致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
1 引言 | 第12-17页 |
1.1 背景和意义 | 第12页 |
1.2 Aβ聚集-解聚的研究概况 | 第12-15页 |
1.2.1 Aβ聚集-解聚的分子机制 | 第12-13页 |
1.2.2 与疾病相关的Aβ结构检测方法研究 | 第13-14页 |
1.2.3 参与Aβ聚集-解聚过程的调节剂以及药物 | 第14-15页 |
1.3 本实验的创新点与研究策略 | 第15-17页 |
2 材料和方法 | 第17-30页 |
2.1 材料 | 第17-22页 |
2.1.1 细胞、载体与宿主菌 | 第17页 |
2.1.2 工具酶与试剂盒 | 第17页 |
2.1.3 主要生化试剂 | 第17-18页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第18页 |
2.1.5 主要溶液配制 | 第18-22页 |
2.2 方法 | 第22-30页 |
2.2.1 重组质粒pFastBacl-VL-VH的筛选和鉴定 | 第22-25页 |
2.2.2 Sf9细胞培养与转染 | 第25-26页 |
2.2.3 病毒的扩增 | 第26页 |
2.2.4 目的蛋白的表达与鉴定 | 第26-27页 |
2.2.5 目的蛋白的镍柱纯化 | 第27页 |
2.2.6 间接ELISA分析单链抗体的抗原识别能力 | 第27页 |
2.2.7 斑点印迹(Dot blot)分析单链抗体结合抗原的能力 | 第27-28页 |
2.2.8 构建并优化体外Aβ“on-pathway”聚集的TEM测试分析体系 | 第28页 |
2.2.9 单链抗体干预Aβ42纤维形成的实验 | 第28-30页 |
3 结果 | 第30-43页 |
3.1 重组质粒pFastBacl-VL-VH的筛选和鉴定 | 第30-32页 |
3.2 蛋白表达与纯化的鉴定 | 第32-33页 |
3.3 单链抗体与抗原结合能力的鉴定 | 第33-34页 |
3.4 TEM分析体外Aβ“on-pathway”聚集的特征 | 第34-36页 |
3.5 单链抗体对Aβ42聚集-解聚的调节 | 第36-43页 |
3.5.1 单链抗体对Aβ42纤维的抑制 | 第36-39页 |
3.5.2 单链抗体对Aβ42已形成纤维的降解 | 第39-40页 |
3.5.3 单链抗体的剂量依赖实验 | 第40-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
附录 | 第50-52页 |
作者简历及攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第52-54页 |
学位论文数据集 | 第54页 |