| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 缩略词 (Abbreviation) | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.1 红花简介 | 第12-17页 |
| 1.1.1 形态学特性 | 第12页 |
| 1.1.2 生态学特性与分布 | 第12-13页 |
| 1.1.3 化学成分及研究现状 | 第13-14页 |
| 1.1.4 红花黄色素提取方法研究进展 | 第14-15页 |
| 1.1.5 红花黄色素分离纯化方法研究进展 | 第15-16页 |
| 1.1.6 红花黄色素药理研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2 阿尔兹海默病简介 | 第17-20页 |
| 1.2.1 概述 | 第17页 |
| 1.2.2 发病机制 | 第17-19页 |
| 1.2.3 治疗现状 | 第19页 |
| 1.2.4 阿尔兹海默病研究模型 | 第19-20页 |
| 1.3 Tau蛋白与AD | 第20-21页 |
| 1.4 SH-SY5Y细胞 | 第21页 |
| 1.5 线粒体氧化损伤与AD | 第21-22页 |
| 1.6 本研究的内容和意义 | 第22-23页 |
| 2 红花黄色素B的分离与纯化 | 第23-30页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.1 药品与试剂 | 第23页 |
| 2.1.2 实验仪器与设备 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 色谱条件的建立 | 第24页 |
| 2.2.2 红花黄色素B提取分离工艺流程 | 第24-25页 |
| 2.2.3 红花黄色素的提取 | 第25页 |
| 2.2.4 红花黄色素B的分离 | 第25-26页 |
| 2.2.5 红花黄色素B的纯化 | 第26-27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-29页 |
| 2.3.1 红花黄色素提取结果 | 第27-28页 |
| 2.3.2 红花黄色素经大孔吸附树脂AB-8纯化结果 | 第28页 |
| 2.3.3 红花黄色素B经SephadexLH-20纯化结果 | 第28-29页 |
| 2.4 实验讨论 | 第29-30页 |
| 3 SH-SY5Y细胞分化为成熟神经元及冈田酸损伤模型的建立 | 第30-48页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第30-32页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第30页 |
| 3.1.2 药品与试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.3 实验仪器与设备 | 第31-32页 |
| 3.2 主要试剂配制 | 第32-35页 |
| 3.2.1 ATRA溶液的配制 | 第32页 |
| 3.2.2 MTT溶液的配制 | 第32页 |
| 3.2.3 OA溶液的配制 | 第32-33页 |
| 3.2.4 吉姆萨溶液的配制 | 第33页 |
| 3.2.5 Hoechst33342荧光探针配制 | 第33页 |
| 3.2.6 Westernblot工作液的配制 | 第33-35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-39页 |
| 3.3.1 细胞复苏、传代、培养 | 第35页 |
| 3.3.2 ATRA诱导SHSY5Y细胞分化 | 第35-36页 |
| 3.3.3 吉姆萨染色观察细胞形态 | 第36页 |
| 3.3.4 流式细胞术检测细胞周期 | 第36页 |
| 3.3.5 MTT法检测OA对SH-SY5Y细胞存活率的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.6 OA致分化SH-SY5Y细胞为Tau蛋白过度磷酸化阿尔兹海默病模型 | 第37页 |
| 3.3.7 Westernblot检测p-Tau蛋白表达 | 第37-39页 |
| 3.4 数据处理 | 第39-40页 |
| 3.5 实验结果 | 第40-46页 |
| 3.5.1 ATRA诱导细胞分化 | 第40-41页 |
| 3.5.2 OA致成熟神经元损伤 | 第41-46页 |
| 3.6 实验讨论 | 第46-48页 |
| 4 三种红花黄色素对成熟神经元突触损伤的影响 | 第48-58页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第48-49页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第48页 |
| 4.1.2 药品与试剂 | 第48页 |
| 4.1.3 实验仪器与设备 | 第48-49页 |
| 4.2 主要试剂的配制 | 第49-50页 |
| 4.2.1 三种红花黄色素溶液 | 第49页 |
| 4.2.2 MTT溶液的配制 | 第49-50页 |
| 4.3 实验方法 | 第50-51页 |
| 4.3.1 细胞复苏、传代、培养 | 第50页 |
| 4.3.2 MTT法检测三种红花黄色素对SH-SY5Y细胞存活率的影响 | 第50页 |
| 4.3.3 吉姆萨染色观察细胞形态 | 第50页 |
| 4.3.4 Westernblot检测三种红花黄色素对p-Tau蛋白表达的影响 | 第50-51页 |
| 4.4 数据处理 | 第51页 |
| 4.5 实验结果 | 第51-56页 |
| 4.5.1 三种红花黄色素对细胞存活率的影响 | 第51-52页 |
| 4.5.2 三种红花黄色素对OA所致分化成熟神经元损伤的保护作用 | 第52-55页 |
| 4.5.3 Westernbloting检测p-Tau蛋白表达 | 第55-56页 |
| 4.6 实验讨论 | 第56-58页 |
| 5 红花黄色素对成熟神经元突触损伤的保护作用机制 | 第58-68页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第58-59页 |
| 5.1.1 细胞株 | 第58页 |
| 5.1.2 药品与试剂 | 第58页 |
| 5.1.3 实验仪器与设备 | 第58-59页 |
| 5.2 主要试剂配制 | 第59-60页 |
| 5.2.1 三种红花黄色素溶液的配制 | 第59页 |
| 5.2.2 荧光探针溶液的配制 | 第59-60页 |
| 5.3 实验方法 | 第60-62页 |
| 5.3.1 细胞复苏、传代、培养 | 第60页 |
| 5.3.2 两个时间点细胞处理方法 | 第60页 |
| 5.3.3 DCFH-DA检测细胞总活性氧 | 第60-61页 |
| 5.3.4 JC-1检测细胞线粒体膜电位 | 第61页 |
| 5.3.5 MitoSOX检测细胞线粒体源活性氧 | 第61页 |
| 5.3.6 MitoTracker?GreenFM检测线粒体数量 | 第61-62页 |
| 5.3.7 ATP含量检测 | 第62页 |
| 5.4 数据处理 | 第62-63页 |
| 5.5 实验结果 | 第63-66页 |
| 5.5.1 红花黄色素影响细胞内总活性氧 | 第63页 |
| 5.5.2 红花黄色素影响线粒体源活性氧 | 第63-64页 |
| 5.5.3 红花黄色素影响线粒体膜电位 | 第64页 |
| 5.5.4 红花黄色素影响线粒体数量 | 第64-65页 |
| 5.5.5 红花黄色素影响细胞内ATP含量 | 第65-66页 |
| 5.6 实验讨论 | 第66-68页 |
| 总结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 附录1 攻读学位期间发表的学术论文 | 第78-79页 |
