表达 | 第33页 |
| ·SD大鼠瘤细胞和K3细胞形态 | 第33页 |
| ·K3细胞免疫组化基因表达分析 | 第33页 |
| ·K3细胞致瘤实验 | 第33页 |
| ·K3SP细胞含量分析 | 第33-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 K3肿瘤干细胞分离鉴定及生物学特性 | 第38-50页 |
| ·试剂与仪器 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器、耗材 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-42页 |
| ·细胞培养 | 第39页 |
| ·Hoechst 33342染色 | 第39页 |
| ·K3-SP流式细胞分选 | 第39页 |
| ·RNA提取以及逆转录 | 第39-40页 |
| ·PCR扩增 | 第40页 |
| ·T-A克隆 | 第40页 |
| ·荧光定量PCR | 第40-41页 |
| ·石蜡切片制作及免疫组织化学染色 | 第41页 |
| ·裸鼠致瘤实验 | 第41页 |
| ·基因芯片 | 第41页 |
| ·统计分析 | 第41-42页 |
| ·结果 | 第42-48页 |
| ·K3细胞Hoechst 33342染色 | 第42页 |
| ·裸鼠致瘤模型 | 第42页 |
| ·基因芯片 | 第42页 |
| ·荧光定量PCR验证基因芯片结果及干细胞相关基因 | 第42-43页 |
| ·免疫组化结果 | 第43-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 无血清培养对K3-SP细胞的富集作用 | 第50-59页 |
| ·试剂与仪器 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器、耗材 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-52页 |
| ·细胞培养 | 第51页 |
| ·生长曲线 | 第51页 |
| ·K3流式细胞检测 | 第51页 |
| ·RNA提取以及逆转录 | 第51-52页 |
| ·PCR扩增 | 第52页 |
| ·T-A克隆 | 第52页 |
| ·荧光定量PCR | 第52页 |
| ·统计分析 | 第52页 |
| ·结果 | 第52-58页 |
| ·K3细胞在不同培养条件下培养形态 | 第52-53页 |
| ·流式细胞术不同培养条件下SP细胞含量分析 | 第53页 |
| ·5%FBS、无血清、无血清加因子培养条件K3生长曲线 | 第53页 |
| ·无血清、无血清加因子培养条件下Oct4基因表达差异 | 第53-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 结论及展望 | 第59-60页 |
| 一、结论 | 第59页 |
| 二、展望 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 攻读硕士学位期间获奖及发表的学术论文 | 第68-69页 |