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多基因联合治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
英汉縮略语名词对照第10-14页
第一章 前言第14-16页
第二章 实验材料第16-21页
    2.1 主要实验材料第16页
        2.1.1 细胞株第16页
        2.1.2 菌种第16页
        2.1.3 实验动物第16页
    2.2 实验试剂第16-17页
    2.3 实验耗材和仪器第17-19页
        2.3.1 实验耗材第17-18页
        2.3.2 实验仪器第18-19页
    2.4 培养基和溶液的配制第19-21页
        2.4.1 培养基的配制第19-20页
        2.4.2 溶液的配制第20-21页
第三章 实验方法第21-34页
    3.1 质粒DNA的制备第21-22页
        3.1.1 E.coli的菌种复苏和扩大培养第21页
        3.1.2 质粒DNA的提取第21-22页
    3.2 黑色素瘤B16细胞的培养第22-24页
        3.2.1 B16细胞的复苏第22页
        3.2.2 细胞的换液与传代第22-23页
        3.2.3 B16细胞计数方法第23页
        3.2.4 细胞冻存第23-24页
    3.3 小鼠荷瘤模型的建立第24页
    3.4 石蜡切片的制作与HE染色第24-25页
        3.4.1 石蜡切片的制作第24页
        3.4.2 HE染色第24-25页
    3.5 RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)法鉴定IL-24,IL-12,Bax,Bcl-2,VEGF的表达第25-30页
        3.5.1 肿瘤组织中的总RNA提取第25-26页
        3.5.2 RNA浓度测定第26页
        3.5.3 逆转录合成cDNA第26-27页
        3.5.4 引物设计第27-28页
        3.5.5 PCR扩增反应第28-30页
        3.5.6 PCR扩增产物的检测第30页
    3.6 Western Blot检测Bax,Bcl-2,VEGF,caspase-3,caspase-12蛋白的表达第30-33页
        3.6.1 收集蛋白样本第30-31页
        3.6.2 SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶)电泳第31-33页
    3.7 统计学处理第33-34页
第四章 实验结果第34-45页
    4.1 小鼠黑色素瘤荷瘤模型成功建立第34页
    4.2 基因治疗后对小鼠荷瘤生长的抑制作用第34-35页
    4.3 HE染色各组肿瘤组织形态学观察第35-36页
    4.4 RT-PCR检测肿瘤组织中IL-24,IL-12,Bax,Bcl-2,VEGF mRNA的表达第36-40页
        4.4.1 验证IL-24和IL-12在移植瘤中的成功表达第36-37页
        4.4.2 Bax,Bcl-2和VEGF在移植瘤中的表达第37-40页
    4.5 Western Blot检测肿瘤组织中Bax,Bcl-2,VEGF, Caspase-3,Caspase-12蛋白的表达第40-45页
第五章 讨论第45-48页
结论第48-49页
参考文献第49-52页
致谢第52-53页
综述第53-61页
    参考文献第59-61页

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