摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第9-15页 |
1.1 毛状根的研究概况 | 第9-10页 |
1.1.1 棉花转基因研究现状 | 第9-10页 |
1.1.2 发根农杆菌的生物学特性与分类 | 第10页 |
1.2 诱导毛状根的几种方法 | 第10-11页 |
1.3 毛状根阳性率鉴定筛选 | 第11页 |
1.4 影响发根农杆菌对植物遗传转化效率的因素 | 第11-13页 |
1.5 毛状根的应用 | 第13页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第13-15页 |
2 材料与方法 | 第15-22页 |
2.1 试验材料 | 第15-17页 |
2.1.1 选取的植物材料 | 第15页 |
2.1.2 菌种 | 第15页 |
2.1.3 质粒 | 第15页 |
2.1.4 酶与试剂 | 第15页 |
2.1.5 试剂配制 | 第15-16页 |
2.1.6 培养基 | 第16-17页 |
2.2 试验方法 | 第17-22页 |
2.2.1 发根农杆菌K599的培养 | 第17页 |
2.2.2 发根农杆菌K599感受态的转化试验 | 第17-18页 |
2.2.3 质粒提取 | 第18页 |
2.2.4 质粒和发根农杆菌的制备 | 第18页 |
2.2.5 发根农杆菌阳性克隆的鉴定 | 第18-19页 |
2.2.6 发根农杆菌质粒的分子鉴定 | 第19页 |
2.2.7 棉花无菌苗的培养及其培养条件 | 第19-20页 |
2.2.8 棉花发根农杆菌转化过程 | 第20页 |
2.2.9 不同外植体的获得棉花毛状根的比较 | 第20页 |
2.2.10 棉花毛状根的固体培养 | 第20页 |
2.2.11 提取棉花毛状根基因组DNA | 第20-21页 |
2.2.12 GΜS报告基因的PCR检测和组织化学检测 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-28页 |
3.1 无菌条件下棉花毛状根体系的建立 | 第22页 |
3.2 不同外植体对棉花毛状根诱导的比较 | 第22-23页 |
3.3 不同侵染方法对棉花毛状根诱导的比较 | 第23-24页 |
3.4 不同预培养时间对棉花毛状根诱导的比较 | 第24页 |
3.5 不同共培养时间对棉花毛状根诱导的比较 | 第24页 |
3.6 不同激素诱导对棉花毛状根的比较 | 第24-25页 |
3.7 转基因毛状根的分子检测 | 第25-27页 |
3.7.1 毛状根GΜS染色 | 第25-26页 |
3.7.2 毛状根的PCR检测 | 第26-27页 |
3.8 棉花毛状根的固体培养 | 第27-28页 |
4 讨论 | 第28-30页 |
4.1 影响棉花毛状根诱导率的各因素比较分析 | 第28-29页 |
4.2 本试验在大规模生产次生物质的应用价值 | 第29-30页 |
5 结论 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-35页 |
在读期间发表学术论文 | 第35-36页 |
作者简介 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
详细摘要 | 第38-39页 |