| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一部分 绞股蓝总皂苷对HDL_2引起的HepG2细胞胆固醇摄取的影响 | 第12-24页 |
| 一、实验材料与方法 | 第12-15页 |
| (一) 实验材料 | 第12-13页 |
| 1. 实验试剂 | 第12页 |
| 2. 实验仪器 | 第12-13页 |
| 3. 溶液配制 | 第13页 |
| (二) 实验方法 | 第13-15页 |
| 1. 血浆高密度脂蛋白2 (HDL_2)提取及DiI-HDL_2的制备 | 第13-14页 |
| 2. HepG2细胞培养 | 第14页 |
| 3. MTT法检测GPS对HDL_2引起的HepG2细胞增值活力的影响 | 第14页 |
| 4. 油红O染色检测GPS对HDL_2引起的HepG2细胞脂滴分布的影响 | 第14-15页 |
| 5. 酶法检测GPS对HDL_2引起的HepG2细胞胆固醇含量的影响 | 第15页 |
| 6. 流式细胞术检测GPS对HDL_2引起的HepG2细胞胆固醇摄取的影响 | 第15页 |
| 二、结果 | 第15-21页 |
| (一) HDL_2提取及DiI-HDL2的鉴定 | 第15-16页 |
| (二) GPS对HDL_2引起的HepG2细胞增值活力的影响 | 第16页 |
| (三) GPS对HDL_2引起的HepG2细胞油红O染色的影响 | 第16-17页 |
| (四) GPS对HDL_2引起的HepG2细胞胆固醇含量的影响 | 第17-18页 |
| (五) 流式细胞术检测GPS对HepG2细胞摄取HDL_2-CE的影响 | 第18-21页 |
| 三、分析与讨论 | 第21-23页 |
| 四、小结 | 第23-24页 |
| 第二部分 绞股蓝总皂苷对HDL_2引起的HepG2细胞SR-B1、HMGCR受体表达的影响 | 第24-37页 |
| 一、实验材料与方法 | 第24-30页 |
| (一) 实验材料 | 第24-26页 |
| 1. 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2. 实验仪器 | 第25页 |
| 3. 溶液配制 | 第25-26页 |
| (二) 实验方法 | 第26-30页 |
| 1. 细胞总RNA的提取及纯度的测定 | 第26-27页 |
| 2. 细胞膜蛋白的提取与测定 | 第27页 |
| 3. Realtime-PCR检测GPS对HDL_2引起的HepG2细胞SR-B1、HMGCR mRNA表达的影响 | 第27-29页 |
| 4. Western-blot检测GPS对HDL_2引起的HepG2细胞SR-B1、HMGCR蛋白表达的影响 | 第29-30页 |
| 二、结果 | 第30-34页 |
| (一) 紫外分光光度法检测细胞总RNA纯度及浓度 | 第30-31页 |
| (二) GPS对HDL_2引起的HepG2细胞SR-B1、HMGCR mRNA表达的影响 | 第31页 |
| 1. GPS对HDL_2引起的HepG2细胞SR-B1 mRNA表达的影响 | 第31页 |
| 2. GPS对HDL_2引起的HepG2细胞HMGCR mRNA表达的影响 | 第31页 |
| (三) GPS对HDL_2引起的HepG2细胞SR-B1、HMGCR蛋白表达的影响 | 第31-34页 |
| 1. GPS对HDL_2引起的HepG2细胞SR-B1受体蛋白表达的影响 | 第31页 |
| 2. GPS对HDL_2引起的HepG2细胞HMGCR蛋白表达的影响 | 第31-34页 |
| 三、分析与讨论 | 第34-36页 |
| (一) GPS对HDL_2引起的HepG2细胞SR-B1表达的影响 | 第34-35页 |
| (二) GPS对HDL_2引起的HepG2细胞HMGCR表达的影响 | 第35-36页 |
| 四、小结 | 第36-37页 |
| 第三部分 绞股蓝总皂苷对HDL_2引起的HepG2细胞蛋白质组的影响 | 第37-56页 |
| 一、实验材料与方法 | 第37-42页 |
| (一) 实验材料 | 第37-40页 |
| 1. 实验试剂 | 第37-38页 |
| 2. 实验仪器 | 第38-39页 |
| 3. 溶液配制 | 第39-40页 |
| (二) 实验方法 | 第40-42页 |
| 1. 细胞总蛋白提取 | 第40页 |
| 2. 双向电泳(2-DE) | 第40-42页 |
| 3. 凝胶扫描及差异蛋白分析 | 第42页 |
| 4. 胶内酶解及质谱鉴定 | 第42页 |
| 二、结果 | 第42-48页 |
| (一) 双向电泳 | 第42-44页 |
| 1. 2-DE电泳硝酸银染色图谱 | 第42-44页 |
| 2. 银染图谱差异蛋白分析结果 | 第44页 |
| (二) 质谱鉴定 | 第44-48页 |
| 1. 差异蛋白质的质谱鉴定结果 | 第44-45页 |
| 2. 差异蛋白质的功能分类 | 第45-48页 |
| 三、分析与讨论 | 第48-55页 |
| (一) GPS通过调节抗炎抗氧化相关功能蛋白,维持细胞的氧化还原自稳状态 | 第48-49页 |
| (二) GPS通过调节参与钙离子调控的蛋白水平,维持胞内钙离子的平衡 | 第49页 |
| (三) GPS通过调节细胞物质代谢相关蛋白的表达,抑制肿瘤细胞的生长、转移与扩散 | 第49-52页 |
| 1. GPS调节参与细胞蛋白质代谢相关蛋白的表达 | 第49-50页 |
| 2. GPS调节参与细胞核酸代谢相关蛋白的表达 | 第50页 |
| 3. GPS调节参与细胞糖酵解相关蛋白的表达 | 第50-51页 |
| 4. GPS调节参与肿瘤细胞转化、迁移、生长等相关蛋白的表达 | 第51-52页 |
| (四) GPS通过调节参与细胞调控相关蛋白的表达,维持细胞骨架与内环境的稳态 | 第52-54页 |
| (五) GPS调节参与ATP和葡萄糖合成相关蛋白的表达,维持胞内能量代谢的稳定 | 第54-55页 |
| 四、小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 附图 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 文献综述 | 第70-76页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
