| 目录 | 第3-6页 |
| 缩写词表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-17页 |
| 1. AKT信号通路 | 第11-13页 |
| 1.1 AKT的分子组成 | 第12页 |
| 1.2 AKT的生理功能 | 第12页 |
| 1.3 AKT的活性异常 | 第12-13页 |
| 2. AKT,肿瘤干细胞和干性调节 | 第13-14页 |
| 2.1 肿瘤干细胞 | 第13页 |
| 2.2 AKT参与干细胞干性调节 | 第13-14页 |
| 3. 核心转录因子与干性调控 | 第14-16页 |
| 3.1 核心转录因子Oct4 | 第14-15页 |
| 3.2 核心转录因子Klf4 | 第15页 |
| 3.3 PI3K/AKT与干性调节因子 | 第15-16页 |
| 4. 本文研究内容 | 第16-17页 |
| 材料与方法 | 第17-32页 |
| 实验材料 | 第17-23页 |
| 1. 实验所用细胞系、菌株和质粒 | 第17页 |
| 2. 限制性内切酶及其他修饰酶 | 第17页 |
| 3. 其它主要试剂及试剂盒 | 第17-18页 |
| 4. 主要仪器设备 | 第18页 |
| 5. 抗体、引物 | 第18页 |
| 6. 引物序列 | 第18-23页 |
| 实验方法 | 第23-32页 |
| 1. 细胞培养 | 第23-24页 |
| 2. 质粒构建和扩增 | 第24-27页 |
| 3. Western Blotting | 第27-29页 |
| 4. 激酶活性分析 | 第29-30页 |
| 5. 大肠杆菌中表达纯化融合蛋白 | 第30页 |
| 6. GST pull-down分析 | 第30页 |
| 7. 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation) | 第30-31页 |
| 8. 染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第31-32页 |
| 结果 | 第32-59页 |
| 1. 放射性核素体外激酶反应 | 第32-34页 |
| 2. AKT磷酸化SATB1的47位丝氨酸 | 第34-39页 |
| 2.1 SATB1含有AKT磷酸化模体 | 第34-35页 |
| 2.2 AKT磷酸化候选位点在SATB1的1-51片段 | 第35-36页 |
| 2.3 AKT磷酸化SATB1的47位丝氨酸 | 第36-37页 |
| 2.4 SATB1S47磷酸化抗体特异性 | 第37-39页 |
| 2.5 AKT磷酸化SATB1依赖于PI3K信号通路 | 第39页 |
| 3. AKT磷酸化SATB1保护其免受凋亡信号降解 | 第39-43页 |
| 3.1 AKT磷酸化影响SATB1亚细胞定位 | 第40页 |
| 3.2 AKT磷酸化影响SATB1与PML共定位 | 第40-41页 |
| 3.3 AKT影响SATB1蛋白稳定性 | 第41-42页 |
| 3.4 CPT诱导凋亡信号对SATB1蛋白稳定性的影响 | 第42-43页 |
| 4. AKT磷酸化Oct4促使其进入泛素化降解途径 | 第43-48页 |
| 4.1 AKT磷酸化Oct4的228位苏氨酸 | 第43-44页 |
| 4.2 Oct4 Thr228磷酸化抗体特异性 | 第44-45页 |
| 4.3 AKT磷酸化Oct4破坏其蛋白稳定性 | 第45-46页 |
| 4.4 AKT磷酸化Oct4促进其被泛素化降解 | 第46页 |
| 4.5 AKT与Oct4相互作用 | 第46-48页 |
| 5. AKT磷酸化Klf4促使其进入泛素化降解途径 | 第48-51页 |
| 5.1 AKT与Klf4相互作用 | 第48页 |
| 5.2 AKT磷酸化Klf4的399位苏氨酸 | 第48-49页 |
| 5.3 AKT活性调控Klf4磷酸化 | 第49页 |
| 5.4 AKT磷酸化Klf4破坏其蛋白稳定性 | 第49-50页 |
| 5.5 AKT磷酸化Klf4促进其被泛素化降解 | 第50-51页 |
| 6. AKT促进SATB1与Sox2结合 | 第51-54页 |
| 6.1 SATB1与Sox2相互作用 | 第51-52页 |
| 6.2 SATB1与Sox2间相互作用结构域 | 第52-53页 |
| 6.3 AKT信号促进SATB1与Sox2蛋白间相互作用 | 第53-54页 |
| 7. AKT调控F9小鼠胚胎癌细胞分化 | 第54-59页 |
| 7.1 RA诱导F9胚胎癌细胞分化 | 第54-55页 |
| 7.2 SATB1的S47磷酸化促进其抑制干性因子表达功能 | 第55-56页 |
| 7.3 SATB1的S47磷酸化促进其抑制干性因子转录能力 | 第56-57页 |
| 7.4 SATB1的S47磷酸化影响其结合Nanog基因座位 | 第57页 |
| 7.5 PI3K信号通路参与调节F9分化进程 | 第57-59页 |
| 讨论 | 第59-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 小结 | 第71-72页 |
| 综述 AKT磷酸化MAD2在有丝分裂中的作用研究 | 第72-94页 |
| 缩写词表 | 第72-73页 |
| 中文摘要 | 第73-74页 |
| Abstract | 第74-75页 |
| 前言 | 第75-78页 |
| 1. 有丝分裂、非整倍体和肿瘤 | 第75页 |
| 2. 有丝分裂期纺锤体组装检测点 | 第75-76页 |
| 3. MAD2的构象和磷酸化修饰 | 第76页 |
| 4. AKT参与G1/S、G2/M期转换 | 第76-77页 |
| 5. AKT与有丝分裂调控 | 第77页 |
| 6. 本文研究内容 | 第77-78页 |
| 材料和方法 | 第78-80页 |
| 1. 反转录病毒包装和稳定细胞系的建立 | 第78页 |
| 2. 慢病毒包装和Tet-on细胞系的建立 | 第78页 |
| 3. 免疫荧光标本制备 | 第78-79页 |
| 4. 细胞同步化 | 第79页 |
| 5. 流式细胞术 | 第79-80页 |
| 结果 | 第80-89页 |
| 1. 体外激酶活性分析确认AKT磷酸化MAD2 | 第80-81页 |
| 2. AKT磷酸化MAD2依赖于PI3K信号 | 第81-82页 |
| 3. AKT与MAD2相互作用 | 第82-83页 |
| 4. AKT磷酸化MAD2不影响其亚细胞定位 | 第83-84页 |
| 5. AKT信号活化上调Hela细胞分裂指数 | 第84-85页 |
| 6. AKT促进MAD2与MAD1结合 | 第85-86页 |
| 7. AKT磷酸化MAD2参与有丝分裂进展 | 第86-87页 |
| 8. 乳腺癌细胞系中AKT/MAD2表达分析 | 第87-89页 |
| 讨论 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-93页 |
| 小结 | 第93-94页 |
| 非论文综述 | 第94-102页 |
| 参考文献 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 个人简历 | 第103-105页 |
