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沉默NDC80、RAD21和BUB1B基因调控椎间盘退变的实验研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-10页
缩略语/符号说明第14-16页
前言第16-20页
    研究现状、成果第16-18页
    研究目的、方法第18-20页
一、生物信息学分析筛选椎间盘退变关键基因第20-32页
    1.1 对象和方法第20-22页
        1.1.1 实验对象第20页
        1.1.2 实验仪器与试剂第20页
        1.1.3 实验方法第20-22页
            1.1.3.1 微阵列数据第20-21页
            1.1.3.2 预处理和差异分析第21页
            1.1.3.3 差异表达miRNAs的靶基因第21页
            1.1.3.4 GO功能富集分析第21页
            1.1.3.5 KEGG通路富集分析第21页
            1.1.3.6 蛋白互作网络第21-22页
            1.1.3.7 统计分析第22页
    1.2 结果第22-23页
        1.2.1 识别表达差异基因及miRNAs第22页
        1.2.2 靶基因预测及验证第22页
        1.2.3 差异基因的GO功能富集分析与KEGG通路富集分析第22-23页
        1.2.4 PPI网络构建及关键基因筛选第23页
    1.3 讨论第23-30页
    1.4 小结第30-32页
二、RAD21、NDC80和BUB1B基因功能体外实验研究第32-47页
    2.1 对象和方法第32-39页
        2.1.1 动物来源第32页
        2.1.2 实验仪器与试剂第32-34页
        2.1.3 实验方法第34-39页
            2.1.3.1 大鼠椎间盘获取第34页
            2.1.3.2 髓核细胞分离与培养第34-36页
            2.1.3.3 慢病毒质粒载体合成第36-37页
            2.1.3.4 细胞分组与转染第37页
            2.1.3.5 免疫组织化学法第37-38页
            2.1.3.6 MTT法第38页
            2.1.3.7 流式细胞术第38-39页
            2.1.3.8 统计学分析第39页
    2.2 结果第39-40页
        2.2.1 髓核细胞形态学观察第39页
        2.2.2 不同siRNA序列沉默效率比较第39页
        2.2.3 沉默NDC80、BUB1B及RAD21基因对髓核细胞增殖的影响第39页
        2.2.4 沉默NDC80、BUB1B及RAD21基因对髓核细胞周期分布与凋亡率的影响第39-40页
        2.2.5 沉默NDC80、BUB1B及RAD21基因沉默对髓核细胞Ⅱ型胶原含量的影响第40页
    2.3 讨论第40-46页
    2.4 小结第46-47页
三、RAD21、NDC80和BUB1B基因功能体内实验研究第47-66页
    3.1 对象和方法第47-55页
        3.1.1 实验动物第47页
        3.1.2 实验仪器与试剂第47-49页
            3.1.2.1 实验仪器第47-48页
            3.1.2.2 实验试剂第48-49页
        3.1.3 实验方法第49-55页
            3.1.3.1 大鼠的麻醉第49-50页
            3.1.3.2 大鼠椎间盘退变模型的制备第50页
            3.1.3.3 大鼠椎间盘的分离第50-51页
            3.1.3.4 HE染色第51页
            3.1.3.5 免疫组织化学染色第51-52页
            3.1.3.6 大鼠椎间盘髓核组织总RNA的提取和qRT-PCR第52-55页
    3.2 实验结果第55页
        3.2.1 大鼠椎间盘退变动物模型的构建第55页
        3.2.2 大鼠退变椎间盘髓核组织中NDC80、BUB1B和RAD21基因表达量变化第55页
    3.3 讨论第55-64页
    3.4 小结第64-66页
结论第66-68页
论文创新点第68-69页
参考文献第69-92页
发表论文和参加科研情况说明第92-94页
附录第94-100页
综述第100-121页
    综述参考文献第109-121页
致谢第121-122页
个人简历第122页

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