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儿童碳青霉烯类抗菌药物耐药肠杆菌的分子流行病学研究

摘要第2-4页
abstract第4-5页
引言第8-10页
材料与方法第10-33页
    1 实验材料第10-12页
        1.1 菌株来源和病人资料第10页
        1.2 实验试剂第10-11页
        1.3 实验仪器第11-12页
    2 实验方法第12-33页
        2.1 标本的保存第12页
        2.2 细菌的鉴定及药敏第12-13页
        2.3 耐药表型筛查第13页
            2.3.1 碳青霉烯酶筛查:改良Hodge试验第13页
            2.3.2 金属酶筛查:亚胺培南EDTA E-test试剂条法协同试验第13页
        2.4 耐药基因的检测第13-19页
            2.4.1 基因组的提取:DNA煮沸裂解法第13-14页
            2.4.2 耐药基因相关引物信息第14-16页
            2.4.3 PCR扩增耐药基因第16-19页
        2.5 脉冲场凝胶电泳(PFGE)第19-22页
            2.5.1 实验试剂配制第19-20页
            2.5.2 样品胶块的制备第20-21页
            2.5.3 核酸内切酶酶切第21页
            2.5.4 电泳及显影第21-22页
        2.6 多位点序列分型(MLST)第22-24页
        2.7 液相接合实验第24-25页
        2.8 质粒分型第25-27页
        2.9 bla_(NDM-1)基因杂交定位第27-33页
            2.9.1 实验试剂配制第27-28页
            2.9.2 DNA探针的制备和浓度检测第28-29页
            2.9.3 样品胶块的制备第29-30页
            2.9.4 S1核酸酶酶切及电泳第30-31页
            2.9.5 DNA杂交转膜第31页
            2.9.6 DNA杂交第31-33页
结果第33-55页
    1 细菌鉴定、药敏试验结果第33页
    2 耐药表型筛查实验结果第33-34页
    3 原代菌和接合子特性及耐药基因携带情况第34-44页
    4 脉冲场凝胶电泳及多位点序列分型结果第44-53页
    5 Southern blot结果第53-55页
讨论第55-59页
结论第59-60页
参考文献第60-66页
综述第66-98页
    综述参考文献第87-98页
攻读学位期间的研究成果第98-99页
附录第99-100页
致谢第100-101页

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