摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
1. 手足口病简介 | 第12-19页 |
1.1 手足口病的临床症状 | 第12-14页 |
1.2 EV71和CVA16的病原学 | 第14-15页 |
1.3 手足口病的临床和分子流行病学 | 第15-18页 |
1.4 手足口病的治疗与预防 | 第18-19页 |
2. 特异性抗原表位的筛选 | 第19-22页 |
2.1 抗原表位的筛选方式 | 第19-20页 |
2.2 抗原表位的呈递载体 | 第20-22页 |
3. 本文立题依据与实验设计思路 | 第22-24页 |
第二章 实验材料与方法 | 第24-57页 |
2.1 实验材料 | 第24-39页 |
2.1.1 细胞系及病毒 | 第24-25页 |
2.1.2 短肽及灭活、VLPs蛋白 | 第25页 |
2.1.3 质粒、菌种和细胞 | 第25-26页 |
2.1.4 实验动物 | 第26页 |
2.1.5 主要仪器 | 第26-28页 |
2.1.6 常用试剂 | 第28-29页 |
2.1.7 主要溶剂配制 | 第29-32页 |
2.1.8 相关引物的设计和合成 | 第32-39页 |
2.2 实验方法 | 第39-57页 |
2.2.1 表位的选择 | 第39-42页 |
2.2.2 pET28a-PP-EV71和pET28a-PP-CVA16嵌合质粒的构建 | 第42-49页 |
2.2.3 pET28a-PP-EV71和pET28a-PP-CVA16嵌合蛋白表达及纯化 | 第49-50页 |
2.2.4 目的蛋白的鉴定 | 第50-51页 |
2.2.5 免疫实验 | 第51-52页 |
2.2.6 免疫评价 | 第52-56页 |
2.2.7 蛋白结构预测 | 第56页 |
2.2.8 统计学分析 | 第56-57页 |
第三章 实验结果与分析 | 第57-74页 |
3.1 嵌合质粒pET28a(+)-PP-epitope的构建 | 第57-61页 |
3.2 PP-epitope嵌合蛋白的诱导表达及纯化 | 第61页 |
3.3 PP-epitope嵌合蛋白的鉴定 | 第61-63页 |
3.3.1 SDS-PAGE和Western Blot检测目的蛋白表达 | 第61页 |
3.3.2 嵌合蛋白的定量分析 | 第61-63页 |
3.4 免疫策略 | 第63页 |
3.5 血清检测与抗体评估 | 第63-65页 |
3.5.1 免疫血清中结合抗体的检测 | 第63-64页 |
3.5.2 免疫血清中特异性中和抗体的检测 | 第64-65页 |
3.5.3 免疫血清的体内保护力评价 | 第65页 |
3.6 PP-71-6嵌合蛋白结构的表征 | 第65-70页 |
3.6.1 电镜分析 | 第65-66页 |
3.6.2 3D结构模拟 | 第66-70页 |
3.7 中和表位71-6的鉴定与特征 | 第70-74页 |
第四章 讨论 | 第74-76页 |
第五章 结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-81页 |
作者简介及科研成果 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |