| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 中英缩略词表 | 第7-8页 |
| 第1章 前言 | 第8-10页 |
| 第2章 材料与方法 | 第10-28页 |
| 2.1 材料 | 第10-16页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第10页 |
| 2.1.2 重组质粒及 RNA 干扰片段 | 第10页 |
| 2.1.3 主要材料及试剂 | 第10-11页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第11-12页 |
| 2.1.5 试剂的配置 | 第12-16页 |
| 2.2 方法 | 第16-28页 |
| 2.2.1 细胞培养、复苏、传代及冻存 | 第16-18页 |
| 2.2.2 大鼠酒精性肝纤维化肝星状细胞模型的建立 | 第18页 |
| 2.2.3 质粒提取 | 第18-19页 |
| 2.2.4 质粒瞬时转染 | 第19-20页 |
| 2.2.5 RNA 干扰片段筛选及转染 | 第20页 |
| 2.2.6 RNA 抽提 | 第20-21页 |
| 2.2.7 逆转录 | 第21页 |
| 2.2.8 RT-PCR 检测 Nrf2、α-SMA、I-collagen、β-actin mRNA 表达 | 第21-23页 |
| 2.2.9 Western blot 检测 Nrf2、α-SMA、I-collagen、LC3II、P62、Nqo1、β-actin、TBP 的蛋白表达 | 第23-26页 |
| 2.2.10 MTT（四甲基偶氮唑盐）检测细胞增殖水平 | 第26页 |
| 2.2.11 流式细胞术检测细胞周期分布 | 第26页 |
| 2.2.12 MDC 染色法检测细胞自噬水平 | 第26-27页 |
| 2.2.13 统计学分析 | 第27-28页 |
| 第3章 结果 | 第28-39页 |
| 3.1 自噬抑制剂 3-MA 对酒精刺激下肝星状细胞增殖活化的影响 | 第28-31页 |
| 3.2 自噬抑制剂 3-MA 对肝星状细胞中 Nrf2 核转位及活化的影响 | 第31-32页 |
| 3.3 Nrf2 过表达对酒精刺激下肝星状细胞增殖活化的影响 | 第32-36页 |
| 3.4 Nrf2 在自噬调控酒精诱导的肝星状细胞活化中的作用 | 第36-39页 |
| 第4章 讨论 | 第39-44页 |
| 4.1 国内外研究现状 | 第39-40页 |
| 4.2 肝星状细胞活化在酒精性肝纤维化发病机制中的重要作用 | 第40页 |
| 4.3 酒精所致氧化应激是激活 HSCs 的重要因素 | 第40-41页 |
| 4.4 Nrf2-keap1-ARE 信号通路在酒精致肝内氧化应激中的调控作用 | 第41-42页 |
| 4.5 自噬对 HSCs 活化及 Nrf2-keap1-ARE 信号通路的调控作用及机制 | 第42-44页 |
| 第5章 结论与展望 | 第44-46页 |
| 5.1 结论 | 第44页 |
| 5.2 研究中的不足以及进一步的工作方向 | 第44-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第50页 |
