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柔嫩艾美耳球虫病毒RNA依赖性RNA聚合酶互作蛋白的筛选及功能研究

中文摘要第5-7页
abstract第7-9页
引言第14-16页
第一篇 文献综述第16-28页
    第1章 寄生虫病毒的研究进展第16-21页
        1 寄生虫病毒生物学特征第16-17页
        2 病毒对于寄生虫毒力的影响第17-19页
            2.1 阴道毛滴虫病毒对虫体毒力的影响第17页
            2.2 利什曼原虫病毒对利什曼原虫毒力的影响第17-18页
            2.3 隐孢子虫病毒对虫体毒力的影响第18-19页
            2.4 贾第虫病毒对虫体毒力的影响第19页
            2.5 棘阿米巴病毒对棘阿米巴的影响第19页
        3 寄生虫病毒载体在寄生虫方面的应用第19-21页
    第2章 泛素及去泛素化系统第21-26页
        1 泛素系统第21-22页
        2 去泛素化系统第22页
        3 去泛素化酶的对靶蛋白的调控机制研究第22-26页
            3.1 去泛素化酶对于修饰蛋白的调节第22-24页
            3.2 去泛素化酶的内切与外切第24-25页
            3.3 去泛素化酶结合并切割泛素链第25-26页
    第3章 端粒酶调控的研究进展第26-28页
        1 端粒酶的调控蛋白第26-27页
        2 TERT的泛素化调节第27页
        3 TERT在寄生虫方面的研究第27-28页
第二篇 研究内容第28-84页
    第1章 RDRP互作蛋白的筛选及互作关系验证第28-45页
        1 材料与方法第28-36页
            1.1 材料第28-30页
            1.2 方法第30-36页
        2 结果第36-42页
            2.1 RDRP重组克隆质粒的鉴定第36-37页
            2.2 重组蛋白RDRP在酵母细胞中表达情况及自激活作用检测第37-38页
            2.3 阳性克隆鉴定第38-39页
            2.4 GST+OTU和RDRP基因的克隆第39-40页
            2.5 重组杆状病毒基因组DNA的PCR鉴定第40-41页
            2.6 重组蛋白的表达及鉴定第41页
            2.7 pull-down第41-42页
            2.8 免疫共沉淀验证结果第42页
        3 讨论第42-44页
        4 小结第44-45页
    第2章 RDRP体外对OTU去泛素化酶活性的影响第45-59页
        1 材料与方法第45-51页
            1.1 材料第45-46页
            1.2 方法第46-51页
        2 结果第51-56页
            2.1 OTU~(C239A),OTU~(D236A)或者OTU~(H351A)突变体的构建第51-52页
            2.2 重组Bacmid的鉴定第52-53页
            2.3 重组Bacmid转染Sf9昆虫细胞的结果第53页
            2.4 重组融合蛋白的纯化第53页
            2.5 OTU去泛素化酶活性测定第53-54页
            2.6 OTU去泛素化酶对K48、K6水解效率的比较第54-55页
            2.7 OTU/RDRP复合物和OTU去泛素化酶活性对比第55-56页
        3 讨论第56-58页
        4 小结第58-59页
    第3章 E.tenellaTERT和OTU的互作鉴定第59-70页
        1 材料与方法第59-64页
            1.1 材料第59-60页
            1.2 方法第60-64页
        2 结果第64-68页
            2.1 E.tenella总RNA的提取第64-65页
            2.2 pGBK-T7-TRBD重组质粒的鉴定第65页
            2.3 阳性克隆鉴定第65-66页
            2.4 重组原核表达质粒的构建第66-67页
            2.5 重组蛋白的表达及纯化第67页
            2.6 pulldown第67-68页
        3 讨论第68-69页
        4 小结第69-70页
    第4章 OTU对E.tenella端粒酶活性的影响第70-84页
        1 材料与方法第70-76页
            1.1 试验材料第70-71页
            1.2 方法第71-76页
        2 结果第76-83页
            2.1 目的片段扩增第76-77页
            2.2 重组质粒的鉴定第77页
            2.3 体外转录第77-78页
            2.4 病毒载体介导的锤头状核酶体外切割效率的检测第78-80页
            2.5 转染后GFP的PCR鉴定第80页
            2.6 GFP-Ham-OTU株的流式细胞检测和分选第80-81页
            2.7 E.tenellaOTU表达量的检测第81-82页
            2.8 TRAP法检测E.tenella端粒酶活性第82-83页
        3 讨论第83页
        4 小结第83-84页
结论第84-86页
参考文献第86-100页
学术论文及发表情况第100-102页
导师简介第102-104页
作者简介第104-106页
致谢第106页

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