| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 1 引言 | 第17-19页 |
| 2 病毒样颗粒研究进展 | 第19-31页 |
| 2.1 病毒样颗粒的形成 | 第19-21页 |
| 2.2 病毒样颗粒的免疫原性 | 第21-23页 |
| 2.2.1 树突状细胞与病毒样颗粒 | 第21页 |
| 2.2.2 B淋巴细胞与病毒样颗粒 | 第21-22页 |
| 2.2.3 T淋巴细胞与病毒样颗粒 | 第22-23页 |
| 2.3 病毒样颗粒的种类 | 第23-27页 |
| 2.3.1 无囊膜的病毒样颗粒 | 第23-25页 |
| 2.3.2 囊膜型病毒样颗粒 | 第25-27页 |
| 2.4 病毒样颗粒的应用 | 第27-29页 |
| 2.4.1 病毒样颗粒作为分子载体 | 第27-28页 |
| 2.4.2 在基础研究和免疫测定中的应用 | 第28-29页 |
| 2.4.3 在疫苗方面的应用 | 第29页 |
| 2.5 结束语 | 第29-31页 |
| 3 核酸疫苗研究进展 | 第31-42页 |
| 3.1 核酸疫苗的构建 | 第31-32页 |
| 3.1.1 目的基因选择与获得 | 第31页 |
| 3.1.2 表达载体的选择 | 第31-32页 |
| 3.1.3 重组表达载体的获得 | 第32页 |
| 3.2 核酸疫苗的免疫机理 | 第32-34页 |
| 3.2.1 CpG基序与TLR9 | 第32-33页 |
| 3.2.2 DNA疫苗与AIM2 | 第33页 |
| 3.2.3 DNA疫苗与DAI | 第33-34页 |
| 3.2.4 DNA疫苗与其它传感器分子 | 第34页 |
| 3.3 核酸疫苗的佐剂 | 第34-38页 |
| 3.3.1 细胞因子佐剂 | 第34-37页 |
| 3.3.2 CpG佐剂 | 第37页 |
| 3.3.3 Poly(I:C)佐剂 | 第37-38页 |
| 3.4 核酸疫苗免疫方法 | 第38-39页 |
| 3.5 核酸疫苗的优点及存在问题 | 第39-40页 |
| 3.5.1 核酸疫苗存在的优点 | 第39-40页 |
| 3.5.2 核酸疫苗存在的问题 | 第40页 |
| 3.6 核酸疫苗的展望 | 第40-42页 |
| 4 实验一、EEEV/WEEV假病毒中和试验的建立 | 第42-55页 |
| 4.1 材料 | 第42-43页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第42页 |
| 4.1.2 细菌、质粒、细胞 | 第42页 |
| 4.1.3 设备和仪器 | 第42-43页 |
| 4.2 方法 | 第43-46页 |
| 4.2.1 重组质粒的构建与鉴定 | 第43-45页 |
| 4.2.2 假病毒的包装与鉴定 | 第45-46页 |
| 4.2.3 假病毒感染滴度的测定 | 第46页 |
| 4.2.4 假病毒感染的抑制实验 | 第46页 |
| 4.2.5 假病毒中和试验的建立 | 第46页 |
| 4.3 结果 | 第46-53页 |
| 4.3.1 目的基因扩增结果 | 第46-48页 |
| 4.3.2 重组质粒的鉴定结果 | 第48页 |
| 4.3.3 假病毒的获得与鉴定 | 第48-49页 |
| 4.3.4 假病毒感染滴度的测定 | 第49-50页 |
| 4.3.5 假病毒感染的抑制实验 | 第50-53页 |
| 4.3.6 假病毒中和试验的建立 | 第53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-54页 |
| 4.5 小结 | 第54-55页 |
| 5 实验二、EEEV病毒样颗粒疫苗的构建、鉴定与实验免疫研究 | 第55-69页 |
| 5.1 材料 | 第55-56页 |
| 5.1.1 菌种、质粒和细胞 | 第55页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第55页 |
| 5.1.3 家蚕细胞培养基 | 第55-56页 |
| 5.1.4 设备和仪器 | 第56页 |
| 5.1.5 实验动物 | 第56页 |
| 5.2 方法 | 第56-60页 |
| 5.2.1 重组杆状病毒基因组的获得 | 第56-57页 |
| 5.2.2 细胞转染与重组杆状病毒的获得 | 第57-58页 |
| 5.2.3 病毒样颗粒的表达与鉴定 | 第58页 |
