中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
符号说明 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-21页 |
1 PA理化性质 | 第13页 |
2 PA的作用机制 | 第13-14页 |
2.1 PA的作用途径 | 第13-14页 |
2.2 PA对脂肪组织和蛋白质的作用 | 第14页 |
3 PA的吸收 | 第14页 |
4 PA的代谢 | 第14-15页 |
5 PA的毒性 | 第15页 |
6 β-激动剂的限量标准 | 第15-16页 |
7 PA及其β-受体激动剂类药物残留的检测方法研究进展 | 第16-20页 |
7.1 样品前处理 | 第16-18页 |
7.1.1 固相萃取法 | 第17页 |
7.1.2 液-液萃取法 | 第17页 |
7.1.3 超声萃取法 | 第17-18页 |
7.2 PA及其β-受体激动剂类药物的残留检测方法 | 第18-20页 |
7.2.1 高效液相色谱法 | 第18页 |
7.2.2 气相色谱和气相色谱-质谱联用法 | 第18-19页 |
7.2.3 液相色谱-质谱联用法 | 第19页 |
7.2.4 电化学方法 | 第19页 |
7.2.5 酶联免疫吸附法 | 第19-20页 |
8 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
第二章 苯乙醇胺A人工抗原的合成与鉴定 | 第21-30页 |
1 材料和方法 | 第21-25页 |
1.1 主要试剂 | 第21页 |
1.2 主要仪器 | 第21-22页 |
1.3 主要溶液系统 | 第22页 |
1.4 PA人工抗原的制备 | 第22-24页 |
1.4.1 PA衍生物的制备 | 第22-23页 |
1.4.2 PA衍生物与载体蛋白偶联 | 第23页 |
1.4.3 透析袋的处理 | 第23-24页 |
1.5 完全抗原浓度的测定 | 第24页 |
1.6 完全抗原的鉴定 | 第24-25页 |
1.6.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮蓝染色鉴定 | 第24页 |
1.6.2 完全抗原紫外扫描鉴定 | 第24-25页 |
1.6.3 完全抗原免疫学方法鉴定 | 第25页 |
2 结果 | 第25-28页 |
2.1 TCL法监测新物质的生成 | 第25页 |
2.2 人工抗原蛋白浓度的测定 | 第25-26页 |
2.3 凝胶电泳和考马斯亮蓝染色鉴定 | 第26-27页 |
2.4 完全抗原紫外扫描鉴定 | 第27页 |
2.5 完全抗原免疫学方法鉴定 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28-30页 |
第三章 PA单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的初步建立 | 第30-47页 |
1 材料和方法 | 第30-37页 |
1.1 实验动物 | 第30页 |
1.2 主要试剂 | 第30-31页 |
1.3 主要仪器与耗材 | 第31页 |
1.4 主要溶液系统 | 第31-32页 |
1.5 PA单克隆抗体的制备 | 第32-35页 |
1.5.1 免疫程序设计 | 第32页 |
1.5.2 ELISA法检测小鼠抗体效价水平及测定包被原最佳工作浓度 | 第32-33页 |
1.5.3 细胞融合 | 第33-34页 |
1.5.4 杂交瘤细胞的培养及筛选 | 第34页 |
1.5.5 阳性细胞亚克隆培养 | 第34-35页 |
1.5.6 杂交瘤细胞株稳定性试验 | 第35页 |
1.5.7 腹水的制备 | 第35页 |
1.6 单克隆抗体的鉴定及ELISA方法的建立 | 第35-37页 |
1.6.1 腹水蛋白浓度的测定 | 第35页 |
1.6.2 腹水效价的测定 | 第35-36页 |
1.6.3 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第36页 |
1.6.4 单克隆抗体特异性的鉴定 | 第36页 |
1.6.5 最佳封闭液和最佳封闭浓度的确定 | 第36页 |
1.6.6 抗原抗体最佳工作浓度的确定 | 第36-37页 |
1.6.7 CiELISA标准曲线及相关参数的计算 | 第37页 |
2 结果 | 第37-45页 |
2.1 小鼠抗体水平及包被原最佳工作浓度的确定 | 第37-38页 |
2.2 骨髓瘤细胞生长状态 | 第38-39页 |
2.3 单克隆杂交瘤细胞生长状态 | 第39页 |
2.4 杂交瘤细胞的筛选、建株及稳定性 | 第39页 |
2.5 腹水的制备 | 第39-40页 |
2.6 单克隆抗体的鉴定 | 第40-45页 |
2.6.1 腹水蛋白浓度的测定 | 第40页 |
2.6.2 腹水效价测定 | 第40-41页 |
2.6.3 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第41-42页 |
2.6.4 单克隆抗体特异性的鉴定 | 第42页 |
2.6.5 腹水D6H8最佳封闭液的测定 | 第42-43页 |
2.6.6 抗原抗体最佳工作浓度的测定 | 第43页 |
2.6.7 CiELISA标准工作曲线及参数 | 第43-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
第四章 猪肉样品中PA添加回收试验 | 第47-52页 |
1 材料与方法 | 第47-48页 |
1.1 主要试剂 | 第47页 |
1.2 仪器与耗材 | 第47页 |
1.3 样品添加回收试验 | 第47-48页 |
1.3.1 样品预处理 | 第47页 |
1.3.2 样品基质干扰 | 第47-48页 |
1.3.3 标准工作曲线的绘制 | 第48页 |
1.3.4 样品中PA回收率的测定 | 第48页 |
2 结果 | 第48-51页 |
2.1 样品添加回收试验 | 第48-51页 |
2.1.1 样品基质干扰 | 第48-50页 |
2.1.2 样品溶液标准抑制曲线的绘制 | 第50页 |
2.1.3 样品添加回收率的测定 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-52页 |
全文结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59-60页 |