| 课题来源 | 第2-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 文献综述 Importinβ1蛋白在病毒复制中的作用研究进展 | 第11-23页 |
| 1 Importinβ1蛋白的结构特征 | 第12-14页 |
| 2 Importinβ1蛋白介导的病毒蛋白入核转运机制 | 第14-16页 |
| 3 Importinβ1蛋白在病毒复制中的作用研究 | 第16-19页 |
| 4 药物阻断importinβ1蛋白参与的病毒复制 | 第19-20页 |
| 5 Importinβ1蛋白在NF-κB信号通路中的作用 | 第20-21页 |
| 6 小结 | 第21-22页 |
| 7 展望 | 第22-23页 |
| 试验研究 | 第23-66页 |
| 第一章 鸡importinβ1基因的克隆及生物信息学分析 | 第23-35页 |
| 1 材料 | 第23-25页 |
| 1.1 细胞 | 第23-24页 |
| 1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-28页 |
| 2.1 鸡importinβ1基因的克隆 | 第25-28页 |
| 2.2 鸡importinβ1蛋白生物信息学分析 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-33页 |
| 3.1 鸡importinβ1基因的克隆 | 第28-29页 |
| 3.2 鸡importinβ1蛋白生物信息学分析 | 第29-33页 |
| 3.2.1 鸡importinβ1蛋白理化性质分析 | 第29-30页 |
| 3.2.2 鸡importinβ1蛋白二级结构及亚细胞定位分析 | 第30-31页 |
| 3.2.3 鸡importinβ1基因同源性分析 | 第31-32页 |
| 3.2.4 鸡importinβ1基因遗传进化分析 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第二章 鸡importinβ1基因重组原核表达载体的构建与表达 | 第35-47页 |
| 1 材料 | 第36-37页 |
| 1.1 细菌和质粒 | 第36页 |
| 1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 1.3 主要仪器 | 第36-37页 |
| 2 方法 | 第37-42页 |
| 2.1 重组原核表达载体pET-32a-importinβ1的构建 | 第37-40页 |
| 2.1.1 引物设计与合成 | 第37-38页 |
| 2.1.2 鸡importinβ1基因扩增与纯化 | 第38页 |
| 2.1.3 鸡importinβ1基因与载体pET-32a(＋)连接和转化 | 第38-39页 |
| 2.1.4 重组原核表达载体pET-32a-importinβ1的鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2 pET-32a-importinβ1原核表达及条件优化 | 第40-42页 |
| 2.2.1 pET-32a-importinβ1原核表达 | 第40-41页 |
| 2.2.2 条件优化 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-46页 |
| 3.1 重组原核表达载体pET-32a-importinβ1的构建及鉴定 | 第42-44页 |
| 3.2 pET-32a-importinβ1原核表达及条件优化 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 第三章 NDVM基因重组原核表达载体的构建与表达 | 第47-57页 |
| 1 材料 | 第47-48页 |
| 1.1 细菌和质粒 | 第47-48页 |
| 1.2 主要试剂 | 第48页 |
| 1.3 主要仪器 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-51页 |
| 2.1 重组原核表达载体pGEX-6p-M的构建 | 第48-51页 |
| 2.1.1 引物设计与合成 | 第48-49页 |
| 2.1.2 NDVM基因扩增与纯化 | 第49页 |
| 2.1.3 M基因与载体pGEX-6p-1连接和转化 | 第49-50页 |
| 2.1.4 重组原核表达载体pGEX-6p-M的鉴定 | 第50-51页 |
| 2.2 pGEX-6p-M原核表达及条件优化 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-55页 |
| 3.1 重组原核表达载体pGEX-6p-M的构建及鉴定 | 第51-53页 |
| 3.2 pGEX-6p-M原核表达及条件优化 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 GSTPull-down验证NDVM蛋白与鸡importinβ1蛋白的相互作用 | 第57-66页 |
| 1 材料 | 第57-58页 |
| 1.1 主要试剂 | 第57-58页 |
| 1.2 主要仪器 | 第58页 |
| 2 方法 | 第58-62页 |
| 2.1 蛋白复性 | 第58-60页 |
| 2.2 GSTPull-down | 第60页 |
| 2.3 SDS-PAGE电泳及WesternBlotting鉴定 | 第60-62页 |
| 3 结果 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| 全文小结 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录1 | 第74-76页 |
| 主要试剂配制 | 第74-76页 |
| 附录2 | 第76-77页 |
| 硕士研究生期间发表的学术论文 | 第76-77页 |