| 5.2.4 动物免疫 | 第58-59页 |
| 5.2.5 免疫检测 | 第59-60页 |
| 5.3 结果 | 第60-67页 |
| 5.3.1 目的基因扩增结果 | 第60-61页 |
| 5.3.2 重组质粒鉴定结果 | 第61页 |
| 5.3.3 重组杆状病毒基因组的鉴定结果 | 第61-62页 |
| 5.3.4 病毒样颗粒表达鉴定结果 | 第62-63页 |
| 5.3.5 病毒样颗粒免疫实验结果 | 第63-67页 |
| 5.4 讨论 | 第67-68页 |
| 5.5 小结 | 第68-69页 |
| 6 实验三、WEEV病毒样颗粒疫苗的构建、鉴定与实验免疫研究 | 第69-86页 |
| 6.1 材料 | 第69-70页 |
| 6.1.1 质粒、菌种和细胞 | 第69页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第69页 |
| 6.1.3 昆虫细胞培养基 | 第69-70页 |
| 6.1.4 设备和仪器 | 第70页 |
| 6.1.5 实验动物 | 第70页 |
| 6.2 方法 | 第70-75页 |
| 6.2.1 重组杆状病毒基因组的获得 | 第70-71页 |
| 6.2.2 细胞转染与重组杆状病毒的获得 | 第71-72页 |
| 6.2.3 病毒样颗粒的表达与鉴定 | 第72-73页 |
| 6.2.4 病毒样颗粒的免疫原性研究 | 第73页 |
| 6.2.5 免疫指标的检测 | 第73-75页 |
| 6.3 结果 | 第75-83页 |
| 6.3.1 目的基因扩增结果 | 第75-76页 |
| 6.3.2 重组质粒鉴定结果 | 第76页 |
| 6.3.3 重组杆状病毒基因组的鉴定结果 | 第76-77页 |
| 6.3.4 病毒样颗粒表达鉴定结果 | 第77-79页 |
| 6.3.5 病毒样颗粒免疫实验结果 | 第79-83页 |
| 6.4 讨论 | 第83-85页 |
| 6.5 小结 | 第85-86页 |
| 7 实验四、EEEV DNA疫苗的构建、鉴定与免疫原性研究 | 第86-98页 |
| 7.1 材料 | 第86-87页 |
| 7.1.1 细胞、细菌、质粒与实验动物 | 第86-87页 |
| 7.1.2 主要试剂 | 第87页 |
| 7.1.3 设备和仪器 | 第87页 |
| 7.2 方法 | 第87-90页 |
| 7.2.1 重组表达载体构建与鉴定 | 第87页 |
| 7.2.2 重组质粒的转染与表达蛋白鉴定 | 第87-88页 |
| 7.2.3 动物免疫 | 第88-89页 |
| 7.2.4 免疫指标检测 | 第89-90页 |
| 7.3 结果 | 第90-95页 |
| 7.3.1 目的基因扩增 | 第90-91页 |
| 7.3.2 重组质粒的鉴定结果 | 第91页 |
| 7.3.3 重组质粒表达的鉴定 | 第91-92页 |
| 7.3.4 重组质粒的免疫原性检测 | 第92-95页 |
| 7.4 讨论 | 第95-97页 |
| 7.5 小结 | 第97-98页 |
| 8 实验五、WEEV DNA疫苗的构建、鉴定与免疫原性研究 | 第98-107页 |
| 8.1 材料 | 第98-99页 |
| 8.1.1 主要试剂 | 第98页 |
| 8.1.2 细菌、质粒、细胞与实验动物 | 第98页 |
| 8.1.3 设备与仪器 | 第98-99页 |
| 8.2 方法 | 第99-101页 |
| 8.2.1 重组表达载体构建与鉴定 | 第99页 |
| 8.2.2 重组质粒的转染与表达蛋白鉴定 | 第99页 |
| 8.2.3 动物免疫 | 第99页 |
| 8.2.4 免疫指标检测 | 第99-101页 |
| 8.3 结果 | 第101-105页 |
| 8.3.1 目的基因扩增 | 第101页 |
| 8.3.2 重组质粒的鉴定结果 | 第101页 |
| 8.3.3 目的蛋白表达的鉴定 | 第101-102页 |
| 8.3.4 重组质粒的免疫原性检测 | 第102-105页 |
| 8.4 讨论 | 第105-106页 |
| 8.5 小结 | 第106-107页 |
| 9 结论 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-129页 |
| 附录 | 第129-130页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第130页 |
