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阿尔茨海默病患者和模型小鼠前额叶皮层lncRNAs的表达及功能分析

中英文缩略词第9-10页
摘要第10-12页
Abstract第12-14页
第一部分 阿尔茨海默病患者与同龄正常人前额叶皮层lncRNAs表达及功能分析第15-50页
    摘要第15-16页
    Abstract第16-17页
    前言第17-21页
    材料和方法第21-33页
        1.实验材料第21-23页
            1.1 阿尔茨海默病患者和同龄正常人PFC组织第21-22页
            1.2 主要试剂与仪器第22-23页
        2.实验方法第23-33页
            2.1 脑组织总RNA提取与质控第23-25页
            2.2 LncRNAs测序实验流程(建库和测序)第25页
            2.3 信息分析流程第25-30页
            2.4 qRT-PCR实验验证第30-33页
    结果第33-47页
        1.总RNA提取及质量检测第33页
        2.LncRNAs测序原始数据基本情况第33-36页
        3.基因组比对第36页
        4.LncRNAs和mRNA转录本表达第36-37页
        5.差异表达分析第37-42页
        6.qRT-PCR验证部分差异表达的lncRNAs和mRNA第42页
        7.功能分析第42-44页
        8.差异表达lncRNAs KEGG通路分析第44-45页
        9.差异表达lncRNAs-mRNA互作分析第45-47页
    讨论第47-49页
    小结第49-50页
第二部分 APP/PS1双转基因模型小鼠与野生型小鼠前额叶皮层lncRNAs表达及功能分析第50-81页
    摘要第50-51页
    Abstract第51-52页
    前言第52-56页
    材料和方法第56-62页
        1.实验材料第56-57页
            1.1 APP/PS1双转基因模型小鼠与野生型C57小鼠PFC组织第56页
            1.2 主要试剂第56-57页
            1.3 主要仪器第57页
        2.实验方法第57-62页
            2.1 转基因动物的鉴定第57-59页
            2.2 脑组织处理第59页
            2.3 脑组织总RNA提取与质控第59页
            2.4 lncRNAs测序实验流程(建库和测序)第59-60页
            2.5 信息分析流程(图2-3)第60页
            2.6 qRT-PCR实验验证第60-62页
    结果第62-78页
        1.APP swe/PS1 AE9(PAP)双转基因AD模型小鼠基因型鉴定第62页
        2.总RNA提取及质量检测第62-63页
        3.lncRNAs测序原始数据基本情况第63-66页
        4.基因组化对第66页
        5.lncRNAs和mRNA转录本表达第66-67页
        6.差异表达分析第67-72页
        7.qRT-PCR验证部分差异表达的lncRNAs和mRNA第72页
        8.功能分析第72-74页
        9.差异表达lncRNAs KEGG通路分析第74-75页
        10.差异表达lncRNAs-mRNA互作分析第75-78页
    讨论第78-80页
    小结第80-81页
第三部分 AD患者与AD模型小鼠前额叶皮层lncRNAs表达及功能比较分析第81-102页
    摘要第81-82页
    Abstract第82-84页
    前言第84-86页
    材料和方法第86-88页
        1.实验材料第86页
        2.实验方法第86-88页
            2.1 聚类分析算法第86页
            2.2 DAVID基因功能富集分析软件第86-87页
            2.3 同源基因表达模式评估第87页
            2.4 同源lncRNAs表达模式评估第87页
            2.5 lncRNAs-mRNA功能调控分析第87-88页
    结果第88-99页
        1.人和小鼠lncRNAs测序原始数据基本情况第88-89页
        2.人与小鼠PFC同源mRNA和lncRNAs表达模式第89-91页
        3.人与小鼠PFC高表达mRNA和lncRNAs的生物学功能第91-94页
        4.AD患者和AD模型小鼠差异表达mRNA和lncRNAs比较分析第94-96页
        5.AD患者与AD模型小鼠PFC差异表达lncRNAs GO分析比较第96-97页
        6.AD患者与AD模型小鼠PFC差异表达lncRNAs KEGG分析比较第97-99页
    讨论第99-101页
    小结第101-102页
第四部分 lncRNA MEG3通过调节HDAC2和突触相关蛋白表达参与认知功能损伤的作用第102-135页
    摘要第102-103页
    Abstract第103-104页
    前言第104-108页
    材料和方法第108-123页
        1.实验材料第108-112页
            1.1 细胞系第108页
            1.2 主要试剂第108-109页
            1.3 主要仪器和材料第109-110页
            1.4 主要试剂配制第110-112页
        2.实验方法第112-122页
            2.1 细胞培养第112页
            2.2 miRNA-656-3p, novol-21-5p, MEG3和mRNA表达水平检测第112-115页
            2.3 表达载体构建第115-116页
            2.4 慢病毒制备及稳转细胞系的构建第116页
            2.5 腺病毒制备及转染第116页
            2.6 细胞分选第116-117页
            2.7 CCK8检测细胞增殖第117页
            2.8 细胞免疫荧光化学染色第117-118页
            2.9 RNAscope原位杂交第118页
            2.10 细胞蛋白提取第118-120页
            2.11 蛋白质免疫印迹(Western Blot)第120-122页
        3.统计方法第122-123页
    结果第123-131页
        1.MEG3共表达分析及在脑组织中的验证第123页
        2.SH-SY5Y细胞病毒转染效率检测第123-124页
        3.MEG3抑制神经细胞增殖第124-125页
        4.MEG3损伤SY5Y细胞形态第125-126页
        5.MEG3增强HDAC2的表达第126-127页
        6.MEG3调控突触相关蛋白的表达第127-129页
        7.miR-656-3p和novel-21-5p在各组织中及MEG3转染后的表达第129-131页
    讨论第131-134页
    小结第134-135页
参考文献第135-147页
个人简历第147-148页
致谢第148-149页

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