中英文缩略词 | 第9-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
第一部分 阿尔茨海默病患者与同龄正常人前额叶皮层lncRNAs表达及功能分析 | 第15-50页 |
摘要 | 第15-16页 |
Abstract | 第16-17页 |
前言 | 第17-21页 |
材料和方法 | 第21-33页 |
1.实验材料 | 第21-23页 |
1.1 阿尔茨海默病患者和同龄正常人PFC组织 | 第21-22页 |
1.2 主要试剂与仪器 | 第22-23页 |
2.实验方法 | 第23-33页 |
2.1 脑组织总RNA提取与质控 | 第23-25页 |
2.2 LncRNAs测序实验流程(建库和测序) | 第25页 |
2.3 信息分析流程 | 第25-30页 |
2.4 qRT-PCR实验验证 | 第30-33页 |
结果 | 第33-47页 |
1.总RNA提取及质量检测 | 第33页 |
2.LncRNAs测序原始数据基本情况 | 第33-36页 |
3.基因组比对 | 第36页 |
4.LncRNAs和mRNA转录本表达 | 第36-37页 |
5.差异表达分析 | 第37-42页 |
6.qRT-PCR验证部分差异表达的lncRNAs和mRNA | 第42页 |
7.功能分析 | 第42-44页 |
8.差异表达lncRNAs KEGG通路分析 | 第44-45页 |
9.差异表达lncRNAs-mRNA互作分析 | 第45-47页 |
讨论 | 第47-49页 |
小结 | 第49-50页 |
第二部分 APP/PS1双转基因模型小鼠与野生型小鼠前额叶皮层lncRNAs表达及功能分析 | 第50-81页 |
摘要 | 第50-51页 |
Abstract | 第51-52页 |
前言 | 第52-56页 |
材料和方法 | 第56-62页 |
1.实验材料 | 第56-57页 |
1.1 APP/PS1双转基因模型小鼠与野生型C57小鼠PFC组织 | 第56页 |
1.2 主要试剂 | 第56-57页 |
1.3 主要仪器 | 第57页 |
2.实验方法 | 第57-62页 |
2.1 转基因动物的鉴定 | 第57-59页 |
2.2 脑组织处理 | 第59页 |
2.3 脑组织总RNA提取与质控 | 第59页 |
2.4 lncRNAs测序实验流程(建库和测序) | 第59-60页 |
2.5 信息分析流程(图2-3) | 第60页 |
2.6 qRT-PCR实验验证 | 第60-62页 |
结果 | 第62-78页 |
1.APP swe/PS1 AE9(PAP)双转基因AD模型小鼠基因型鉴定 | 第62页 |
2.总RNA提取及质量检测 | 第62-63页 |
3.lncRNAs测序原始数据基本情况 | 第63-66页 |
4.基因组化对 | 第66页 |
5.lncRNAs和mRNA转录本表达 | 第66-67页 |
6.差异表达分析 | 第67-72页 |
7.qRT-PCR验证部分差异表达的lncRNAs和mRNA | 第72页 |
8.功能分析 | 第72-74页 |
9.差异表达lncRNAs KEGG通路分析 | 第74-75页 |
10.差异表达lncRNAs-mRNA互作分析 | 第75-78页 |
讨论 | 第78-80页 |
小结 | 第80-81页 |
第三部分 AD患者与AD模型小鼠前额叶皮层lncRNAs表达及功能比较分析 | 第81-102页 |
摘要 | 第81-82页 |
Abstract | 第82-84页 |
前言 | 第84-86页 |
材料和方法 | 第86-88页 |
1.实验材料 | 第86页 |
2.实验方法 | 第86-88页 |
2.1 聚类分析算法 | 第86页 |
2.2 DAVID基因功能富集分析软件 | 第86-87页 |
2.3 同源基因表达模式评估 | 第87页 |
2.4 同源lncRNAs表达模式评估 | 第87页 |
2.5 lncRNAs-mRNA功能调控分析 | 第87-88页 |
结果 | 第88-99页 |
1.人和小鼠lncRNAs测序原始数据基本情况 | 第88-89页 |
2.人与小鼠PFC同源mRNA和lncRNAs表达模式 | 第89-91页 |
3.人与小鼠PFC高表达mRNA和lncRNAs的生物学功能 | 第91-94页 |
4.AD患者和AD模型小鼠差异表达mRNA和lncRNAs比较分析 | 第94-96页 |
5.AD患者与AD模型小鼠PFC差异表达lncRNAs GO分析比较 | 第96-97页 |
6.AD患者与AD模型小鼠PFC差异表达lncRNAs KEGG分析比较 | 第97-99页 |
讨论 | 第99-101页 |
小结 | 第101-102页 |
第四部分 lncRNA MEG3通过调节HDAC2和突触相关蛋白表达参与认知功能损伤的作用 | 第102-135页 |
摘要 | 第102-103页 |
Abstract | 第103-104页 |
前言 | 第104-108页 |
材料和方法 | 第108-123页 |
1.实验材料 | 第108-112页 |
1.1 细胞系 | 第108页 |
1.2 主要试剂 | 第108-109页 |
1.3 主要仪器和材料 | 第109-110页 |
1.4 主要试剂配制 | 第110-112页 |
2.实验方法 | 第112-122页 |
2.1 细胞培养 | 第112页 |
2.2 miRNA-656-3p, novol-21-5p, MEG3和mRNA表达水平检测 | 第112-115页 |
2.3 表达载体构建 | 第115-116页 |
2.4 慢病毒制备及稳转细胞系的构建 | 第116页 |
2.5 腺病毒制备及转染 | 第116页 |
2.6 细胞分选 | 第116-117页 |
2.7 CCK8检测细胞增殖 | 第117页 |
2.8 细胞免疫荧光化学染色 | 第117-118页 |
2.9 RNAscope原位杂交 | 第118页 |
2.10 细胞蛋白提取 | 第118-120页 |
2.11 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第120-122页 |
3.统计方法 | 第122-123页 |
结果 | 第123-131页 |
1.MEG3共表达分析及在脑组织中的验证 | 第123页 |
2.SH-SY5Y细胞病毒转染效率检测 | 第123-124页 |
3.MEG3抑制神经细胞增殖 | 第124-125页 |
4.MEG3损伤SY5Y细胞形态 | 第125-126页 |
5.MEG3增强HDAC2的表达 | 第126-127页 |
6.MEG3调控突触相关蛋白的表达 | 第127-129页 |
7.miR-656-3p和novel-21-5p在各组织中及MEG3转染后的表达 | 第129-131页 |
讨论 | 第131-134页 |
小结 | 第134-135页 |
参考文献 | 第135-147页 |
个人简历 | 第147-148页 |
致谢 | 第148-149页 |