| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 分子荧光探针概论 | 第12-13页 |
| 1.2.1 分子荧光探针构造与设计理论 | 第12页 |
| 1.2.2 荧光分子探针发光机理 | 第12-13页 |
| 1.3 检测次氯酸反应的荧光探针 | 第13-16页 |
| 1.3.1 基于碳碳双键氧化的荧光探针 | 第13-14页 |
| 1.3.2 基于碳氮双键氧化反应原理 | 第14页 |
| 1.3.3 基于氧化酰胺键氧化的荧光探针 | 第14-15页 |
| 1.3.4 基于氧化烷基硫为亚硫酰基的荧光探针 | 第15-16页 |
| 1.4 检测二氧化硫(HSO_3~-)的荧光探针 | 第16-17页 |
| 1.4.1 基于HSO_3~-与醛基的亲核反应的荧光探针 | 第16页 |
| 1.4.2 基于HSO_3~-与碳碳双键加成反应的荧光探针 | 第16-17页 |
| 1.5 检测甲醛(formaldehyde)的荧光探针 | 第17-19页 |
| 1.5.1 甲醛与肼基反应的荧光探针 | 第17-18页 |
| 1.5.2 以氮杂-柯普重排为反应原理检测甲醛的荧光探针 | 第18-19页 |
| 1.6 论文的设计核心思想 | 第19-20页 |
| 第二章 对SO_2/HClO双响应比率型荧光探针的设计合成及其在生物体中的应用 | 第20-40页 |
| 2.1 引入 | 第20-21页 |
| 2.2 实验部分 | 第21-26页 |
| 2.2.1 仪器设备和实验药品 | 第21-22页 |
| 2.2.2 探针的合成过程 | 第22-23页 |
| 2.2.3 合成二氧化硫给予体(SO_2 donor)BTSA | 第23-24页 |
| 2.2.4 活性氧,活性硫及其他干扰离子的配制 | 第24页 |
| 2.2.5 荧光分析 | 第24页 |
| 2.2.6 理论计算 | 第24页 |
| 2.2.7 荧光量子产率的计算 | 第24页 |
| 2.2.8 待测物检测限的计算 | 第24-25页 |
| 2.2.9 细胞毒性实验 | 第25页 |
| 2.2.10 细胞的培养环境与激光共聚焦成像 | 第25页 |
| 2.2.11 斑马鱼内的共聚焦成像 | 第25页 |
| 2.2.12 在Hela细胞内探究SO_2/HClO的串扰实验 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第26-39页 |
| 2.3.1 探针(MPIBA)的设计思路 | 第26-27页 |
| 2.3.2 探针对二氧化硫和次氯酸的光学响应 | 第27-29页 |
| 2.3.3 验证实验机理的能量计算 | 第29-30页 |
| 2.3.4 探针与待测物HSO_3~-/HClO响应的条件优化(温度,pH,时间) | 第30-31页 |
| 2.3.5 探针选择性实验探究 | 第31页 |
| 2.3.6 探针的光稳定性,穿透性和细胞毒性 | 第31-32页 |
| 2.3.7 探针用来检测细胞内源性的二氧化硫 | 第32-34页 |
| 2.3.8 探针用来检测细胞内源性的次氯酸 | 第34-36页 |
| 2.3.9 斑马鱼体内用于检测内源性二氧化硫和次氯酸 | 第36-37页 |
| 2.3.10 二氧化硫及次氯酸对细胞凋亡的串扰响应 | 第37-39页 |
| 2.4 结论 | 第39-40页 |
| 第三章 高灵敏比率型荧光探针用来检测细胞内甲醛并探究甲醛引诱的间接氧化损伤 | 第40-58页 |
| 3.1 引入 | 第40-41页 |
| 3.2 实验部分 | 第41-45页 |
| 3.2.1 实验药品设备 | 第41-42页 |
| 3.2.2 探针的合成过程及表征 | 第42页 |
| 3.2.3 光学实验探究 | 第42-43页 |
| 3.2.4 细胞培养及成像 | 第43页 |
| 3.2.5 流式细胞分析 | 第43页 |
| 3.2.6 斑马鱼体内的共聚焦成像 | 第43页 |
| 3.2.7 鼠组织的共聚焦成像 | 第43-44页 |
| 3.2.8 细胞毒性实验 | 第44页 |
| 3.2.9 荧光量子产率计算 | 第44页 |
| 3.2.10 检测限的计算 | 第44-45页 |
| 3.2.11 理论计算 | 第45页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第45-57页 |
| 3.3.1 设计策略 | 第45-47页 |
| 3.3.2 探针PIPBA与甲醛反应的光学分析 | 第47页 |
| 3.3.3 选择性实验的探究 | 第47-49页 |
| 3.3.4 细胞内甲醛的共聚焦成像 | 第49-52页 |
| 3.3.5 探究甲醛的间接氧化机理 | 第52-54页 |
| 3.3.6 斑马鱼内甲醛成像 | 第54页 |
| 3.3.7 小鼠体内探讨甲醛的生物活性 | 第54-57页 |
| 3.4 结论 | 第57-58页 |
| 第四章 双光子比率型荧光探针用来协同检测细胞及活体线粒体内SO_2/HClO | 第58-76页 |
| 4.1 引入 | 第58-60页 |
| 4.2 实验部分 | 第60-63页 |
| 4.2.1 实验药品及设备 | 第60-61页 |
| 4.2.2 探针DNB的合成路线 | 第61-62页 |
| 4.2.3 探针的合成路线 | 第62页 |
| 4.2.4 试验中所用到活性氧,活性硫和活性氮的配制 | 第62页 |
| 4.2.5 紫外和荧光光谱的分析 | 第62页 |
| 4.2.6 荧光量子产率的计算 | 第62页 |
| 4.2.7 探针对HClO和SO_2检测限的计算 | 第62-63页 |
| 4.2.8 探针双光子吸收截面的计算 | 第63页 |
| 4.2.9 细胞的培养和成像 | 第63页 |
| 4.2.10 斑马鱼体内共聚焦成像 | 第63页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第63-75页 |
| 4.3.1 探针的设计策略 | 第63-66页 |
| 4.3.2 探针DND对SO_2/HClO的光谱响应探究 | 第66-68页 |
| 4.3.3 响应时间及其pH探究 | 第68页 |
| 4.3.4 选择性试验探究 | 第68-69页 |
| 4.3.5 线粒体共定位实验 | 第69-70页 |
| 4.3.6 细胞内源性SO_2的检测和定量研究 | 第70-72页 |
| 4.3.7 细胞内源性HClO的检测和定量研究 | 第72-73页 |
| 4.3.8 协同检测活体内SO_2/HClO的串扰过程 | 第73-75页 |
| 4.4 结论 | 第75-76页 |
| 第五章 总结与展望 | 第76-78页 |
| 5.1 论文总结 | 第76页 |
| 5.2 展望 | 第76-78页 |
| 附录 | 第78-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 研究生期间发表的研究成果 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
