| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 研究背景和意义 | 第12-13页 |
| 1.2 Ap寡聚体形成及其毒性作用 | 第13-14页 |
| 1.3 kinesin蛋白及其在AD病理性研究中进展 | 第14-15页 |
| 1.4 荧光关联光谱技术及其在AD研究中的应用 | 第15-17页 |
| 1.5 实验设计与流程 | 第17-19页 |
| 2 实验材料 | 第19-24页 |
| 2.1 细胞、载体与宿主菌 | 第19页 |
| 2.2 工具酶与试剂盒 | 第19页 |
| 2.3 主要生化试剂 | 第19-20页 |
| 2.4 主要实验仪器 | 第20页 |
| 2.5 主要溶液配制 | 第20-24页 |
| 3 实验方法 | 第24-38页 |
| 3.1 细胞培养 | 第24-25页 |
| 3.2 质粒构建与鉴定 | 第25-34页 |
| 3.2.1 目的基因获得 | 第25-29页 |
| 3.2.2 质粒构建 | 第29-31页 |
| 3.2.3 转座 | 第31页 |
| 3.2.4 重组杆状病毒基因组DNA(rBacmid DNA)的提取 | 第31页 |
| 3.2.5 rBacmid DNA的PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2.6 重组杆状病毒的获得 | 第32-33页 |
| 3.2.7 Western blot鉴定目的蛋白表达 | 第33-34页 |
| 3.3 目的蛋白纯化 | 第34-35页 |
| 3.4 Aβ42单体标记及寡聚体制备 | 第35页 |
| 3.5 DC-FCCS检测Aβ42寡聚体与KLC间相互作用 | 第35-38页 |
| 3.5.1 仪器及参数 | 第35-37页 |
| 3.5.2 激发体积的校正 | 第37-38页 |
| 4 实验结果 | 第38-48页 |
| 4.1 细胞培养 | 第38页 |
| 4.2 质粒构建与鉴定 | 第38-42页 |
| 4.2.1 目的基因和载体获得 | 第38-40页 |
| 4.2.2 携带KLC-E、E-KLC的杆状病毒表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 4.2.3 表达KLC-E、E-KLC蛋白的重组杆状病毒的获得 | 第41-42页 |
| 4.3 Western blot鉴定目的蛋白表达 | 第42-43页 |
| 4.4 目的蛋白纯化 | 第43-45页 |
| 4.5 DC-FCCS检测Aβ42寡聚体与KLC相互作用 | 第45-48页 |
| 4.5.1 Aβ42寡聚体与KLC相互作用的动力学过程 | 第45-46页 |
| 4.5.2 KLC计量效应对Aβ42寡聚体尺寸的影响 | 第46-47页 |
| 4.5.3 EGFP标签对Aβ42寡聚体与KLC结合效率的影响 | 第47-48页 |
| 5 讨论 | 第48-51页 |
| 6 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录A | 第57-59页 |
| 作者简历及攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第59-61页 |
| 学位论文数据集 | 第61页 |
