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基于诺如病毒P粒子载体的EV71/CVA16表位展示、免疫原性研究及中和表位鉴定

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第一章 绪论第12-24页
    1. 手足口病简介第12-19页
        1.1 手足口病的临床症状第12-14页
        1.2 EV71和CVA16的病原学第14-15页
        1.3 手足口病的临床和分子流行病学第15-18页
        1.4 手足口病的治疗与预防第18-19页
    2. 特异性抗原表位的筛选第19-22页
        2.1 抗原表位的筛选方式第19-20页
        2.2 抗原表位的呈递载体第20-22页
    3. 本文立题依据与实验设计思路第22-24页
第二章 实验材料与方法第24-57页
    2.1 实验材料第24-39页
        2.1.1 细胞系及病毒第24-25页
        2.1.2 短肽及灭活、VLPs蛋白第25页
        2.1.3 质粒、菌种和细胞第25-26页
        2.1.4 实验动物第26页
        2.1.5 主要仪器第26-28页
        2.1.6 常用试剂第28-29页
        2.1.7 主要溶剂配制第29-32页
        2.1.8 相关引物的设计和合成第32-39页
    2.2 实验方法第39-57页
        2.2.1 表位的选择第39-42页
        2.2.2 pET28a-PP-EV71和pET28a-PP-CVA16嵌合质粒的构建第42-49页
        2.2.3 pET28a-PP-EV71和pET28a-PP-CVA16嵌合蛋白表达及纯化第49-50页
        2.2.4 目的蛋白的鉴定第50-51页
        2.2.5 免疫实验第51-52页
        2.2.6 免疫评价第52-56页
        2.2.7 蛋白结构预测第56页
        2.2.8 统计学分析第56-57页
第三章 实验结果与分析第57-74页
    3.1 嵌合质粒pET28a(+)-PP-epitope的构建第57-61页
    3.2 PP-epitope嵌合蛋白的诱导表达及纯化第61页
    3.3 PP-epitope嵌合蛋白的鉴定第61-63页
        3.3.1 SDS-PAGE和Western Blot检测目的蛋白表达第61页
        3.3.2 嵌合蛋白的定量分析第61-63页
    3.4 免疫策略第63页
    3.5 血清检测与抗体评估第63-65页
        3.5.1 免疫血清中结合抗体的检测第63-64页
        3.5.2 免疫血清中特异性中和抗体的检测第64-65页
        3.5.3 免疫血清的体内保护力评价第65页
    3.6 PP-71-6嵌合蛋白结构的表征第65-70页
        3.6.1 电镜分析第65-66页
        3.6.2 3D结构模拟第66-70页
    3.7 中和表位71-6的鉴定与特征第70-74页
第四章 讨论第74-76页
第五章 结论第76-77页
参考文献第77-81页
作者简介及科研成果第81-82页
致谢第82页

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