中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
缩略语/符号说明 | 第14-16页 |
前言 | 第16-20页 |
研究现状、成果 | 第16-18页 |
研究目的、方法 | 第18-20页 |
一、生物信息学分析筛选椎间盘退变关键基因 | 第20-32页 |
1.1 对象和方法 | 第20-22页 |
1.1.1 实验对象 | 第20页 |
1.1.2 实验仪器与试剂 | 第20页 |
1.1.3 实验方法 | 第20-22页 |
1.1.3.1 微阵列数据 | 第20-21页 |
1.1.3.2 预处理和差异分析 | 第21页 |
1.1.3.3 差异表达miRNAs的靶基因 | 第21页 |
1.1.3.4 GO功能富集分析 | 第21页 |
1.1.3.5 KEGG通路富集分析 | 第21页 |
1.1.3.6 蛋白互作网络 | 第21-22页 |
1.1.3.7 统计分析 | 第22页 |
1.2 结果 | 第22-23页 |
1.2.1 识别表达差异基因及miRNAs | 第22页 |
1.2.2 靶基因预测及验证 | 第22页 |
1.2.3 差异基因的GO功能富集分析与KEGG通路富集分析 | 第22-23页 |
1.2.4 PPI网络构建及关键基因筛选 | 第23页 |
1.3 讨论 | 第23-30页 |
1.4 小结 | 第30-32页 |
二、RAD21、NDC80和BUB1B基因功能体外实验研究 | 第32-47页 |
2.1 对象和方法 | 第32-39页 |
2.1.1 动物来源 | 第32页 |
2.1.2 实验仪器与试剂 | 第32-34页 |
2.1.3 实验方法 | 第34-39页 |
2.1.3.1 大鼠椎间盘获取 | 第34页 |
2.1.3.2 髓核细胞分离与培养 | 第34-36页 |
2.1.3.3 慢病毒质粒载体合成 | 第36-37页 |
2.1.3.4 细胞分组与转染 | 第37页 |
2.1.3.5 免疫组织化学法 | 第37-38页 |
2.1.3.6 MTT法 | 第38页 |
2.1.3.7 流式细胞术 | 第38-39页 |
2.1.3.8 统计学分析 | 第39页 |
2.2 结果 | 第39-40页 |
2.2.1 髓核细胞形态学观察 | 第39页 |
2.2.2 不同siRNA序列沉默效率比较 | 第39页 |
2.2.3 沉默NDC80、BUB1B及RAD21基因对髓核细胞增殖的影响 | 第39页 |
2.2.4 沉默NDC80、BUB1B及RAD21基因对髓核细胞周期分布与凋亡率的影响 | 第39-40页 |
2.2.5 沉默NDC80、BUB1B及RAD21基因沉默对髓核细胞Ⅱ型胶原含量的影响 | 第40页 |
2.3 讨论 | 第40-46页 |
2.4 小结 | 第46-47页 |
三、RAD21、NDC80和BUB1B基因功能体内实验研究 | 第47-66页 |
3.1 对象和方法 | 第47-55页 |
3.1.1 实验动物 | 第47页 |
3.1.2 实验仪器与试剂 | 第47-49页 |
3.1.2.1 实验仪器 | 第47-48页 |
3.1.2.2 实验试剂 | 第48-49页 |
3.1.3 实验方法 | 第49-55页 |
3.1.3.1 大鼠的麻醉 | 第49-50页 |
3.1.3.2 大鼠椎间盘退变模型的制备 | 第50页 |
3.1.3.3 大鼠椎间盘的分离 | 第50-51页 |
3.1.3.4 HE染色 | 第51页 |
3.1.3.5 免疫组织化学染色 | 第51-52页 |
3.1.3.6 大鼠椎间盘髓核组织总RNA的提取和qRT-PCR | 第52-55页 |
3.2 实验结果 | 第55页 |
3.2.1 大鼠椎间盘退变动物模型的构建 | 第55页 |
3.2.2 大鼠退变椎间盘髓核组织中NDC80、BUB1B和RAD21基因表达量变化 | 第55页 |
3.3 讨论 | 第55-64页 |
3.4 小结 | 第64-66页 |
结论 | 第66-68页 |
论文创新点 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-92页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第92-94页 |
附录 | 第94-100页 |
综述 | 第100-121页 |
综述参考文献 | 第109-121页 |
致谢 | 第121-122页 |
个人简历 | 第122页 |