| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstruct | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| 1. 禽呼肠孤病毒的病原学 | 第11-12页 |
| 1.1 病毒的形态结构和理化特性 | 第11页 |
| 1.2 病毒的生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.3 禽呼肠孤病毒的血清型 | 第12页 |
| 2. 禽呼肠孤病毒的分子生物学特性 | 第12-14页 |
| 2.1 病毒的基因组 | 第12页 |
| 2.2 病毒的蛋白和功能 | 第12-14页 |
| 3. 禽呼肠孤病毒的流行病学 | 第14-15页 |
| 4. 禽呼肠孤病毒的疫苗研究进展 | 第15-17页 |
| 4.1 弱毒苗 | 第15页 |
| 4.2 灭活苗 | 第15-16页 |
| 4.3 基因工程疫苗 | 第16-17页 |
| 第二章 表达禽呼肠孤病毒σB、σC蛋白的重组马立克氏病毒构建 | 第17-43页 |
| 1. 材料 | 第17-19页 |
| 1.1 菌株、质粒、蛋白及病毒 | 第17-18页 |
| 1.2 细胞、鸡胚及实验动物 | 第18页 |
| 1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 1.4 分子生物学软件 | 第18-19页 |
| 1.5 主要仪器 | 第19页 |
| 2. 方法 | 第19-27页 |
| 2.1 σB蛋白抗体的间接ELISA检测方法的建立 | 第19-21页 |
| 2.1.1 引物设计与合成 | 第19页 |
| 2.1.2 病毒RNA的提取与反转录 | 第19-20页 |
| 2.1.3 原核表达载体pET-σB的构建 | 第20页 |
| 2.1.4 ARV σB蛋白的原核表达 | 第20-21页 |
| 2.1.5 ARV σB蛋白的的纯化 | 第21页 |
| 2.1.6 ARV阳性血清的制备 | 第21页 |
| 2.1.7 ELISA方法的建立 | 第21页 |
| 2.2 重组rMDV-σB和rMDV-σC的构建 | 第21-25页 |
| 2.2.1 转移载体pU/D-σB和pU/D-σC的构建 | 第21-24页 |
| 2.2.2 重组病毒rMDV-σB和rMDV-σC的获得 | 第24-25页 |
| 2.2.3 重组病毒rMDV-σB和rMDV-σC的鉴定 | 第25页 |
| 2.3 重组病毒rMDV-σB和rMDV-σC分别对ARV GX/2010/1和MDV RB1B强毒株免疫保护试验 | 第25-27页 |
| 2.3.1 重组病毒rMDV-σB和rMDV-σC的空斑计数实验 | 第25-26页 |
| 2.3.2 ARV GX/2010/1鸡胚半数感染量(EID_(50))的测定 | 第26页 |
| 2.3.3 ARV GX/2010/1强毒株免疫保护试验 | 第26-27页 |
| 2.3.4 MDV RB1B毒株免疫保护试验 | 第27页 |
| 2.3.5 统计学分析 | 第27页 |
| 3. 结果 | 第27-41页 |
| 3.1 σB蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第27-29页 |
| 3.1.1 ARV的σB基因PCR产物的鉴定 | 第27-28页 |
| 3.1.2 原核表达载体的鉴定 | 第28-29页 |
| 3.1.3 重组质粒pET-σB表达产物的鉴定 | 第29页 |
| 3.1.4 ELISA方法的建立 | 第29页 |
| 3.2 重组病毒的构建 | 第29-35页 |
| 3.2.1 转移载体pU/D-σB和pU/D-σC的构建 | 第29-32页 |
| 3.2.2 重组病毒的挑选和纯化 | 第32-33页 |
| 3.2.3 rMDV-σB和rMDV-σC的鉴定 | 第33-35页 |
| 3.3 重组病毒rMDV-σB和rMDV-σC的免疫效力 | 第35-41页 |
| 3.3.1 重组病毒rMDV-σB和rMDV-σC的空斑计数试验结果 | 第35-36页 |
| 3.3.2 ARV GX/2010/1鸡胚半数感染量(EIDso)的测定 | 第36页 |
| 3.3.3 rMDV-σB和rMDV-σC病毒对ARV GX/2010/1毒株免疫保护效力 | 第36-37页 |
| 3.3.4 攻ARV强毒后体重变化情况 | 第37-38页 |
| 3.3.5 血清抗体变化 | 第38-39页 |
| 3.3.6 MDV RB1B毒株免疫保护试验 | 第39-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-43页 |
| 全文总结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
