| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-27页 |
| ·病原相关分子模式激发的免疫反应（PTI） | 第13-14页 |
| ·效应蛋白激发的免疫反应（ETI） | 第14-15页 |
| ·植物激素与植物抗病反应 | 第15-18页 |
| ·水杨酸、茉莉酸与乙烯 | 第15-16页 |
| ·脱落酸 | 第16-17页 |
| ·其它一些与抗病相关的激素 | 第17-18页 |
| ·转录因子 | 第18-25页 |
| ·WRKY 转录因子的发现及其起源 | 第18-19页 |
| ·WRKY 转录因子的结构特点 | 第19-21页 |
| ·WRKY 转录因子的结合序列 | 第21-22页 |
| ·WRKY 转录因子的分类 | 第22页 |
| ·WRKY 转录因子的生物学功能 | 第22-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-51页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第27-28页 |
| ·菌株与质粒 | 第28页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第28页 |
| ·PCR 引物 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-51页 |
| ·RNA 提取 | 第29-31页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第31-32页 |
| ·cDNA 回收纯化与加尾 | 第32页 |
| ·cDNA 全长序列的获得 | 第32-35页 |
| ·植物总DNA 的提取与纯化 | 第35-37页 |
| ·基因组DNA 的获得和启动子的分离 | 第37-38页 |
| ·目的片段的回收 | 第38-39页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第39页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第39页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第39-40页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第40-42页 |
| ·对重组质粒的鉴定 | 第42-43页 |
| ·半定量RT-PCR 检测目的基因的表达 | 第43-44页 |
| ·植物表达载体的构建与转化 | 第44-48页 |
| ·农杆菌介导转化烟草 | 第48-49页 |
| ·转基因植物的鉴定 | 第49页 |
| ·主要的序列分析软件 | 第49-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-72页 |
| ·棉花GhWRKY3 基因的克隆 | 第51-53页 |
| ·棉花RNA 的提取及反转录 | 第51页 |
| ·GhWRKY3 中间片段的分离 | 第51-52页 |
| ·GhWRKY3 5′片段的分离 | 第52页 |
| ·GhWRKY3 3′片段的分离 | 第52页 |
| ·GhWRKY3 全长cDNA 的分离 | 第52-53页 |
| ·GhWRKY3 的序列分析 | 第53-60页 |
| ·GhWRKY3 的全长cDNA 序列分析 | 第53-55页 |
| ·GhWRKY3 编码蛋白序列分析 | 第55-58页 |
| ·GhWRKY3 基因组序列分析 | 第58-60页 |
| ·GhWRKY3 的亚细胞定位分析 | 第60-62页 |
| ·GhWRKY3 的表达特性分析 | 第62-65页 |
| ·GhWRKY3 在棉花不同的组织器官中的表达特性 | 第62页 |
| ·GhWRKY3 在信号分子的诱导下表达特性分析 | 第62-64页 |
| ·GhWRKY3 在非生物胁迫下的表达特性分析 | 第64页 |
| ·GhWRKY3 在生物胁迫下的表达特性分析 | 第64-65页 |
| ·GhWRKY3 在烟草中的超表达及功能初探 | 第65-72页 |
| ·转基因正义表达载体的构建 | 第65页 |
| ·转基因植株的获得 | 第65-66页 |
| ·转基因植株的PCR 鉴定 | 第66-67页 |
| ·转基因植株的半定量RT-PCR 分析 | 第67页 |
| ·T_1 代转基因植株的PCR 鉴定 | 第67-68页 |
| ·T_1 代转基因植株的萌发和萌发后早期的生长情况 | 第68-72页 |
| 4 讨论 | 第72-76页 |
| ·GhWRKY3 蛋白结构特征. | 第72页 |
| ·GhWRKY3 基因启动子序列分析 | 第72页 |
| ·GhWRKY3 在外界环境胁迫下的表达特性分析 | 第72-74页 |
| ·GhWRKY3 在转基因烟草生长发育过程中的作用初探 | 第74-76页 |
| 5 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 附录 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第90页 |
