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白藜芦醇降低FLS自噬导致线粒体功能障碍和细胞凋亡

英文缩略词表(Abbreviation)第8-10页
摘要第10-13页
ABSTRACT第13-15页
1 引言第16-17页
2 实验材料第17-21页
    2.1 实验动物第17-18页
        2.1.1 大鼠种属和品系第17页
        2.1.2 大鼠饲养条件第17-18页
    2.2 实验主要仪器与设备第18-19页
    2.3 实验主要试剂第19-20页
    2.4 实验主要试剂盒及抗体第20-21页
3 实验方法第21-32页
    3.1 SD大鼠分组及AA关节炎模型的建立第21-22页
        3.1.1 SD大鼠的分组第21页
        3.1.2 AA关节炎模型的建立第21页
        3.1.3 大鼠的给药处理第21-22页
    3.2 AA大鼠肿胀度测定和继发性关节炎症指数评分第22-23页
        3.2.1 AA大鼠肿胀度测定第22页
        3.2.2 AA大鼠继发性关节炎症指数评分第22-23页
        3.2.3 AA大鼠痛觉敏感实验第23页
    3.3 病理学检查第23-25页
        3.3.1 AA大鼠膝关节及踝关节HE染色第23-24页
        3.3.2 AA大鼠膝关节免疫组织化学染色第24-25页
    3.4 成纤维样滑膜细胞的原代培养和鉴定第25-26页
        3.4.1 成纤维样滑膜细胞的原代培养第25-26页
        3.4.2 成纤维样滑膜细胞的鉴定第26页
    3.5 CCK-8 法检测细胞增殖实验第26页
    3.6 成纤维样滑膜细胞凋亡实验的检测第26-27页
        3.6.1 TUNEL法检测细胞凋亡第26-27页
        3.6.2 流式细胞术检测细胞凋亡第27页
        3.6.3 免疫荧光法检测细胞凋亡第27页
    3.7 Western blot方法第27-30页
        3.7.1 大鼠滑膜组织总蛋白的提取第27-28页
        3.7.2 细胞总蛋白的提取第28页
        3.7.3 BCA法测定蛋白浓度第28页
        3.7.4 制胶第28-29页
        3.7.5 电泳第29页
        3.7.6 电转第29页
        3.7.7 目的蛋白的检测第29-30页
    3.8 线粒体功能障碍的检测方法第30-31页
        3.8.1 线粒体电镜的处理方法第30页
        3.8.2 细胞ATP水平的检测第30页
        3.8.3 检测线粒体膜电位(Δψm)的变化第30-31页
        3.8.4 检测细胞Ca2+平衡稳态的变化第31页
    3.9 细胞自噬水平的检测方法第31页
        3.9.1 免疫荧光法检测细胞自噬蛋白的表达第31页
        3.9.2 Western blot法检测细胞自噬蛋白的表达第31页
    3.10 统计学处理第31-32页
4 实验结果第32-48页
    4.1 SD大鼠AA关节炎模型的建立第32-34页
        4.1.1 弗式完全佐剂诱导SD大鼠建立AA模型第32-33页
        4.1.2 弗式完全佐剂诱导SD大鼠炎症变化第33-34页
    4.2 白藜芦醇对AA大鼠关节炎的治疗作用第34-36页
        4.2.1 白藜芦醇对AA大鼠足肿胀度和关节炎指数评分的影响第34-35页
        4.2.2 白藜芦醇对AA大鼠膝关节及踝关节病理学形态的影响第35-36页
    4.3 白藜芦醇促进 AA 大鼠膝关节滑膜组织的凋亡第36-38页
    4.4 白藜芦醇降低AA大鼠膝关节滑膜组织的自噬第38-39页
    4.5 白藜芦醇抑制H_2O_2诱导的成纤维样滑膜细胞增殖第39-40页
        4.5.1 原代滑膜细胞的提取、培养与鉴定第39页
        4.5.2 低浓度H_2O_2促进FLS的异常增殖,白藜芦醇抑制H2O2诱导的FLS增殖第39-40页
    4.6 白藜芦醇促进成纤维样滑膜细胞凋亡第40-41页
    4.7 白藜芦醇降低成纤维样滑膜细胞的自噬第41-45页
        4.7.1 白藜芦醇能够降低FLS的自噬水平第41-43页
        4.7.2 白藜芦醇引起的自噬降低被雷帕霉素所抑制第43页
        4.7.3 白藜芦醇引起的凋亡增加被雷帕霉素所抑制第43-45页
    4.8 白藜芦醇引起成纤维样滑膜细胞的线粒体功能障碍第45-48页
        4.8.1 白藜芦醇引起成纤维样滑膜细胞的线粒体形态改变第45页
        4.8.2 白藜芦醇引起成纤维样滑膜细胞的线粒体膜电位变化第45-46页
        4.8.3 白藜芦醇引起成纤维样滑膜细胞的线粒体产能降低第46-47页
        4.8.4 白藜芦醇引起成纤维样滑膜细胞的胞内Ca~(2+)离子平衡稳态的改变第47-48页
5 讨论第48-52页
6 结论第52-53页
参考文献第53-60页
附录第60-61页
致谢第61-62页
综述 ROS与Nfr2/Keap1-ARE信号通路在类风湿性关节炎中的关键作用及其研究进展第62-68页
    参考文献第66-68页

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