摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-10页 |
材料与方法 | 第10-33页 |
1 实验材料 | 第10-12页 |
1.1 菌株来源和病人资料 | 第10页 |
1.2 实验试剂 | 第10-11页 |
1.3 实验仪器 | 第11-12页 |
2 实验方法 | 第12-33页 |
2.1 标本的保存 | 第12页 |
2.2 细菌的鉴定及药敏 | 第12-13页 |
2.3 耐药表型筛查 | 第13页 |
2.3.1 碳青霉烯酶筛查:改良Hodge试验 | 第13页 |
2.3.2 金属酶筛查:亚胺培南EDTA E-test试剂条法协同试验 | 第13页 |
2.4 耐药基因的检测 | 第13-19页 |
2.4.1 基因组的提取:DNA煮沸裂解法 | 第13-14页 |
2.4.2 耐药基因相关引物信息 | 第14-16页 |
2.4.3 PCR扩增耐药基因 | 第16-19页 |
2.5 脉冲场凝胶电泳(PFGE) | 第19-22页 |
2.5.1 实验试剂配制 | 第19-20页 |
2.5.2 样品胶块的制备 | 第20-21页 |
2.5.3 核酸内切酶酶切 | 第21页 |
2.5.4 电泳及显影 | 第21-22页 |
2.6 多位点序列分型(MLST) | 第22-24页 |
2.7 液相接合实验 | 第24-25页 |
2.8 质粒分型 | 第25-27页 |
2.9 bla_(NDM-1)基因杂交定位 | 第27-33页 |
2.9.1 实验试剂配制 | 第27-28页 |
2.9.2 DNA探针的制备和浓度检测 | 第28-29页 |
2.9.3 样品胶块的制备 | 第29-30页 |
2.9.4 S1核酸酶酶切及电泳 | 第30-31页 |
2.9.5 DNA杂交转膜 | 第31页 |
2.9.6 DNA杂交 | 第31-33页 |
结果 | 第33-55页 |
1 细菌鉴定、药敏试验结果 | 第33页 |
2 耐药表型筛查实验结果 | 第33-34页 |
3 原代菌和接合子特性及耐药基因携带情况 | 第34-44页 |
4 脉冲场凝胶电泳及多位点序列分型结果 | 第44-53页 |
5 Southern blot结果 | 第53-55页 |
讨论 | 第55-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
综述 | 第66-98页 |
综述参考文献 | 第87-98页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第98-99页 |
附录 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |